ICS13.300;11.100 A:80
GP
中华人民共和国国家标准
GB/T297632013
化学品 稀有鲫急性毒性试验 Chemicals-Rare Minnow (Gobiocypris rarus) acute toxicity test
2014-03-20实施
2013-09-18发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会 发布 GB/T29763—2013
前言
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由全国危险化学品管理标准化技术委员会（SAC/TC251)提出并归口。 本标准起草单位：上海市检测中心、环境保护部化学品登记中心、中国科学院水生生物研究所、中国
检验检疫科学研究院、环境保护部南京环境科学研究所、沈阳化工研究院有限公司安全评价中心。
本标准主要起草人：殷浩文、张京估、赵华清、沈英娃、刘纯新、聂晶磊、王剑伟、陈会明、李晞、石利利、 刘济宁、王蕾、蔡磊明、赵玉艳。 GB/T29763—2013
化学品稀有鲫急性毒性试验
1范围
本标准规定了稀有鲫化学品急性毒性试验的方法，包括静态试验、半静态试验和流水式试验三种方式，受试物所需信息、原理、设备与材料、试验系统、试验程序、质量控制和结果报告。
本标准适用于测试稀有鲫的化学品急性毒性。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T27861化学品鱼类急性毒性试验
3 术语和定义
GB/T27861界定的术语和定义适用于本文件。
4 受试物所需信息
受试物所需信息包括： a) 水中溶解度； b) 蒸气压； c) 结构式； d) 纯度； e) 在水中和光照条件下的稳定性； f) pKa值; g) 水溶液中的定量分析方法； h) 正辛醇-水的分配系数（Pm）； D 快速生物降解试验结果。
5原理
5.1用于测定受试物短期暴露对稀有鲫可能产生的影响，以评价受试物的短期毒性。 5.2将稀有鲫暴露于含不同浓度受试物的水溶液，以96h为试验周期，在24h、48h72h和96h时记录受试鱼的死亡率，确定50%稀有鲫死亡时的受试物浓度，用LCso表示。
6设备与材料
6.1仪器设备
仪器设备包括：
1 GB/T29763—2013
a) 溶解氧测定仪（1%）； b) 水硬度计（1mg/L）； c) 温度控制系统(0.1℃)； d) pH计(0.1pH); e) 分析天平(0.0001g）； D 情性材料制成的水族箱或水，规格一致，体积适宜， g) 适用于流水式的连续分配和稀释系统（如，计量泵、稀释仪等）。
6.2材料与试剂
标准稀释水用到的试剂包括： a）氯化钙； b）硫酸镁； c) 碳酸氢钠； d）氯化钾。 所有试剂应是分析纯，用电导率小于或等于10μS/cm的蒸增水或去离子水配制。
7试验系统 7.1试验方式的选择 7.1.1在试验之前，应根据受试物在水中的化学稳定性确定合适的试验方式，从而选定需用的容器和装置”。 7.1.2 2试验期间，受试物在水溶液中的浓度维持在初始实测浓度的士20%内，可采用静态试验方式当水溶液中受试物不稳定时，即浓度变化超过士20%时，应采用半静态试验方式或流水式试验系统以维持受试物的浓度。 7.2 2稀有绚鲫 7.2.1选择
