现代肿瘤医学2014年4月第22卷第4期
MODERN ONCOLOGY,Apr. 2014,VOL. 22, NO. 04
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下调IQGAP1的表达对非小细胞肺癌PC14/B细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响
刘乐乐，庞海林，骞佩，崔兆勤，申炜炜，牛玉捷，张贺龙
The effect of down regulation of IQGAP1 on the biological behavior of non -small cell lungcancerPC14/B
Liu Lele,Pang Hailin,Qian Pei,Cui Zhaoxun,Shen Weiwei,Niu Yujie,Zhang Helong
Department of Oncology,Tangdu Comprehensive Cancer Center, Tangdu Hospital,the Fourth Military Medical University,Shaanxi Xian 710038,China.
[Abstract] Objective: To study the effect of IQGAPI on the behavior of the non -- small cell lung cancer. Meth-ods : The expression of IQGAP1 was down - regulated by RNA interence( RNAi) in PC14/B and identify by RT PCR and Westerm blot. In colony forming assay ,viro scratch test, Transwell based methodis were used to detect the effect of IQGAPI on the proliferation ,migration and invasion ability of non small cell lung cancer cells. Results: The suc-cessful transfection was confirmed by RT PCR and Westem blot in PC14/B. Down regulation of IQGAP1 can de crease proliferation,migration and invasion potential in PC14/B cell lines, Conclusion: The expression of IQGAPI is closely related to metastasis,
[Key words]IQGAP1 ;small interfering RNA; metastasis;non small cell lung cancer
Modem Oncology 2014,22(04) :0755 0758
目的：探究IQGAP1对非小细胞肺癌细胞株PC14/B生物学行为的影响。方法：构建干扰IQGAP1的
【摘要】
质粒，转染至PC14/B细胞株，体外增殖、迁移、侵装实验观察下调IQGAP1表达后对非小细胞肺癌细胞株 PC14/B生物学行为影响。结果：成功构建1QGAP1表达下调的细胞株RNAi-PC14/B。与转染空载体的细胞株相比，下调IQGAP1的表达能够抑制PC14/B细胞增殖、迁移和侵袭能力。结论：IQGAPI表达可能与肺癌转移相关。
【关键词]IQGAP1;小干扰RNA；转移：非小细胞肺癌
【中图分类号】R73-36*2;R734.2
【文献标识码】A
【文章编号】1672-4992(2014)04075504
复发和转移是肿瘤治疗失败的主要原因之一，肺癌常见的远处转移有脑、骨骼、肝和肺等器官()）。每年有超过15万肿瘤患者发生脑转移，其中约40%-50%来源于肺癌患者[2]。 IQGAPs(IQ motif containing GTPase acting proteins)是一种新近发现的一个蛋白家族，其主要由含RasGAPs催化域的广泛序列和4个能与钙调蛋白相互作用的IO模体构成[3]。在人类中IQGAPs有3个同源物，即IQGAP1、IQGAP2
和IQGAP3。1994年Weissbach(4）首次报道并描述IQGAP1 的基本特性，其位于人染色体15q16上，分子量约为190kD 也是目前研究较为广泛和清楚的支架蛋白之一。我们前期
【收稿日期】
2013 11 05
【修回日期】【基金项目】【作者单位】【作者简介】
【通讯作者】
2013 11 21
国家自然科学基金资助项目（编号：30973488）
第四军医大学唐都医院肿瘤科，陕西西安710038 刘乐乐(1987-），女，陕西延安人，硕士研究生，主要从事肿瘤转移机制的研究。E=mail；liulele0702 163.com,cr
张贺龙（1964-），男，河北沧州人，敦授，博士生导师，主要从事肺癌转移机制的研究。
DOI:10.3969/j. issn.1672 4992.2014.04.07
研究中发现高脑转移潜能肺癌细胞株PC14/B较低脑转移潜能肺癌细胞株PC14中IQGAP1表达高[3]，因此推测IQGAPI 可能与肺瘤脑转移相关。本实验旨在通过构建干扰质粒下调PC14/B细胞株中IQGAP1表达，通过增殖、侵装迁移实验观察其对非小细胞肺癌细胞株的生物学行为的影响，初步解
释肺癌脑转移中可能存在的分子机制。材料与方法
1.1材料
非小细胞肺癌细胞株PC14/B由日本Tokushima大学 Sone和Yano教授惠赠；HRPMI~1640培养液（Gibco公司）；胎牛血清（Gibco公司）；胰酶（碧云天）；Trizol（Invitrogen公司）；嘌呤霉素（Sigma公司);PCR引物由上海"生工"公司设计并合成鼠抗人IQGAP1多克隆抗体、鼠抗人β-actin单克隆抗体（Sigma公司）：HRP结合的羊抗鼠IgG（中杉金桥生物公司）；RT反转录试剂盒（Tiangen公司）；SYBR荧光试剂盒（TaKara公司）。6孔和24孔细胞培养板、Transwell小室（美国Coming），酶标仪（Thermo），用于细胞转染的Lipofectami ne2000和Opti-MEMI（Invitrogen公司）。其余试剂为本实验室保存。