JJF
中华人民共和国国家计量技术规范
JJF1828—2020
ATP荧光检测仪校准规范
Calibration Specification for Adenosine Triphosphate （ATP)
Fluorescence Detectors
2020-01-17发布
2020-04-17实施
国家市场监督管理总局发布 JJF1828—2020
ATP荧光检测仪校准规范 Calibration Specification for Adenosine Triphosphate （ATP) Fluorescence Detectors
JJF 1828—2020
归口单位：全国生物计量技术委员会主要起草单位：中国计量科学研究院参加起草单位：河北省计量科学研究院
本规范委托全国生物计量技术委员会负责解释 JJF1828—2020
本规范主要起草人：
傅博强（中国计量科学研究院）唐治玉（中国计量科学研究院）
参加起草人：
宋增良（河北省计量科学研究院）吕亮（中国计量科学研究院） JJF1828—2020
目 录
引言 1 范围 2 引用文件 3
(Ⅱ) (1) (1) (1) (1 ) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (2) (2) (2) (2) (2) (2) (3) (3) (4) (5) (6) (6) (7) (8) (13) (16) (18) (20)
术语和计量单位· 3.1相对光单位
概述· 5 计量特性· 5. 1 背景噪声值： 5. 2 检测限· 5.3 线性范围及相关系数· 5. 4 重复性··· 5.5 相对示值误差.· 6校准条件： 6.1 环境条件. 6.2标准物质、检测拭子或试剂、仪器 7校准项目和校准方法· 7. 1 背景噪声值 7. 2 检测限· 7.3 线性范围及相关系数 7. 4 重复性 7. 5 线性误差· 8 校准结果表达 9 复校时间间隔附录A 系列ATP标准工作溶液的配制附录B ATP物质的量测量的线性误差校准不确定度评定示例附录 C 光亮度测量的线性误差校准不确定度评定示例附录 D ATP法校准原始记录格式（推荐性表格）附录E 可调弱光发生器模拟法校准原始记录格式（推荐性表格）附录F 校准证书（内页）格式（推荐性表格）
4 JJF1828—2020
引言
本规范依据JJF1071一2010《国家计量校准规范编写规则》的要求编写本规范主要参考ASTMD7463-14a《燃料、燃料/水混合物、燃料相关的水中微生
物三磷酸腺苷（ATP）含量标准检测方法》 LStandardTestMethodforAdenosine Triphosphate（ATP)Content of Microorganisms in Fuel,Fuel/Water Mixtures,and FuelAssociatedWater」制定。
本规范为首次发布。
II JJF1828—2020
ATP荧光检测仪校准规范
1范围
本规范适用于手持式和台式ATP荧光检测仪的校准。
2 引用文件
本规范引用了下列文件： ASTMD7463-14a燃料、燃料/水混合物、燃料相关的水中微生物三磷酸腺苷
（ATP）含量标准检测方法［StandardTestMethodforAdenosineTriphosphate（ATP） Content of Microorganisms in Fuel, Fuel/Water Mixtures, and Fuel Associated Water
凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本规范；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修订单）适用于本规范。
3术语和计量单位
3.1相对光单位relativelightunit；RLU［ASTMD7463-14a，3.1.19
三磷酸腺苷（AdenosineTriphosphate，ATP）水解为一磷酸腺苷（Adenosine Monophosphate，AMP）和焦磷酸盐释放化学能驱动荧光素在荧光素酶催化下氧化释放的光量子数的测量单位。
注：非SI单位，但与ATP浓度成比例关系。不同的检测仪对于同样的光量子数可能会产生不同的RLU读数。 4概述
ATP荧光检测仪（以下简称仪器）由检测仓、控制面板、光电探测器（雪崩二极管或光电倍增管检测器等）和数据采集信号处理系统等组成，并配备有配套的含有荧光素和荧光素酶混合物的拭子或试剂。采集样本中的ATP后，与荧光素和荧光素酶混合物反应，会产生550nm左右的生物发光。在适当低的ATP浓度范围内，发光强度与 ATP浓度成一定比例关系。根据相对光单位RLU可以推算出样本被食物残渣和微生物污染的程度，对总体洁净度进行监测。
仪器可分为手持式和台式。
5计量特性
5.1背景噪声值 5.2检测限 5.3线性范围及相关系数 5.4重复性
1 JJF1828—2020
B：一一第i次测定的背景值，RLU； n——测定次数。
7.2检测限
在超净工作台中，用（1～10）uL移液器移取某浓度的ATP标准工作溶液（按照附录A配制）10uL，滴于拭子的擦拭头（手持式）上或检测池（台式）中。浓度选取仪器声称的ATP检出限浓度。某浓度的ATP标准工作溶液与荧光素和荧光素酶混合试剂混合反应，分别记录仪器RLU示值。若此浓度下，仪器RLU示值为O，则浓度增加10倍。共进行3个平行测定实验，取平均值。
对于背景噪声值（ATP法）为O的仪器，由RLU示值大于O的最低浓度的ATP 标准工作溶液对应的ATP物质的量（mol），按式（2）计算，将RLU示值为1时对应的ATP物质的量作为检测限。
1 X n stdi
(2)
nLOD= RLUstdi
式中： n LOD 仪器的检测限对应的ATP物质的量，mol；
1 检测限对应的RLU示值； n stdi RLU示值大于O的最低浓度的ATP标准工作溶液i对应的ATP物质的
量，mol;
RLUstdi— RLU示值大于0的最低浓度的ATP标准工作溶液i的仪器示值平均
值，RLU。
对于式（1）计算的背景噪声值（ATP法）大于10O的仪器，由RLU示值平均值大于背景噪声值的最低浓度的ATP标准工作溶液，其RLU示值平均值与背景噪声值的比值为该浓度ATP标准工作溶液的信噪比R，由其对应的ATP物质的量（mol），按式（3）计算，将信噪比为3时对应的ATP物质的量作为检测限。
3 X n stdi 3 Xn stdi
(3)
nLOD= R stdi RLUstdi /N
式中： n LOD 仪器的检测限对应的ATP物质的量，mol：
3— 检测限对应的信噪比；
RLU示值平均值大于背景噪声值的最低浓度的ATP标准工作溶液i对应的ATP物质的量，mol;
n stdi
Rstdi RLU示值平均值大于背景噪声值的最低浓度的ATP标准工作溶液i对应
的信噪比；
RLUstdi RLU示值平均值大于背景噪声值的最低浓度的ATP标准工作溶液i的仪
器示值平均值，RLU；
N 仪器的背景噪声值，RLU。
7.3线性范围及相关系数 7.3.1ATP法
3