试验鱼种为稀有鲫（Gobiocyprisrarus），全长范围为30mm士10mm。应在养鱼场和实验室条件（pH为6.0~8.5温度为21℃~25℃；光照为每天12h~16h，溶解氧浓度不低于空气饱和值的 80%）下驯化和佩养。应保证一次试验用鱼为同一批号，规格一致、来源可靠、健康且无明显的畸形。 7.2.2暂养和剔养 7.2.2.1 稀有鲫用于试验之前，应在实验室至少暂养12d。暂养条件可与别养条件一致。 7.2.2.2 临试验前，应在符合下列条件的环境中至少驯养7d。
a) 水：与试验用水水质相同； b) 光照：每天12h~16h； c) 温度：21℃~25℃； d) 溶解氧浓度：不低于空气饱和值的80%； e) 喂养，每周3次或每天投食，至试验开始前24h为止。 1) 根据样品理化特性，选择材料合适的试验容器。如，玻璃等。 2) 根据试验方式和负荷量进行选择， 2 GB/T29763—2013
7.2.2.3驯养开始48h后，记录死亡率，并按下列条件处理：
a）7d内死亡率小于5%，可用于试验。 b）7d内死亡率在5%～10%之间，继续驯养7d，如果死亡不再发生，该批试验鱼可用于试验 c）7d内死亡率大于10%，舍弃整组鱼。
7.3试验用水
应用标准稀释水（参见附录A）、曝气除氯的自来水或高质量的天然水。水的总硬度为10mg/L~ 250mg/L（以CaCO，计），pH为6.0~8.5. 7.4受试物的制备 7.4.1将受试物溶解于试验用水中配制成受试物贮备液，通过稀释贮备液配制成一定浓度的试验溶液。 7.4.2难溶物质的贮备液可以通过超声分散或其他适合的物理方法配制，必要时可以使用对鱼毒性低的有机溶剂、乳化剂和分散剂。使用这些物质时应加设溶剂对照试验组，且所有试验容器中的溶剂浓度应相同，并不应超过100mg/L或100μL/L。 7.4.3应在加人前调节受试物贮备液的pH，使其接近试验用水的pH。调节贮备液的pH时不应使受试物浓度明显改变，不应发生化学反应或沉淀，宜使用HCI和NaOH来调节。 7.4.4如果加入受试物后水的pH有明显变化（超出6.08.5），则重新配制试验溶液。
8试验程序
8.1暴露条件
a）持续时间：96h
b)股 承载量：静态和半静态试验系统每升水中鱼的总湿重不超过1.0g，流水式试验系统承载量可
适当提高。 c) 光照：每天12h~16h。 d) 温度：21℃～25℃且试验期间温度变化不超过2℃。 e) 溶解氧浓度：不应低于空气饱和值的60%。曝气时不应使受试物浓度明显变化。
喂食禁食。
g）千扰：避免可能影响鱼行为的干扰。 8.2预试验 8.2.1用以确定正式试验所需浓度范围，可选择较大范围的浓度系列，如1000mg/L、100mg/L、 10mg/L、1mg/L，0.1mg/L。每个浓度组放入的稀有不少于3尾，不设平行组。试验时间为96h。 每日记录各容器内的死鱼数，并及时取出死鱼。 8.2.2如果一次预试验结果无法确定正式试验所需的浓度范围，应调整浓度范国再次进行预试验。 8.3正式试验 8.3.1根据预试验，在包括使稀有鲫全部死亡的最低浓度和96h稀有鲫全部存活的最高浓度之间至少应设置5个浓度组，并以几何级数”排布。浓度间隔系数应小于或等于2.2。同时设一个空白对照组。如使用了溶剂，应增设溶剂对照组，且所有试验容器中的溶剂浓度应相同。每一浓度组和对照组应至少使用7尾稀有鲫。
3）即等比数列，
