现代肿瘤医学2009年4月
第17卷第4期
小白菊内酯对胃癌BGC823细胞凋亡表型的影响赵立杰，李
岩
· 621
TheeffectonapoptoticphaenotypeofgastriccancercellBGC823inducedbyParthenol-ide
ZHAO Li jie, LI Yan
Department of Digestive Diseases,Shengjing Hospital of China Medical University, Shenyang 110004, China.
[Abstract]Objective: To investigate the effect on apoptotic phaenotype of gastric cancer cell BGC823 induced by Parthenolide, Methods: Cytotoxicity was analyzed by MTT. Morphological change of BGC823 was observed by light microscope. Loss of mitochondrial membrane potential( m) stained with rhodamine123 was examined by flow cy-tometry. Caspase 3 activity was assessed by ELISA assay , Expression of Bel 2 protein was detected by Western blot assay. Results: Parthenolide inhibited the proliferation of BGC823 cells in a time and concentration dependent manner, After exposed to parthenolide for 24h, m decreased in a concentration dependent manner. Light micros-copy showed apoptotic morphological changes in BGC823 cells. After 100 μmol/L parthenolide treatment for 6 hours, the activity of caspase - 3 increased, then declined gradually, but Caspase 3 activity remain increased till 48h Westerm blot assay showed that after exposed to parthenolide for various time, the expression pf Bcl 2 protein de-clined gradually. Conclusion : Parthenolide can induce apoptosis of BGC823 cells by decreasing Bcl 2 expression and increasing Caspase 3 activity
[Key words] parthenolide; gastric cancer; apoptosis; Bcl 2;caspase 3
Moderm Oncology 2009,17(04) :0621 0624
【摘要】
目的：探讨小白菊内酯对胃癌BGC823凋亡表型影响。方法：MTT法检测BGC823增殖能力的变化，
同时在例置显微镜下观察细胞形态；采用流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位的变化；ELISA法检测caspase 细胞凋亡形态学改变。经Par处理后，随着Par浓度增加，细胞线粒体膜电位逐渐下降，经100μmol/LPar处理 6h后，细胞caspase-3活性增加，24h后下降，至48h仍保持在高水平，westermblot法检测到细胞Bel-2表
达下调。结论：Par通过下调Bel-2和上调caspase-3活性来诱导细胞凋亡。【关键词】小白菊内酯；胃癌；调亡；Bcl-2;caspase-3
【中图分类号】R730.53;R735.2
【文献标识码】A
小白菊内酯（parthenolide，Par）是从艾叶菊属的短舌匹菊（小白菊）中提取的化学成分),分子式CsHO,，是一种西方传统药物，主要用于治疗皮肤感染、风湿病和偏头痛。近来的研究表明Par属于NF-kB抑制剂[2],可诱导多种肿瘤细胞凋亡[3],作为中药单体成分，它对肿瘤细胞作用的过程很复杂。本实验以胃癌BCC823细胞为研究对象，探讨 Par对其凋亡表型的影响。
材料和方法 1
材料 1.1
【收稿日期】【修回日期】【作者单位】
【作者简介】【通讯作者】
2008 04 21 2008 06 16
中国医科大学附属盛京医院消化内科，辽宁沈阳 110004
赵立杰（1980－），女，黑龙江人，博士生，主要从事中药对胃癌治疗作用的研究。
李岩（1956－），男，辽宁人，教投，博士生导师，主要从事胃癌发病机制及其治疗的研究。
【文章编号】16724992(2009)04062104
人胃癌细胞株购于中国医科大学细胞生物学实验室。 Par购自Alexis公司纯度99%，用DMSO溶解配成100mmol/L 的原溶液，20℃避光保存，实验前以RPMI1640培养液稀释成不同浓度，DMSO终浓度<0.1%，四甲基偶氮唑蓝(MTT)购自上海华舜生物公司，用PBS配成浓度为5mg/L 的溶液。罗丹明123购自Sigma公司，用PBS稀释成1mg/ml 的溶液。Caspase-3活性检测试剂盒购于南京凯基生物公司，Bcl-2，β-actin及抗兔和抗鼠的二抗均为SantaCruz公司产品。
BGC823细胞培养
1.2
人胃癌细胞株BCC823接种于无菌培养瓶中，加人含 10%胎牛血清RPMI1640培养基（青霉素终浓度为100U/ ml，链霉素终浓度为100U/ml），在37℃、5%C0z，饱和湿度培养箱中培养。
1.3
检测Par对BGC823细胞的生长抑制作用
采用MTT法，取处于对数生长期细胞，将细胞密度调整
为5×10*/ml,96孔板每孔加人细胞悬液100μl，培养液