F
中华人民共和国国家计量技术规范
JJF1654—2017
平板电泳仪校准规范
Calibration Specification for Plate Electrophoresis Apparatus
2018-02-20实施
2017-11-20发布
国家质量监督检验检疫总局发布 JJF1654—2017
平板电泳仪校准规范 Calibration Specificationfor Plate Electrophoresis Apparatus
JJF 1654—2017
归口单位：全国生物计量技术委员会
主要起草单位：中国计量科学研究院
南京市计量监督检测院
参加起草单位：河南省计量科学研究院
广州计量检测技术研究院
本规范委托全国生物计量技术委员会负责解释 JJF1654—2017
本规范主要起草人：
盛灵慧（中国计量科学研究院）陈鸿飞（南京市计量监督检测院）
参加起草人：
王晶（中国计量科学研究院）高运华（中国计量科学研究院）丁峰元（河南省计量科学研究院）张力玲（广州计量检测技术研究院） JJF1654—2017
目
录
引言
(IⅡ) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1 ) (1) (1) (1) (1) (2) (2) (2) (3) (3) (4) (4) (5) (6) (7) (8) (9)
范围 2 引用文件.. 3术语和计量单位· 3.1漂移.. 3.2电泳谱带. 3.3迁移距离
1
概述· 5 计量特性 5.1示值误差…· 5.2漂移.. 5.3迁移距离重复性·. 6校准条件 6.1环境条件 6.2 校准设备及标准物质 7校准项目和校准方法.. 7.1示值误差 7. 2 漂移 7.3 迁移距离重复性
4
校准结果表达复校时间间隔
8 9
附录A 水平板电泳仪校准溶液的配制附录 B 垂直板电泳仪校准溶液的配制附录 C 电压示值误差校准的不确定度评定示例附录 D 校准原始记录推荐格式
...
附录E 校准证书内页推荐格式
- JJF1654—2017
引言
本规范主要参考了GB/T29248—2012《基础电泳装置》、JJG124一2005《电流表电压表、功率表及电阻表》。
本规范为首次发布。
Ⅱ JJF1654—2017
平板电泳仪校准规范
1范围
本规范适用于平板电泳仪（水平板电泳仪和垂直板电泳仪）计量性能的校准，对于其他类型的电泳仪，可参照本规范执行。
2引用文件
本规范引用了下列文件： JJG124一2005电流表、电压表、功率表及电阻表 JJF1071一2010国家计量校准规范编写规则 GB/T29248一2012基础电泳装置凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本规范；凡是不注日期的引用文
件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本规范。
3术语和计量单位
3.1 漂移drift
在规定的工作条件下，单位时间内电泳仪输出电压或电流的变化量。
3.2电泳谱带electrophoresisspectrum
电泳后载体上的样品所形成的条带。
3.3迁移距离migrationlength
规定电泳条件下电泳谱带中心和加样孔中心的距离，单位毫米。
4概述
电泳是指在分散体系中，荷电粒子在外加电场的作用下，向电极定向移动的现象。 电泳仪是利用带电粒子如核酸、蛋白等物质的带电性质不同，在同一电场条件下其移动方向和迁移率不尽相同的原理实现对带电粒子分离与鉴定的仪器。平板电泳仪通常分为水平板和垂直板两类，一般由电源、电泳槽等主要部件以及制胶、冷却部分等辅助部件组成。
5计量特性 5.1示值误差 5.2漂移 5.3迁移距离重复性 6校准条件 6.1 环境条件
- JJF1654—2017
环境温度：（15～35）℃。 相对湿度：不大于75%。
6.2校准设备及标准物质 6.2.1电源校准装置
经检定合格的标准电压表、标准电流表。最小分辨力：电压≤0.1V，电流≤
0.1mA. 6.2.2有证标准物质
300bp片段DNA标准物质（U.≤3%，k=2）；细胞色素C相对分子质量标准物质 (U≤20，k=2)。 6.2.3游标卡尺
经检定合格的游标卡尺，分度值（分辨力）≤0.05mm。
7校准项目和校准方法
7.1示值误差 7.1.1输出电压示值误差
按照图1方式连接电路，将平板电泳仪电源设为恒压模式，依次测定最大工作电压的10%、20%、30%、50%、80%时输出电压，每个校准点分别重复测量3次，计算其算术平均值，按公式（1）计算输出电压示值误差。
AU=U-U.
(1)
式中： AU—平板电泳仪输出电压示值误差，V； U 一平板电泳仪输出电压示值，V： U。平板电泳仪输出电压实测值的平均值，V。
电泳仪
泳槽 电
电源220V
图1电压测试电路示意图
7.1.2输出电流示值误差
按照图2方式连接电路，将电泳仪电源设为恒流模式，依次测定电源最大工作电流 10%、20%、30%、50%、80%处的输出电流，每个校准点分别重复测量3次，计算其算术平均值，按公式（2）计算输出电流示值误差。
2 JJF1654—2017
电泳仪
电源220V
电
泳槽
A
图2电流测试电路示意图
(2)
△I=I-I.
式中：
平板电泳仪输出电流示值误差，mA；
I- 一平板电泳仪输出电流示值，mA； I 平板电泳仪输出电流实测值的平均值，mA。
7.2漂移
按照图2方式连接电路，将平板电泳仪电源的输出电压（电流）设定为150V （50mA），采用电压表（电流表）监测其30min内的电压（电流）变化，记录电压表（电流表）显示的最大值和最小值。按公式（3）计算电压（电流）的漂移。
X=Xmax-Xmir
(3)
式中： X一电压（电流）的漂移：
Xmax 最大电压（电流）； Xmin一最小电压（电流）。 7.3迁移距离重复性 7.3.1水平板电泳仪
将琼脂糖凝胶和适量1×浓度的琼脂糖凝胶电泳缓冲液放人电泳槽，电泳缓冲液以高出凝胶表面（1～2）mm为宜。取浓度为10ng/μL片段DNA标准物质溶液32μL与 5XDNA上样缓冲液8uL均匀混合配制工作标准溶液。移取5uL工作标准溶液加载到胶孔中，平行加载6个样品孔，盖好电泳槽盖子。根据电泳槽大小按7V/cm的标准选择适当的电泳电压，运行30min或当色素距凝胶前端约1/5处时，停止电泳。随后将凝胶样品放在成像系统下成像（如果之前没有加入染料，在进行此步骤之前需要将凝胶放入适当染料中染色30min）。按公式（4）计算片段DNA标准物质谱带的平均迁移距离重复性（RSD）。
7 (d; -d)2
RSD -
X100% d
(4) 3
X
n-1