研究报告
中国酿造
2016年第35卷第7期
总第293期
耐酸性布拉氏酵母的筛选及高密度培养条件优化
李飞龙陈晓华郑鑫谢永振谭之磊贾士儒
（天津科技大学生物工程学院工业发酵微生物教育部重点实验室天津300457）
.15·
摘要布拉氏酵母菌(Saccharomycesboulardi)是临床上作为益生菌药物治疗肠道疾病使用的唯一一株酵母菌作为微生态制剂，要保证其生物效果必须能够在胃肠道中保持一定的活菌数研究发现影响布拉氏酵母菌在胃肠道中存活的最主要因素是低pH，为提高布拉氏酵母菌在低pH条件下的存活率，该研究采用常压室温等离子体(ARTP)诱变技术对S.boulardii进行诱变最终筛选出3株对低pH值耐受性较好的突变株。对突变株耐低pH稳定性的研究结果表明在传代20次后突变株YB-3具有较好的遗传稳定性其存活率为51.79%。在5L发酵罐中对突变株YB-3高密度培养条件进行优化最终所得布拉氏酵母菌体干质量为58.79g/L比原始菌株提高了55.52%。
关键词布拉氏酵母菌室温常压等离子体诱变高密度培养耐酸性
中图分类号Q815
文章编号0254-5071(2016)07-0015-05
doi:10.11882/j.issn.02545071.2016.07.004
Screening of an acid-resistant Saccharomyces boulardii and optimization of its high
densitycultivationconditions
LI Feilong, CHEN Xiaohua, ZHENG Xin, XIE Yongzhen, TAN Zhilei, JIA Shiru*
(Key Laboratory of Industrial Fermentation Microbiology, Ministry of'Education, College of Biotechnology
Tianjin University of Science & Technology, Tianjin 300457, China)
Abstract: Saccharomyces boulardi is the only strain of yeast as clinical probiotic drugs for the treatment of intestinal diseases, As a microecology preparation, in order to ensure its biological effect, it must be able to maintain a certain number of viable bacteria in the gastrointestinal tract. Re-search showed that low pH was the most important factor affecting S. boulardii survival rate in the gastrointestinal tract. To improve the survival rate of S. boulardii in low pH condition, atmospheric and room temperature plasma (ARTP) was used for S. boulardi mutagenesis. Finally, three mutant stains with thelow pH-resistant were selected. The results of stability of the mutant strains resistant to low pH showed that after 20 times generation, mutant YB-3 had good genetic stability and its survival rate was 51.79%. In 5 L fermentor, the high density cultivation conditions of mutant YB-3
were optimized. The dry cell weight of S. boulardii obtained was 58.79 g/L, which was increased by 55.52% than that of the original strain. Key words: Saccharomyces boulardi; atmospheric and room temperature plasma; high density cultivation; acid resistant
布拉氏酵母（Saccharomycesboulardi)是法国科学家 HenriBoulard在20世纪20年代初期于印尼水果荔枝中分离得到的一株非致病性酵母菌[-)。S.boulardi是临床上作为益生菌药物治疗肠道疾病使用的唯一一株醇母菌β-5目前广泛用于预防和治疗抗生素相关性腹泻、艰难梭菌相关性腹泻、胃肠道炎症的药物中。在许多国家S.boulardi 冻干制剂常作为用于预防儿童和成人的腹泻药物[2。作为微生态制剂S.boulardi常被用于治疗由抗生素和微生物感染引起的腹泻维持胃肠道微环境平衡69。此外其作为饲料添加剂的应用已得到包括中国、欧盟在内的世界上许多国家的认可在畜牧业中也有广阔的应用前景0-12)。
研究表明用S.boulardii处理感染艰难梭菌(Clostrid-iumdifficile)的限菌鼠一次预防小鼠患结肠炎的有效率
收稿日期2016-03-10
基金项目长江学者和创新团队发展计划资助(IRT1166）
为16%，而当小鼠连续摄入S.boulardi时，有效率可达 56%进一步研究表明这种保护作用不仅依赖于摄入 S.boulardi的剂量还和S.boulardi的活体细胞数有关)。在鼠肠道细胞上的研究结果证实了S.boulardi对在乱弧菌(choleratoxinCT)具有抑制作用实验组细胞中CT诱导环磷酸腺苷（cyclic adenosinemonophosphatecAMP）的量比对照组下降了50%经确认发挥作用的是一个120ku 的蛋白如果将布拉氏酵母菌细胞加热杀死时酵母对 cAMP的抑制作用也随之消失[14-1]
根据杜晓蒙1研究表明影响摄入细胞活性的主要因素是胆汁盐、胃肠道消化酶和pH值的变化,其中对 S.boulardii活性影响最大的是pH。HUDSONLE等使小鼠口服10"个S.boulardii活细胞4h后从小鼠肠道只能回
作者简介李飞龙(1988-)男硕士研究生主要从事饲料添加剂方面的研究工作
*通讯作者贾士儒(1954-)男教授，博士主要从事生物防腐剂、发菜、细菌纤维素等的研究工作
?1994-2017 China Academic Journal Electronic Publishing House, All rights reserved.
http://ww.cnki.net