ICS 13.300 CCS A 80
GP
中华人民共和国国家标准
GB/T41692—2022
化学品 稀有鲫幼体生长试验 Chemicals-Rare minnow(Gobiocypris rarus) juvenile growth test
2022-10-12发布
2022-10-12实施
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会 发布 GB/T 41692—2022
前言
本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任本文件由全国危险化学品管理标准化技术委员会（SAC/TC251)提出并归口。 本文件起草单位：上海市检测中心、生态环境部固体废物与化学品管理技术中心、中国科学院水生
生物研究所、中国检验检疫科学研究院、厦门市格灵生物技术有限公司、生态环境部南京环境科学研究所、沈阳化工研究院有限公司、浙江省农业科学院农产品质量标准研究所、广东全庆检测有限公司，
本文件主要起草人：陈晓倩、杨婧、藏文超、高映新、殷浩文、刘纯新、桑宇、王剑伟、陈会明、周丽丽、 石利利、蔡磊明、吴声敢、张京佶、张琨、陈智勇、彭宜俊。
- GB/T41692—2022
化学品稀有鲫幼体生长试验
1范围
本文件规定了化学品稀有鲍鲫幼体生长试验的受试物所需信息、方法原理、仪器设备、试验系统、试验程序、质量控制、数据与报告。
本文件适用于评价化学品对稀有鲫幼体生长的影响。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T21806 化学品鱼类幼体生长试验
3术语和定义
GB/T21806界定的术语和定义适用于本文件。
受试物所需信息
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受试物所需信息包括： a 水中溶解度； b）蒸气压； c) 结构式； d）纯度； e) 在水中和光照条件下的稳定性； f) 水解离常数（pKa)； g） 水溶液中的定量分析方法； h) 正辛醇-水的分配系数（P。w）； i) 急性毒性试验结果； j) 快速生物降解试验结果。
5 方法原理
将处于指数生长阶段的稀有鲫幼体作为试验鱼称重后放人试验容器中，并在受试物的亚致死浓度范围内暴露于流水式试验条件或半静态试验条件。试验周期为28d。每天投饵，投饵量根据试验鱼的初始质量计算，14d后允许重新计算投饵量。试验结束时，试验鱼再次称重，通过回归模型来估计引起百分之r（z%）生长率变化的浓度EC，例如EC1。、EC2a或EC3o，分析对其生长率的影响。另外，也可通过与对照组的比较确定最低可观察效应浓度（LOEC)和无可观察效应浓度（NOEC)。
1 GB/T41692—2022
6仪器设备
仪器设备包括： a) 溶解氧测定仪（1%）；
水硬度计(1mg/L）)； c) 温度控制系统(0.1℃)； d) pH计(0.1pH); e) 分析天平（0.0001g)； f) 情性材料"制成的试验容器，规格 一，其容积宜插用于承载量和饲养密度，且应符合附录A
b)
的规定； g） 适用于流水式的连续分配和稀释系统（如计量泵、稀释仪等）
7试验系统
7.1试验方式的选择
在试验之前应根据受试物在求更的诺解度重毛学定生确定全适的试验方式（流水式试验系统或半静态试验系统），然后选定需用的容盟和装置 7.2稀有鲫 7.2.1 选择
试验鱼种为稀有鲫 Gobo israu鱼龄范围为 0.100g。 应在养鱼场和实验室茶进值为6.5~8.5：温度乐溶解氧浓度不低于空气饱和值的至手班托司养语验药鱼应从单 化群中随机挑选。 7.2.2 暂养和驯养 7.2.2.1 稀有鲍鲫幼鱼用于试验之前，应在与试验相同的条件下至少驯养 Trd。 暂养条件可与驯养条件一致。 暂养、驯养和试验期间，最小投饵量每天不应低于体重的2%宜为体重的4%。 7.2.2.2 驯养开始48h后，记录死亡率，并按下列条件处理：
用整，体重范围为0.050g~
光照为每天12h~16h；
a) 7d内死亡率小于5%，可用于试验 b) 7d内死亡率在5%~10%之间，继续驯养7d，如果死亡率大于5%，舍弃整组试验鱼； c) 7d内死亡率大于10%，舍弃整组试验鱼
7.2.2.3 试验开始前的两周内或试验期间不应对鱼进行任何疾病处理。 7.3 试验用水
任何宜于稀有鲫长期存活和生长的水均可作为试验用水（例如活性炭除氯水等），且试验期间水
质应维持恒定。试验用水的pH值为6.5～8.5，在试验期间变化幅度应保持在士0.5的范围之内。硬度（以CaCO，计）范围宜为140mg/L～250mg/L。为避免试验用水对试验结果造成不良影响，应定期取样进行分析。分析测定重金属（例如Cu、Pb、Zn、Hg、Cd、Ni等）、主要的阴、阳离子（例如Ca2+、Mg2+、
1）根据受试物理化特性，选择合适材质，如玻璃等。 2）根据试验方式和承载量进行选择。 2 GB/T41692—2022
8.2试验准备
