
第31卷,第9期 2011年9月
谱学与光诺光
分
析
Spectroscopy and Spectral Analysis
Vol. 31, No. 9, pp2552-2554 September,2011
铁蛋自脱铁机制的建立及脱铁前后光谱变化的研究
刘文营1.2,张建1.3,童军茂",赵广华3.
1.石河子大学食品学院,新疆石河子832003 2.国家蛋品工程技术研究中心,北京102115
3.中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京100083
摘要建立了一套可以实现铁蛋白脱铁的机制并对脱铁前后铁蛋白的光谱进行了分析。应用连二亚硫酸钠(SodiumHyposulfite)为还原剂与铁蛋白发生还原反应,促使铁蛋白矿化铁的还原释放,此过程中使用2, 2-联吡(2,2-DipyridyD)实时监测股铁状况。通过ICP-MS检测显示,脱铁铁蛋白制备成功。紫外分析结果表明铁蛋白在脱铁之前没有吸收峰,而在脱铁后在280nm处具有明显的吸收峰。荧光分析结果表明,铁蛋
白脱铁前没有荧光发射光谱,面在脱铁后则具有荧光发射光谱。关键调铁蛋白;脱铁铁蛋白;ICP-MS;荧光光谱;紫外光谱
中图分类号:0657.3
引言
文献标识码:A
DOI: 10. 3964/j. issn. 1000-0593(2011)09-2552-03
白不仅可以储存铁和其他金属离子,还可以贮存一些有机小分子物质(+],因此可以对铁蛋白进行改造,利用它作为合成生物来源的纳米材料具有广泛的用途。比如,如果在它的
铁蛋白是生物体内铁储存的主要形式之一,能以可溶的、无毒的、生物可利用的形式存储大量的铁原子,而且可以调节细胞内铁的动态平衡"。在动物体内,铁蛋白具有独特的吸收机制,研究表明快蛋白不仅具有良好的补铁效果而且不会引起毒副作用(2.)
铁蛋白是由24个同源或异源亚基所结合成的一个蛋白质复合体,内部具有直径为8nm的腔体,空腔可以储存4 500个铁离子[},大量的铁原子能够以铁氨化物的形式在蛋白空腔内浓缩,这样就构成了一个球形蛋白质外壳围绕水合铁氧化物的特殊结构$),铁蛋白外壳的亚基以4重、3重和2 重对称的形式相互排列形成通道。这些通道负责铁蛋白与外部环境中物质的交换,是铁离子与氨气分子以及其他分子或离子进出铁蛋白的必经之路,起着联系铁蛋白内部空腔与外部环境的作用。其中,3倍轴通道是铁进人蛋白质的主要通道。铁蛋白3倍轴上高度对称的3个亚基连接所形成的8个孔道还是控制还原剂和整合剂进人铁蛋白矿物中的通道(3),
在适当条件下,铁蛋白可以释放内部矿化的铁核形成中空的蛋白质壳体,以此可以进行铁蛋白纳米材料的制备利用。铁蛋白可以捕获较多数量的非铁重金属离子,脱铁铁蛋
收稿日期:2010-11-03,修订日期:2011-03-15
基金项目:国家自然科学基金项目(30972045)资助
作者简介:对文营,1983年生,石河子大学食品学院硕士研究生
张建,1979年生,石河子大学食品学院讲师刘文营、张建:并列第一作者
蛋白尧空腔内组装特定药物,就可以实现药物的定向运输。以前的研究都着重于运用与铁竞争的整合剂促使铁的释放,本文建立了一套通过铁还原反应促使铁释放的机制,成功实现了脱铁铁蛋白的制备。
1
实验部分
材料与仪器
1.1
铁蛋白,采用文献(]方法提取爽豆铁蛋白;连二亚硫酸钠(sigma),2,2-联吡啶(sigma),Tris(Amresco),HCl(北京化工厂)等试剂,所有试剂均为分析纯;超纯水系统(Milli-Q Grandient,美国),紫外-可见分光光度计(Cary50spectro photometer,美国Varian公司),荧光分光光度计(Eclipse spectrofluorimeter,美国Cary公司),电感合等离子体质
谱(ICP-MS)(Hewlett packard 4500,美国) 1.2方法
将铁蛋白脱铁前后的蛋白浓度定量为1μmol·L-",分别取1mL各进行紫外和荧光分析。紫外扫描波长设置为
200~500nml],荧光打描波长为300~500nm/4.15), e-mail: skyocean_2004@163.com
e-mail; zhangjian0411@163,com
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