3 GB/T29763—2013 8.3.2试验溶液调节至试验温度后，从驯养鱼群中随机取出鱼并随机迅速放入各试验容器中。转移期间处理不当的鱼均应弃除。同一试验，所有试验用鱼应在30min内分组完毕， 8.3.3试验期间，不应对试验液强烈曝气，溶解氧含量应高于空气饱和值的60%。试验期间禁止喂食。 8.3.4至少在24h、48h、72h和.96h后检查受试鱼的状况。如果某尾鱼没有任何肉眼可见的运动（如，鳃的扇动），且碰触尾柄后无反应，即可判断该鱼已死亡。观察并记录死鱼数目后，将死鱼从容器中取出。应在试验开始后3h或6h观察各试验组鱼的状况，并记录试验鱼的异常现象（如，鱼体侧翻、失去平衡，游泳能力和呼吸功能减弱，色素沉积等）。 8.3.5每天至少测定一次所有试验容器中的pH、溶解氧浓度和温度。试验开始和结束时也要测定。 8.3.6在试验开始前，应建立有效的受试物在水中的化学分析方法。试验期间，应按以下要求测定受试物在水中的浓度。
a）：静态试验方式应至少在试验开始和结束时，测定试验容器中试验溶液的受试物浓度。 b）半静态试验方式应至少在试验开始、每一次更新前后和试验结束时，测定试验容器中试验溶
液的受试物浓度. 流水式试验方式应至少在试验开始、试验中期和试验结束时，测定母液和试验容器中试验落液的受试物浓度。
)
8.4限度试验
采用本标准时，为证明LCse是否大于100mg/L（有效成分浓度）或大于试验体系下受试物饱和溶液浓度，可进行受试物浓度为100mg/L（有效成分浓度）或试验体系下受试物饱和溶液的限度试验。限度试验应至少使用7尾稀有的，与对照组使用的鱼数目相等。如使用了溶剂，应增设溶剂对照组，且所有试验容器中的溶剂浓度应相同。如果试验鱼发生死亡，则应按本标准的试验程序进行完整的试验。 应记录所观察到的亚致死效应（如，鱼体侧翻、失去平衡，游泳能力和呼吸功能减弱，色素沉积等）。
9质量控制
有效的试验应满足下列条件： a）试验结束时，对照组鱼死亡率不应超过10%，如果每组鱼不到10尾，则对照组死亡不应超过
1尾； b）试验期间，试验液的溶解氧浓度应不低于空气饱和值的60%；
试验期间，尽可能维持恒定条件，如有必要，应使用半静态或流水式试验方式；
c)
d) 试验期间，试验溶液中受试物浓度不应低于配制浓度的80%。如低于配制浓度的80%，应以
实测浓度来表示试验结果。
10数据与报告 10.1结果处理 10.1.1采用合适的统计方法，计算出一定暴露时间的LCs值及95%的置信限。同时绘制试验浓度对死亡率的曲线。 10.1.2如果试验数据不适于用标准方法计算LCso，可用不引起死亡的最高浓度和引起100%死亡的最低浓度估算LCs，即这两个浓度的几何平均值。 10.1.3当进行限度试验时，应报告限度试验使用的浓度，并说明LCs大于限度试验所采取的浓度， 4 GB/T29763—2013
10.1.4试验期间，如受试物实测浓度维持在配制浓度的士20%，可用配制浓度表示结果。如受试物实测浓度无法维持在配制浓度的士20%或受试物LCso值在危害评估分级边界值附近（如，1mg/L、 10mg/L，100mg/L），应用实测浓度表示结果。 10.2试验报告
试验报告应至少包括下述内容： a）受试物
物理性质及相关理化特性、基础信息（见第4章）等。 b) 稀有鲍钾
规格、来源、健康状况、驯养情况等。 c) 试验条件
试验过程：静态、半静态或流水式、曝气、承载量等；水质特征：溶解氧、pH值、温度、硬度等；每24h试验溶液中的溶解氧浓度、pH值、温度（半静态试验中应在更新前和更新后分别测定溶解氧浓度、pH值、温度）；制备贮备液和试验溶液的方法；
.
·试验溶液中受试物的浓度信息； ·每一试验浓度用鱼的数目。
d）试验结果
试验期间，无死亡发生的最高浓度；试验期间，导致100%死亡的最低浓度；每个观察时间各个浓度的累计死亡率；如有可能，每个观察时间的LCs，及其95%的置信限。 试验结束后的浓度-死亡率曲线图；确定LCs值的统计学方法；对照组的死亡率；试验期间，可能会影响试验结果的因素；鱼中毒的异常反应，
.
.
.
