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2012 Vol.31 No.9 Serial No.246
ChinaBrewing
聚乙烯醇环氧化载体制备及在植酸酶固定化中的应用
周建琴
(江苏食品职业技术学院生物工程系,江苏淮安223003)
Research Report
摘要:该文以聚乙烯醇为原料,利用戊二醛为交联剂,聚合得到交联球形聚乙烯醇,并将其与环氧氧内烷反应用以圖载环氧基团,得到可用于酶固定化的载体。讨论了交联聚乙烯醇球环氧基的固载条件和酶的固定化条件。植酸酶经过固定化后,机械性能和化学稳定性都得到提高,可以重复多次对植酸钠进行水解反应,同时对该自由酶和固定化酶进行酶学特性研究。发现自由酶和固定化酶的最适pH值分别为5.5和7.0,最适反应温度分别为55℃和70℃。植酸酶经固定化,提高了酶的操作、温度、pH值和减稳定性。
关键词:植酸酶;环氧化聚乙烯醇;固定化
文款标识码:A
中图分类号:Q814.2
文章编号:02545071(2012)09011005
Preparation of polyvinyl alcohol epoxidation carrier and its application in immobilization of the phytase
ZHOU Jianqin
(Department of Bioengineering, Jiangsu Food Science College, Huaian 223003, China)
pe[o aod e pap[ee ae s s en s () oae od s reacted with epichlorohydrin for immobilization of epoxy group. The product can be used as enzyme immobilizatioe carrier. The epoxy immobilization conditions of the cross-linked PVA and enzyme immobilization conditions were investigated. The immobilization can stabilize the enzyme and en-sured high mechanical and chemical stability of the biocatalyst, which could be used many times for sodium phytate hydrolysis. Various characteris-tics of immobilized phytase such as optimum thermal storage stability and pH, were evaluated. The optimal pH value of free and immobilized phytase were 5.5 and 7.0, respective, and the optinal thermal free phytase was 55°C, whereas that of immobilized phytase was 70°C. The operational, pH value,
and thermai stabilities of the enzyme were increased by immobilization. Key words: phytase; epoxidation polyvinyl alcohol; immobilization
植酸酶是一类能将植酸及其盐类水解成肌醇和无机磷酸的酶,目前主要用于饲料工业和食品工业,以提高植物性饲料(或食品)中磷的利用率,减少动物粪便中排出的磷对环境的污染,解除植酸的抗营养作用,提高机体对蛋白及多种微量元素的利用率回。植酸酶广泛存在于微生物中,但产酶量很低,因此导致植酸酶的生产成本较高。随着基因工程技术的发展,这个缺点已经通过构建植酸酶
收稿日期:2012-06-14
基金项目:江苏省准安市科技支撑计划(农业)(SN1048)
基因工程菌株的方法予以解决。目前,植酸酶工业化生产中存在的主要问题是当前商业植酸酶的耐热性欠佳,不能完全满足饲料加工的要求。因此,从自然界导找或者通过随机突变筛选耐热植酸酶成为植酸酶研究的热点。
固定化的生物酶最主要的优点是(1)生物酶与反应体系中的反应物或产物易分离:反应完成后经过简单的过滤或离心,酶就可以回收,而且酶活力降低较少;(2)固定化
作者篇介:周建琴(1974-),女,江苏靖江人,硕士,副教授,研究方向为微生物和酶的应用,
统发育分析,初步鉴定菌株A01为囊状青霉Eladia saccula。经测定,其所产菊粉酶主要表现外切酶活性。
通过正交试验确定了其最佳发酵产酶条件为菊粉 30.0g/L,蛋白陈7.0g/L,NaCI5.0g/L,K,HPO,·3H,O3.0g/L 初始pH值为6.0,250mL发酵三角瓶装液量为50mL,30℃、 160r/min振荡培养3d。
根据报道,对野生菌株采用不同理化因子进行诱变可作为筛选优良生产菌株的有效途径,关于该菌的诱变、酶
的纯化和动力学正在研究中。参考文献:
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