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2012 Vol.31 No.4 Serial No.241
ChinaBrewing
酿酒酵母容胱甘肽产量与镐盐抗性关系的研究与应用
陈叶福，李军侠，沈世超，吕鸿雁，肖冬光
(工业发酵微生物教育部重点实验室，天津科技大学生物工程学院，天津300457)
Research Report
摘要：酿酒酵母谷胱甘欧(GSH)生成量与其镉盐抗性关系验证实验和利用镉盐抗性筛选高产GSH消酵母突变株实验证明，酸酒酵母GSH生成量越高，其锅盐抗性越强；反之，酒酵母盐抗性越强，其GSH生成量不一定越高，在紫外诱变实验中利用锅盐抗性筛选高产GSH酿酒酵母实变株，正突变率达到23.5%，最终获得突变株BV54和MV16，其胞内GSH含量较出发菌株B-3和M8分别提高
了32.53%和36.55%。结果表明，这种利用辐盐抗性筛选高产GSH酿酒醇母突变株的自种方法可行且高效。关键词调：酿酒酵母谷肤甘肽：锅盐抗性：紫外诱变
中图分类号：Q554
文献标识码：A
文章编号：0254-5071(2012)04-0040-04
Therelationship between glutathione production and cadmium salt resistance of Saccharomyces cerevisiae and
itsapplication
CHEN Yefu, LI Junxia, SHEN Shichao, LV Hongyan, XIAO Dongguang
(Key Lab of Industrial Fementation Microbiology,Ministry ofEducation, College ofBiotechnology,Tianjin University of
Science and Technology,Tianjin300457,China)
Abstract: The verification test of the relationship between glutathione (GSH) production and cadmium salt resistance of Saccharomyces cerevisiac proved that the high GSH production can result in high cadmium salt resistance of S, cerevisiae. However, the high cadmium salt resistance of S. aasaeosesaeae S, cerevisiae mutants during UV mutation. Two high GSH producing mutants, BV54 and MV-16 were obtained, and their intracellular GSH content were 32.53% and 36.55% higher than those of their original strains B-3 and M8, respectively. The positive mutation rate was 23.5%. The results
showed that screening S. cerevisiae mutants with high GSH production by cadmium salt resistance is feasible and effective Key wordg: Saccharomyces cerevisiae; glutathione; cadmium sait resistance; UV mutation
谷胱甘肽(glutathione，GSH)是一种由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸通过肽键缩合而成的生物活性三肽，是一种用途广泛的多肽化合物。GSH在重金属解毒、抗老化和减缓细胞衰老等方面具有重要作用，直接或间接参与蛋白质和 DNA合成、物质运输及细胞保护等重要生理功能-，在食品加工和临床应用等领域发展前景广阔。因此，GSH的工业化生产已经得到广泛关注。
酿酒酵母是GSH最为常见的生产菌株，但是普通酵母 GSH含量不高，一般仅为1%左右，如果直接用于生产，存在酵母用量大、效率低等缺点。因此，如何根据酿酒酵母代谢特点建立合理的诱变筛选体系，进而获得高产GSH的工业化菌株已经成为制约GSH产业化发展的关键。目前，高产 GSH工业化菌株的选育方法多集中在利用物理诱变、化学诱变或复合诱变处理菌体后，经甲硫氨酸、乙硫氨酸和锌离子等抗性筛选，获得GSH生成量提高的酿酒酵母突变株围。
有文献报道，当培养基中含有镉、砷等重金属时，酿酒酵母可以通过硫代谢途径增加GSH的生成量，以解除重金属对菌体的毒害作用闪。本研究验证了酿酒酵母GSH生成量与其镉盐抗性之间的关系，并依此建立了一种新的高产 GSH酿酒酵母突变株的筛选方法，即镉盐抗性筛选，为高
收日期：2011-12-21
产GSH工业化离株的选育开辟了新途径 1材料与方法
1.1菌株与培养基 1.1.1菌株
酿酒醇母（Saccharomycescerevisiae)BY-14；酿酒醇母(S.cerevisiae)B-3，由BY-14经紫外诱变获得的一株高产 GSH的突变株；酿酒酵母(S.cerevisiae)BL1~BL96，由B-3 经粒子注入所得GSH产量较高的宽变菌株：酿酒醇母
(S.cerevisiae)M8，均为本实验室保存菌种。 1.1.2培养基
(1)YEPD培养基（斜面培养及平板纯化用)：葡萄糖 20g/L，蛋白陈20g/L，酵母普10g/L，琼脂20g/L，pH6.0,0.1MPa 灭菌15min。
(2)种子培养基：葡萄糖20g/L，蛋白陈20g/L，酵母膏 10g/L.pH6.0,0.1MPa灭菌15min。
(3)GSH发酵培养基：葡葡糖30g/L，酵母粉7g/L， KH,PO,1g/L,K,HPO,?3H,O2.5g/L,MgSO,0.1g/L,pH值自然，0.1MPa灭菌15min。
1.2培养方法 1.2.1种子培养
基金项目：天津市高等学校科技发展基金计划项目(No.20040802）
作著葡介：陈叶幅(1973-)，男，吉林通化人，教授，研究方向为代谢控制发醇。