经验交流
中国酿造
酸热法提取酵母油脂条件的研究孔凡敏"，赵祥颖”，田延军2，国天庆”，刘建军1.2*
2010年第5期总第218期
（1.山东农业大学食品科学与工程学院，山东泰安270018;2.山东省食品发酵工程重点实验室，
山东济南250013;3.山东省食品发酵工业研究设计院，山东济南250013)
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摘要：以一株隐球酵母为材料，考查了酸热法中盐酸浓度、盐酸用量、酸热时间、无水乙醇用量、有机溶剂单因素对油脂提取收率的影明，并通过正交试验确定了0.5g干菌体用10mL4mol/L盐酸沸水浴处理8min，加入无水乙醇用量10mL，用乙醚12mL和右油醚12ml 举取时，油脂得率最高；并对提取的油脂进行了气相色谱分析，结果表明：棕相酸为20.78%，硬脂酸为4.57%，油酸为59.9%，亚油酸为 11.36%，亚麻酸为0.23%，其他3.16%
关键词：微生物油脂：隐球酵母：油脂提取
中图分类号：Q93-335
文献标识码：B
文章编号：0254-5071(2010)05014303
Lipid extraction of yeast by acid-heating extraction
KONG Fanmin', ZHAO Xiangying, TIAN Yanjun', GUO Tianqing, LIU Jianjun'2*
(l.College ofFood Science and Engineering,Shandong Agricultural University,Taian 271018, China,
2. Food & Fermentation Engineering Key Lab of Shandong Province, Jinan 250013, China; 3. Research and Design
Institute of Food and Fermentation Industries of Shandong Province, Jinan 250013, China)
oaaooeinaeoeaaaaseaeaeaeoe hydrochloric acid dosage, processing time by hydrochloric acid, alcobol dosage and organic solvent were determined, and the best extraction condi-tions through orthogonal experiment were selected for further study. The results were as follows: aether 10 ml and petroleum ether 10 ml, hydrochlo ric acid concentration 4 mol/L, hydrochloric acid dosage 10 ml, processing time by hydrochloric acid 8 min, alcohol dosage 12 ml., It's content fatty
acid were palmitic acid 20.78 %, stearic acid 4.57 %, oleic acid 59.9 %, linoleic acid 11.36, linolenic acid 0.23 %, others 3.16 % Key words: microbial oils; Cryptococcus, lipid extraction
微生物油脂(microbialoils）又称单细胞油脂(singlecell oil,SCO)，是微生物菌体在一定培养条件下，转化碳水化合物碳氨化合物在细胞内积累的大量油脂。微生物油脂作为一种新型油脂引起人们的广泛关注，微生物油脂的开发与利用不仅丰富了传统的油脂生产技术，而且将会成为工业化生产油脂的有效途径之一。
开展微生物油脂的研究，首先要进行油脂的提取和分析。目前，研究者常采用的油脂提取方法主要有索氏抽提法、有机溶剂浸提法、酸热法、超临界CO,萃取法等叫。索氏抽提法是经典的脂肪提取方法，该方法利用石油醛等长时间回流于菌体，浸提菌体内的油脂类物质，提取的效果较好，但该法样品需求量大，操作时间长，不适合作为菌株快速筛选和条件优化时的提取方法。超临界CO,萃取法需要专用设备，只适合规模化提取。有机溶剂法是用有机溶剂直接浸提细胞，收率较低，并且所用溶剂毒性较大。相比较而言酸热法提取细胞内的油脂，菌体无需干燥，操作时间短，一次可以处理大批样品，比较适合菌株快速筛选和条件优化时进行油脂含量分析。
酸热法是参考胡萝卜素提取的方法而建立的一种方法冈，其原理是：首先用盐酸对菌体细胞壁进行处理，使原来结构紧密的细胞壁变得疏松，再经沸水浴及速冻处理，
收稿日期：2010-01-19
使细胞壁进一步被破坏，然后用有机落剂萃取出细胞中的油脂。
本研究以实验室筛选的一株产油脂的隐球酵母菌为原料，集中考食了酸热法中盐酸浓度、盐酸用量、酸热时间、无水乙醇用量、有机溶剂种类等单因素对油脂提取得率的影响，并通过正交试验确定了最佳提取条件。
1材料与方法 1.1实验菌种
实验室保藏的一株隐球酵母（Cryptococcus)因。 1.2培养基
YEPD培养基：葡萄糖20g/L,酵母粉10g/L，蛋白陈10g/L pH5.8~6.0作为液体种子培养基：斜面培养基是在YEPD培养基的基础上加上琼脂20g。
发酵培养基：葡萄糖120g/L，硝酸钾1g/L,玉米浆2.5g/L MgSO7H,01.5g/L，磷酸氢二钠2g/L，硫酸锰2mg。
以上培养基均在115℃灭菌20min。 1.3试剂
无水乙醚，石油醚(30~60)，正已烷，无水乙醇，盐酸。 1.4方法
1.4.1酵母细胞的培养
将低温保存的隐球酵母接种于YEPD固体斜面上，
作者简介：孔凡敏1983-)，女，山东济宁人，硕士研究生；刘建军*，教授，通讯作者。