结果讨论
e)
4）HJ/T154-2004新化学物质危害评估导则。 GB/T29763—2013
附录A （资料性附录）标准稀释水的配制
A.1标准稀释水贴备液的配制
a) 氧化钙溶液：将11.76gCaCl·2H，O溶解于水中，稀释至1L。 b) 硫酸镁溶液：将4.93gMgSO+7H，O溶解于水中，稀释至1L。 c) 碳酸氢钠溶液：将2.59gNaHCO，溶解于水中，稀释至1L。 d) 氯化钾溶液：将0.23gKCI溶解于水中，稀释至1L。
A.2 标准稀释水的配制
将以上四种溶液各25mL加以混合并用水稀释至1L。溶液中钙离子和镁离子的总和是 2.5mmol/L，钙离子和镁离子的浓度比例为4：1，钠离子和钾离子摩尔浓度比例为10：1。溶液中的酸容量常数Ks,为0.8mmol/L。
稀释用水应经曝气直到氧饱和为止，然后储存2d备用，在使用前可不再曝气。
6 ICS13.300;11.100 A:80
GP
中华人民共和国国家标准
GB/T297632013
化学品 稀有鲫急性毒性试验 Chemicals-Rare Minnow (Gobiocypris rarus) acute toxicity test
2014-03-20实施
2013-09-18发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会 发布 GB/T29763—2013
前言
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由全国危险化学品管理标准化技术委员会（SAC/TC251)提出并归口。 本标准起草单位：上海市检测中心、环境保护部化学品登记中心、中国科学院水生生物研究所、中国
检验检疫科学研究院、环境保护部南京环境科学研究所、沈阳化工研究院有限公司安全评价中心。
本标准主要起草人：殷浩文、张京估、赵华清、沈英娃、刘纯新、聂晶磊、王剑伟、陈会明、李晞、石利利、 刘济宁、王蕾、蔡磊明、赵玉艳。 GB/T29763—2013
化学品稀有鲫急性毒性试验
1范围
本标准规定了稀有鲫化学品急性毒性试验的方法，包括静态试验、半静态试验和流水式试验三种方式，受试物所需信息、原理、设备与材料、试验系统、试验程序、质量控制和结果报告。
本标准适用于测试稀有鲫的化学品急性毒性。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T27861化学品鱼类急性毒性试验
3 术语和定义
GB/T27861界定的术语和定义适用于本文件。
4 受试物所需信息
受试物所需信息包括： a) 水中溶解度； b) 蒸气压； c) 结构式； d) 纯度； e) 在水中和光照条件下的稳定性； f) pKa值; g) 水溶液中的定量分析方法； h) 正辛醇-水的分配系数（Pm）； D 快速生物降解试验结果。
5原理
5.1用于测定受试物短期暴露对稀有鲫可能产生的影响，以评价受试物的短期毒性。 5.2将稀有鲫暴露于含不同浓度受试物的水溶液，以96h为试验周期，在24h、48h72h和96h时记录受试鱼的死亡率，确定50%稀有鲫死亡时的受试物浓度，用LCso表示。
6设备与材料
6.1仪器设备
仪器设备包括：
1 GB/T29763—2013
a) 溶解氧测定仪（1%）； b) 水硬度计（1mg/L）； c) 温度控制系统(0.1℃)； d) pH计(0.1pH); e) 分析天平(0.0001g）； D 情性材料制成的水族箱或水，规格一致，体积适宜， g) 适用于流水式的连续分配和稀释系统（如，计量泵、稀释仪等）。
6.2材料与试剂
标准稀释水用到的试剂包括： a）氯化钙； b）硫酸镁； c) 碳酸氢钠； d）氯化钾。 所有试剂应是分析纯，用电导率小于或等于10μS/cm的蒸增水或去离子水配制。
7试验系统 7.1试验方式的选择 7.1.1在试验之前，应根据受试物在水中的化学稳定性确定合适的试验方式，从而选定需用的容器和装置”。 7.1.2 2试验期间，受试物在水溶液中的浓度维持在初始实测浓度的士20%内，可采用静态试验方式当水溶液中受试物不稳定时，即浓度变化超过士20%时，应采用半静态试验方式或流水式试验系统以维持受试物的浓度。 7.2 2稀有绚鲫 7.2.1选择
