研究报告
酿造
中
国
2011年第4期总第229期
酒精酵母的复合诱变与甜高梁秆汁培养基的优化
周广麒，张学良，王培忠生物工程学院，辽宁
（大连工业大学
大连
116034）
·77.
摘要：以甜高桑秆汁为基本原料，采用UV和DES复合诱变后获得酵母菌株FUD-3，再通过响应面法优化培养基中的营养因子CO(NH,)、MgSO,、KH,PO,、CaCl,和FeCl，提高了酒精的得率。结果表明用别化的方法使酒精酵母耐糖能力提高，通过UV与DES复合诱变的方式进行酵母的选育，以提高其产率。采取响应面法对发酵培养基进行优化，得到各因索的最佳质量浓度CO(NH,)2、MgSO,、KH,PO,、 CaC1,和FeCl,的添加量分别为4.8318g/L、1.3734g/L、4.8114g/L、5.8571g/L0.6962g/L。训育后的醇母F-1与经过复合诱变优化后的醇母 FUD-3发醇相比：残糖由26.41g/L减到9.24g/L、酒精产率由80.28%提高为93.46%，酒精的产量79.29g/L增加为100.44g/L，提高了26.67%。关键调：甜高渠汁；复合诱变；营养因子；响应面法；酒精
中图分类号：Q93355
文献标识码：A
文章编号：05245071(2011)04007704
Complex mutagenesis of alcohol yeast and medium optimization of sweet sorghum stalk juice
ZHOU Guangqi, ZHANG Xueliang, WANG Peizhong
(School of Biological & Food Engineering, Dalian Palytechnic Unitersiy, Dalian 116034, China)
Abstract:Using the sweet sorghum stalk juice as basic raw materials, FUD-3 yeast strain was obtained by UV and DES complex mutagenesis, The medium nutritional factors such as CO( NH, ),, MgSO, KH,PO,, CaCl, and FeCl, were optimized with response surface method. The results showed thst the resist ance sugar capability of alcohol yeast was improved. The optimum medium was as follows; CO(NH,), 4. 8318 g/L, MgSO, 1.3734 g/L, KH,PO, 4. 8114 g/L, CaCl, 5. 8571 g/L and FeCl, 0. 6962 g/L When comparing yeast FUD-3 obtained from complex mutagenesis with acclimated yeast F-1, content of re sidual sugar deeresed from 26.41 g/L to 9.24 g/L, alcobol yield increased from 80. 28% to 93. 46% , and alcohol production was from 79. 29 g/L to 100. 44 g/L, which increased by 26. 67%,
Key words:sweet sorghum stalk juice; complex mutagenesis; mutritional factor; response surface method; alcohol
当前，随着环境的不断恶化，粮食的紧缺，化石能源面临的枯竭，面生物能源以其可再生性引起世界各国科学家的关注。燃料酒精以其独有的性质成为化石能源的理想替代品以生物发酵法最为经济环保。在众多的原料中，C,植物甜高累以其适应性强、抗逆性好、光合速率高、生长速度快、糖分积累快、生物质产量高等优点，可以利用我国的边界性土地，实现了不与人争粮、不与粮争地的间题。甜高架汁液体发酵是研究的重点，目前市场上没有很好的菌株方便于液体发酵和连续化生产，因此筛选出耐酒精、耐高糖、具有凝集型的便于连续化生产的发酵菌株是当前研究的热点“4]。
1材料与方法 1.1试验材料 1.1.1甜高粱
“九甜1号”，大连工业大学甜高梁试验田。 1.1.2菌种
Saccharmyoes.FFCC2167，大连工业大学食品发酵微生
收稿日期：2010-12-16
基金项目：辽宁省教育厅A类项目资助(2008070）
物菌培养与保藏中心。 1.1.3种子培养基
葡萄糖22%，酵母膏0.85%，蛋白陈2%，pH5.0，
115℃灭菌30min。 1.1.4发酵培养基
甜高粱茎秆榨出汁，pH5.0,115℃灭菌30min。根据试验的方案确定CO(NH,）2、MgSO,、KH,PO,、CaCl,和FeCl,的添加量。
1.2试验方法
1.2.1甜高渠汁的制备
去掉叶、穗，茎秆经粉碎后榨汁、过滤，煮沸10min，贮
存于4℃冷藏箱内，备用。 1.2.2出发菌株的获得
将甜高粱汁制成19°Bx培养基中连续培养3代.将酒精产量最多的菌种在22°Bx的培养基中连续培养3代，最后在25°Bx的培养基中培养3代，获得稳定酵母，驯化后获
作者简介：周广股（1957一），男，辽宁大连人，副教授，研究方向为微生物技术与产业化研究。
SSCP解析[J]。微生物学通报，2009，36(9)：1363-1367.
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