8.2.1试验前对试验鱼称量，减少各试验鱼之间体重的差异。试验用稀有鲍鲫幼鱼的大小范围应符合附录A的规定。在试验开始时，所有试验鱼的个体质量应在平均体重的士10%内，任何情况下都不应超过25%。试验前可称取部分试验鱼估计平均体重。 8.2.2试验开始前24h停止喂食，随机挑选试验鱼。使用常规麻醉剂[例如100mg/L三卡因间氨苯酸乙脂甲磺酸盐（MS222)水溶液，即由碳酸氢钠与MS222（质量比为2：1)中和而成］麻醉，逐尾称湿重（吸干水分)并符合附录A中规定的精度要求。保留体重在预期范围内的幼鱼，在各试验容器间随机分配。记录每个试验容器中鱼的总湿重。对幼鱼的处理应尽量小心以避免对试验动物产生胁迫与损伤。 8.2.3试验28d后对试验鱼再次称重。如需重新计算饵料投喂量，在试验14d进行称重。 8.3暴露条件
8.3.1持续时间：应大于或等于28d，且不超过受试鱼指数生长期。 8.3.2承载量和饲养密度：应符合附录A的规定。任何情况，承载量在没有账气条件下溶解氧浓度不小于60%的空气饱和值一流水条件下试验期间水质更新顺率宜为61/（g·d）更新条件下，水质更新频率根据化学品在试验用水的稳定性顶定 8.3.3喂食：投喂合适的供科狂至用录的规定 通需证去食正在为试验鱼初始总体体重的 4%。如在14 4再次称重，购重新意限食是可将天的喂食量巧芬为面份投喂，其间隔至少5h。 称重前24h内不投喂。每吸管清除试 器底部 汉料残酒和排泄物 8.3.4 光照周期与水温益付合附录A的规 8.4试验浓度 8.4.1 通常设置5个受试物浓度妞试验浓度低于5个应说邮现再设置的最高浓度不应超过受试物在水中的溶解度 8.4.2参考OECDNo.露选择春活的济剂进荐雅落受武物处理 如赔备液使用了溶剂，其最终浓度应不超过0.1ml/L或100mg/L。所有试验容器中（除空白对照组)的溶剂浓度都相同，并尽量避免使用溶剂。 8.4.3空白对照组的数量依据试验设计而定。如使用了溶剂，溶剂对照组的数量应与试验用水对照组相同。 8.5试验操作 8.5.13 分析测定 8.5.1.1试验期间，定期测定受试物浓度 8.5.1.2流水式试验系统，每天检测试验用水与受试物贮备液的流速，试验期间的流速变动不应超过 10%。如受试物浓度维持在配制浓度的士20%内，测定最高和最低浓度组的浓度。如受试物浓度超出配制浓度的士20%，至少在试验开始时及其后每周1次，测定所有浓度组的浓度， 8.5.1.3半静态试验系统，如受试物浓度维持在配制浓度的士20%内，测定最高和最低浓度组新鲜配制的试验溶液和被更换的试验溶液。如受试物浓度超出配制浓度的士20%，至少在试验开始时及其后每周1次，测定所有浓度组的浓度。 8.5.1.4通常宜以实测浓度表示试验结果。如试验期间受试物浓度维持在配制浓度或初始实测浓度的土20%内，结果可用配制浓度或初始实测浓度表示。
4 GB/T41692—2022
10.2统计分析 10.2.1 结果的回归分析（浓度-反应模型） 10.2.1.1符合特定生长率与浓度之间的数学关系，用于估算EC。可根据每个容器的鱼平均特定生长率(r)进行分析。 10.2.1.2绘制每个容器的鱼平均特定生长率(r，)与浓度的关系图。 10.2.1.3选择恰当的模型，并有适当的理论支持。 10.2.1.4如每个试验容器中存活的鱼数不相等，建立模型时应称重。 10.2.1.5模型建立的方法应能估算出效应值[例如EC2及其离差（置信限)]。拟合模型图应能显示与数据的关系。 10.2.2LOEC的估计结果分析 10.2.2.1如试验中每个浓度组都有平行，LOEC可根据容器平均特定生长率的方差分析（ANOVA)估计，采用合适的方法（例如Dunnett's或Williams'检验），将每个浓度组的r平均值与对照组的r，平均值比较，确定差异存在统计学意义（p<0.05）的最低浓度。如假设分析的参数法无法满足非正态分布（例如Shapiro-Wilk检验)或非齐性方差（Bartlett's检验），则应考虑在方差分析前将数据转换为齐性方差，或进行加权方差分析。 10.2.2.2如试验中每个浓度没有平行，LOEC可根据由单尾鱼得出的“假定”的特定生长率r2来进行方差分析估计。将每个试验浓度组的r2平均值与对照组的r2平均值进行比较，确定差异存在统计学意义（p<0.05)的最低浓度。 10.3试验报告
试验报告应至少包括试验名称、试验目的、试验原理、试验的起止日期及下述内容。 a) 受试物：
物理性质及相关理化特性、基础信息（见第4章等。 b) 稀有鲍鲫：
规格、来源、健康状况、驯养情况等。 c) 试验条件：
1）试验过程：半静态或流水式、承载量、饲养密度等； 2） 试验设计：试验容器数、试验浓度和平行数、每个容器中的鱼数； 3） 贮备液的配制方法和更新频率（如果使用溶剂，给出其化学名和浓度）； 4） 试验配制浓度、实测浓度及标准差、受试物水溶液中的分析方法； 5） 试验用水特征：pH值、硬度、碱度、温度、溶解氧、残留氯水平（如果测定）、总有机碳、总颗
粒物、盐度（如果需要）及其他测定数据； 6） 试验容器中的水质：pH值、硬度、温度和溶解氧； 7）喂食的详细信息：饵料种类、来源、喂食量和喂食频率。
d）试验结果：
1）对照组总存活率以及所有试验浓度组中的死亡率数据； 2） 所用的统计分析方法，基于平行或鱼进行统计，数据处理与所用方法的理由； 3） 列表数据包括：在0d、14d（如果测定)以及28d时的个体体重或平均鱼重，在0d～28d
期间、0d～14d和14d～28d期间的容器平均鱼重或假定的特定生长率（如合适）； 4） 统计分析结果，以表格和图形表示，包括LOEC（p<0.05）、NOEC和/或EC及其95%置
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