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2010 No.3 Serial No.216
China Brewing
Research Report
响应面优化白腐菌TrameteshirsutaBYBF产漆酶的发酵条件
周喜燕"，谢益民2*，杨海涛"，刘冰"，陈超”
（1.山东轻工业学院制浆造纸科学与技术省部共建教育部重点实验室，山东济南250353；
2.湖北工业大学化学与环境工程学院，湖北武汉430068）
摘要：通过响应面分析方法对白腐菌TrameteshirsutaBYBF产漆酶的发醇条件进行了研究。结果表明，TramcteshirsutaBYBF的最培养条件为：培养基初始pH6.4，培养温度29.3℃，保源为蓝糖，氨源为硝酸铵和酒石酸铵的组合，三角瓶装液量47.5%，播床转速
188r/min，报荡培养14d左右，酶活达到最大值1.58IU/mL. 关键词：白腐菌：TrameteshirsutaBYBF：漆酶：酶活
中图分类号：Q93-335.
文献标识码：A
文章编号：02545071(2010)03002204
Optimization of fermentation conditions for laccase production from white-ror fungi Trametes hirsuta
BYBFbyresponsesurfacemethodology
ZHOU Xiyan', XIE Yimin'2*, YANG Haitao', LIU Bing', CHEN Chao
(I. Key Lab of Paper Science and Technology ofMinistry ofEducation, Shandong Institute of Light Industry, Jinan 250353, China;
2. School of Chemical and Environmental Engineering, Hubei University of Technology, Wuhan 430068, China)
Abstract: Response surface methodology was used to optimize laccase production by White-rot fungi Trametes hirsuta BYBF in shake-flask cultivation. The results showed that the optimal growing condition of Trametes hirsuta BYBF were as follows: initial pH of the culture medium is 6.4; temperature is 29.3 C; carbon source is saccharose and nitrogen source is the combination of ammonium nitrate and ammonium tartrate: The volume of liquid in Erlenmeyer flask is 47.5 %, rotation speed 188 r/min. After cultivation about 14 days, the enzyme activity achieved the maximum value of 1.58IU/ml
Key words: white-rot fungi; Trametes hirsuta BYBF; laccase; enzyme activity
白腐菌是一种能引起木材腐朽的担子菌，因其特殊的代谢类型及独有的细胞外降解特性，能降解各种生物难降解的有机污染物而成为近年来国内外研究的热点。白腐菌降解木素主要是通过分泌的漆酶、木素过氧化物酶和锰过氧化物酶，其中研究最多的是漆酶。漆酶是一种含铜的多酚氧化酶，属于蓝色多铜氧化酶家族围，可氧化木素中的酚型单元形成酚氧白由基，从而导致木素相关结构的降解。在适合的介体存在时，漆酶还可以催化氧化非酚型的木素结构用。由于漆酶具有特殊的催化性能和广泛的作用底物，其在生物制浆、生物漂白以及有毒化合物的降解等方面具有潜在应用价值，因而引起越来越多研究者的关注图。
由于白腐菌是漆酶的主要产生菌，因此从自然界白腐菌中筛选新的高性能产酶菌株是解决漆酶资源知缺的条重要途径6。但真正在自然生长条件下具有很高漆酶活性产量的菌株并不多，能够筛选到优良自然突变体的机会
收稿日期：2009-10-29
基金项目：国家自然科学基金资助项目（20674046：30871996）
也就更小例，这就增加了菌种筛选的难度。所以利用已有的白腐菌，通过优化培养条件提高其产能力是目前的一种重要手段，但是人部分白腐菌的培养周期都比较长，且产酶能力较低，如何提高酶活就成为目前函待解决的问题。
毛栓菌（Trameteshirsuta）又名毛云芝、毛革盖菌，属于多孔菌日的一科。其具有产地多，用途广等优点，作为一种白腐菌可以产生漆酶。本试验对白腐菌（Trameteshirsuta） BYBF发酵条件进行了优化。研究了培养方式、碳源、氮源、温度、pH值、转速和装液量等因素对毛栓菌产漆酶的影响，以期
降低成本，提高酶活，能够为漆酶的工业化利用提供基础。 1材料与方法
1.1材料 1.1.1菌种
白腐菌TrameteshirsutaBYBF：由山东大学微生物技术国家重点实验室提供。
作者简介：周喜燕（1983-)，女，山东烟台人，主要从事植物纤维资源化学方面的研究工作：谢益民*，教授，通讯作者。
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硕士论文，2007
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硕上论文，2006