试验鱼种为稀有鲫（Gobiocyprisrarus），全长范围为30mm士10mm。应在养鱼场和实验室条件（pH为6.0~8.5温度为21℃~25℃；光照为每天12h~16h，溶解氧浓度不低于空气饱和值的 80%）下驯化和佩养。应保证一次试验用鱼为同一批号，规格一致、来源可靠、健康且无明显的畸形。 7.2.2暂养和剔养 7.2.2.1 稀有鲫用于试验之前，应在实验室至少暂养12d。暂养条件可与别养条件一致。 7.2.2.2 临试验前，应在符合下列条件的环境中至少驯养7d。
a) 水：与试验用水水质相同； b) 光照：每天12h~16h； c) 温度：21℃~25℃； d) 溶解氧浓度：不低于空气饱和值的80%； e) 喂养，每周3次或每天投食，至试验开始前24h为止。 1) 根据样品理化特性，选择材料合适的试验容器。如，玻璃等。 2) 根据试验方式和负荷量进行选择， 2 GB/T29763—2013
7.2.2.3驯养开始48h后，记录死亡率，并按下列条件处理：
a）7d内死亡率小于5%，可用于试验。 b）7d内死亡率在5%～10%之间，继续驯养7d，如果死亡不再发生，该批试验鱼可用于试验 c）7d内死亡率大于10%，舍弃整组鱼。
7.3试验用水
应用标准稀释水（参见附录A）、曝气除氯的自来水或高质量的天然水。水的总硬度为10mg/L~ 250mg/L（以CaCO，计），pH为6.0~8.5. 7.4受试物的制备 7.4.1将受试物溶解于试验用水中配制成受试物贮备液，通过稀释贮备液配制成一定浓度的试验溶液。 7.4.2难溶物质的贮备液可以通过超声分散或其他适合的物理方法配制，必要时可以使用对鱼毒性低的有机溶剂、乳化剂和分散剂。使用这些物质时应加设溶剂对照试验组，且所有试验容器中的溶剂浓度应相同，并不应超过100mg/L或100μL/L。 7.4.3应在加人前调节受试物贮备液的pH，使其接近试验用水的pH。调节贮备液的pH时不应使受试物浓度明显改变，不应发生化学反应或沉淀，宜使用HCI和NaOH来调节。 7.4.4如果加入受试物后水的pH有明显变化（超出6.08.5），则重新配制试验溶液。
8试验程序
8.1暴露条件
a）持续时间：96h
b)股 承载量：静态和半静态试验系统每升水中鱼的总湿重不超过1.0g，流水式试验系统承载量可
适当提高。 c) 光照：每天12h~16h。 d) 温度：21℃～25℃且试验期间温度变化不超过2℃。 e) 溶解氧浓度：不应低于空气饱和值的60%。曝气时不应使受试物浓度明显变化。
喂食禁食。
g）千扰：避免可能影响鱼行为的干扰。 8.2预试验 8.2.1用以确定正式试验所需浓度范围，可选择较大范围的浓度系列，如1000mg/L、100mg/L、 10mg/L、1mg/L，0.1mg/L。每个浓度组放入的稀有不少于3尾，不设平行组。试验时间为96h。 每日记录各容器内的死鱼数，并及时取出死鱼。 8.2.2如果一次预试验结果无法确定正式试验所需的浓度范围，应调整浓度范国再次进行预试验。 8.3正式试验 8.3.1根据预试验，在包括使稀有鲫全部死亡的最低浓度和96h稀有鲫全部存活的最高浓度之间至少应设置5个浓度组，并以几何级数”排布。浓度间隔系数应小于或等于2.2。同时设一个空白对照组。如使用了溶剂，应增设溶剂对照组，且所有试验容器中的溶剂浓度应相同。每一浓度组和对照组应至少使用7尾稀有鲫。
3）即等比数列，
3 GB/T29763—2013 8.3.2试验溶液调节至试验温度后，从驯养鱼群中随机取出鱼并随机迅速放入各试验容器中。转移期间处理不当的鱼均应弃除。同一试验，所有试验用鱼应在30min内分组完毕， 8.3.3试验期间，不应对试验液强烈曝气，溶解氧含量应高于空气饱和值的60%。试验期间禁止喂食。 8.3.4至少在24h、48h、72h和.96h后检查受试鱼的状况。如果某尾鱼没有任何肉眼可见的运动（如，鳃的扇动），且碰触尾柄后无反应，即可判断该鱼已死亡。观察并记录死鱼数目后，将死鱼从容器中取出。应在试验开始后3h或6h观察各试验组鱼的状况，并记录试验鱼的异常现象（如，鱼体侧翻、失去平衡，游泳能力和呼吸功能减弱，色素沉积等）。 8.3.5每天至少测定一次所有试验容器中的pH、溶解氧浓度和温度。试验开始和结束时也要测定。 8.3.6在试验开始前，应建立有效的受试物在水中的化学分析方法。试验期间，应按以下要求测定受试物在水中的浓度。
