JJF
中华人民共和国国家计量技术规范
JJF1666—2017
全自动微生物定量分析仪校准规范
Calibration Specification for Automatic Quantitative
Analyzers of Microorganism
2017-11-20发布
2018-02-20实施
国家质量监督检验检疫总局发布 JJF1666—2017
全自动微生物定量分析仪
校准规范
JJF 1666—2017
Calibration Specification for Automatic Quantitative Analyzers of Microorganism
归口单位：全国生物计量技术委员会主要起草单位：中国计量科学研究院参加起草单位：广东省计量科学研究院
福建省计量科学研究院
北京市计量检测科学研究院
本规范委托全国生物计量技术委员会负责解释 JJF1666—2017
本规范主要起草人：
隋志伟 （中国计量科学研究院）张玲（中国计量科学研究院）
参加起草人：
陈玲（广东省计量科学研究院）傅博强（中国计量科学研究院）王晶（中国计量科学研究院）罗峰 (福建省计量科学研究院) 王晓阳（北京市计量检测科学研究院） JJF1666—2017
目 录
引言 1 范围· 2 引用文件.. 3术语·· 3.1泊松分布 3.2最大可能数法· 4 概述…· 5计量特性· 5.1进样压力稳定性· 5.2 进样压力重复性·. 5.3 激发光波长··· 5.4激发光强度均匀性· 5.5激发光强度稳定性· 6校准条件… 6.1环境条件 6.2校准用设备： 1 校准项目和校准方法 7. 1 一般检查. 7.2 进样压力稳定性和重复性.· 7.3激发光波长和激发光强度.· 8 校准结果表达·
(Ⅱ) (1) (1) (1) (1 ) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (2) (2) (2) (2) (2) (2) (3) (3) (4) (5) (6) (8)
复校时间间隔· 附录A校准证书（内页）参考格式附录B校准原始记录参考格式附录C 激发光波长校准不确定度示例
9
- JJF1666—2017
引言
本规范主要参考了GB4789.3《食品安全国家标准 食品微生物学检验大肠菌群计数》、GB/T5750.12《生活饮用水标准检验方法 微生物指标》，并依据JJF1071 《国家计量校准规范编写规则》制定
本规范为首次发布。
II JJF1666—2017
全自动微生物定量分析仪校准规范
1范围
本规范适用于采用荧光检测和最大可能数法原理的微生物定量分析仪的校准。其他相同原理的微生物定量分析仪，可参照本规范执行。
2引用文件
本规范引用了下列文件： JF1071一2010国家计量校准规范编写规则 GB4789.3食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数 GB/T5750.12生活饮用水标准检验方法微生物指标凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本规范；凡是不注日期的引用文
件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本规范。
3术语
GB4789.3和GB/T5750.12定义的及以下术语和定义适用于本规范。 3.1泊松分布Poissondistribution
泊松分布是一种统计与概率学里常见到的离散机率分布（discreteprobabilitydistri- bution），适合于描述单位时间（或空间）内随机事件发生的次数。 3.2最大可能数法mostprobablenumbermethod，MPN
基于泊松分布的一种间接计数方法，又称稀释培养计数，是微生物检测中计算各种样品微生物数目最常用的方法。 4概述
全自动微生物定量分析仪（以下简称仪器）是采用荧光检测和最大可能数法原理对微生物进行定量分析的仪器。仪器主要由样品准备系统和阅读系统组成。样品准备系统是将样本和特定的培养基加人到卡片内。阅读系统是通过检测荧光，根据阳性孔数目计算结果。 5计量特性
5.1进样压力稳定性 5.2进样压力重复性 5.3激发光波长 5.4激发光强度均匀性 5.5激发光强度稳定性
1 JJF1666—2017
6校准条件
6.1环境条件 6.1.1环境温度：（15～30）℃： 6.1.2环境相对湿度：环境相对湿度不超过75%； 6.1.3电源：电压（220士22）V，频率（50士1）Hz，并具有良好的接地； 6.1.4仪器工作环境应明亮、整洁、无腐蚀性气体、通风良好。 6.2校准用设备 6.2.1真空压力记录仪
测量范围（103～105）Pa，相对扩展不确定度不大于0.9%（k=2）。记录时间间隔不大于0.5s。 6.2.2光纤光谱仪
测量范围（210～800）nm，波长扩展不确定度不大于0.5nm（k=2），光强度测量相对扩展不确定度不大于8%（k=2）。 7校准项目和校准方法
7.1一般检查
各紧固件均应安装牢固，各调节旋钮、按键和开关均能正常工作。测试配件齐全，无影响使用性能的缺陷。 7.2进样压力稳定性和重复性 7.2.1进样压力稳定性
分别将仪器压力设定为40kPa、53kPa。采用真空压力记录仪检测两个压力下进样舱内气压，待压力开始达到设定值后，每0.5s记录一次压力示值，连续测量10次。 按照式（1）计算各压力在相应时间段的稳定性。
Op=Pmax-Pmin
(1)
式中： p压力稳定性，kPa; Pmax—设定压力下真空压力记录仪测定得到的最大压力值，kPa； Pmin设定压力下真空压力记录仪测定得到的最小压力值，kPa。
7.2.2进样压力重复性
选择设定压力值为40kPa进行进样压力重复性测量。运行仪器程序，当升压至 40kPa稳定后，采用真空压力记录仪每0.5s记录一次压力示值，连续记录10个进样仓内气压，取其算术平均值作为该次压力测量值。重复运行仪器程序6次，测得6个进样仓压力，按照式（2）计算40kPa进样压力的相对标准偏差（RSD），作为进样压力重复性。
(P:-P)2 n1
X100%
(2)
RSD:
P
2