a）：静态试验方式应至少在试验开始和结束时，测定试验容器中试验溶液的受试物浓度。 b）半静态试验方式应至少在试验开始、每一次更新前后和试验结束时，测定试验容器中试验溶
液的受试物浓度. 流水式试验方式应至少在试验开始、试验中期和试验结束时，测定母液和试验容器中试验落液的受试物浓度。
)
8.4限度试验
采用本标准时，为证明LCse是否大于100mg/L（有效成分浓度）或大于试验体系下受试物饱和溶液浓度，可进行受试物浓度为100mg/L（有效成分浓度）或试验体系下受试物饱和溶液的限度试验。限度试验应至少使用7尾稀有的，与对照组使用的鱼数目相等。如使用了溶剂，应增设溶剂对照组，且所有试验容器中的溶剂浓度应相同。如果试验鱼发生死亡，则应按本标准的试验程序进行完整的试验。 应记录所观察到的亚致死效应（如，鱼体侧翻、失去平衡，游泳能力和呼吸功能减弱，色素沉积等）。
9质量控制
有效的试验应满足下列条件： a）试验结束时，对照组鱼死亡率不应超过10%，如果每组鱼不到10尾，则对照组死亡不应超过
1尾； b）试验期间，试验液的溶解氧浓度应不低于空气饱和值的60%；
试验期间，尽可能维持恒定条件，如有必要，应使用半静态或流水式试验方式；
c)
d) 试验期间，试验溶液中受试物浓度不应低于配制浓度的80%。如低于配制浓度的80%，应以
实测浓度来表示试验结果。
10数据与报告 10.1结果处理 10.1.1采用合适的统计方法，计算出一定暴露时间的LCs值及95%的置信限。同时绘制试验浓度对死亡率的曲线。 10.1.2如果试验数据不适于用标准方法计算LCso，可用不引起死亡的最高浓度和引起100%死亡的最低浓度估算LCs，即这两个浓度的几何平均值。 10.1.3当进行限度试验时，应报告限度试验使用的浓度，并说明LCs大于限度试验所采取的浓度， 4 GB/T29763—2013
10.1.4试验期间，如受试物实测浓度维持在配制浓度的士20%，可用配制浓度表示结果。如受试物实测浓度无法维持在配制浓度的士20%或受试物LCso值在危害评估分级边界值附近（如，1mg/L、 10mg/L，100mg/L），应用实测浓度表示结果。 10.2试验报告
试验报告应至少包括下述内容： a）受试物
物理性质及相关理化特性、基础信息（见第4章）等。 b) 稀有鲍钾
规格、来源、健康状况、驯养情况等。 c) 试验条件
试验过程：静态、半静态或流水式、曝气、承载量等；水质特征：溶解氧、pH值、温度、硬度等；每24h试验溶液中的溶解氧浓度、pH值、温度（半静态试验中应在更新前和更新后分别测定溶解氧浓度、pH值、温度）；制备贮备液和试验溶液的方法；
.
·试验溶液中受试物的浓度信息； ·每一试验浓度用鱼的数目。
d）试验结果
试验期间，无死亡发生的最高浓度；试验期间，导致100%死亡的最低浓度；每个观察时间各个浓度的累计死亡率；如有可能，每个观察时间的LCs，及其95%的置信限。 试验结束后的浓度-死亡率曲线图；确定LCs值的统计学方法；对照组的死亡率；试验期间，可能会影响试验结果的因素；鱼中毒的异常反应，
.
.
.
结果讨论
e)
4）HJ/T154-2004新化学物质危害评估导则。 GB/T29763—2013
附录A （资料性附录）标准稀释水的配制
A.1标准稀释水贴备液的配制
a) 氧化钙溶液：将11.76gCaCl·2H，O溶解于水中，稀释至1L。 b) 硫酸镁溶液：将4.93gMgSO+7H，O溶解于水中，稀释至1L。 c) 碳酸氢钠溶液：将2.59gNaHCO，溶解于水中，稀释至1L。 d) 氯化钾溶液：将0.23gKCI溶解于水中，稀释至1L。
A.2 标准稀释水的配制
将以上四种溶液各25mL加以混合并用水稀释至1L。溶液中钙离子和镁离子的总和是 2.5mmol/L，钙离子和镁离子的浓度比例为4：1，钠离子和钾离子摩尔浓度比例为10：1。溶液中的酸容量常数Ks,为0.8mmol/L。
稀释用水应经曝气直到氧饱和为止，然后储存2d备用，在使用前可不再曝气。
6