现代肿瘤医学2015年06月第23卷第11期MODERNONCOLOGY,Jun.2015,VOL.23，NO.11
固论著固 ◆基础研究→
一种新型的鼠尾胶滴胃癌细胞三维培养模型的建立与药敏初探辛恺，魏嘉，沈洁”，刘宝瑞
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A novel rat tail collagen gel droplet method for three -dimensional cell culture and che-
mosensifivifyfestingastriccancer Xin Kai', Wei Jia’,Shen Jie?,Liu Baorui'
'Nanjing Drum Toveer Hospital, Clinical College of Nanjing Medical University, Jiangsu Nanjing 210008, China;"The Comprehensite Cancer Centre of Drum Tower Hospital, Medical School of Nanjing University, Clinical Cancer Institute of Nanjing Unieersity, Jiangsu Nanjing210008,China.
[ Abstract] Objective: To establish a novel gastric cancer cell 3D culture model,and further investigate the possi-bility of the chemosensitivity test based on that model. Methods: We choose rat tail collagen to build a cell embed-ded droplet and we confirmed that the BGC823 gastric cell lines were grown in the droplet, in an aggregation growth mode for 8 days. The colonies in the droplet were then stained by neutral red staining solution, An inverted microscope with CCD camera was used to acquire high definition images, We further calculated the integrated optical density(IOD)of stained area in droplet image,and compared the surviving rate of two group treated by CDDP with different concentrations. Results: we successfully established a novel gastric cancer cell 3D culture model, Conclusion: The pssibility of further chemosensitivity test based on that model was confirmed in preliminary
[ Key words] collagen gel droplet;three dimensional cell culture; chemosensitivity test; gastric cancer
Modem Oncology 2015,23(11) :1475 1478
【摘要】目的：建立一种简便的鼠尾胶原包被的胃癌细胞体外三维培养和药敏技术，初步评估该方法的稳定性和可行性。方法：以国产鼠尾胶原溶液为原料，制备包裹有胃瘤细胞株的胶滴，在培养基中培养8天，观察 BGC823细胞株在胶滴中的生长情况。接着对胶滴中的细胞克隆进行染色，捕捉胶滴中的数字图像，利用软件计算图像内染色区域的积分光密度值（integratedopticaldensity，IOD），对胶滴中的细胞活力进行定量；最后初步计算两种不同浓度的题铂组BGC823细胞株的存活率。结果：成功建立一种新型的胃癌细胞鼠尾胶滴三
维培养模型。结论：初步证实了基于此模型进行后续药敏实验的可行性。【关键调】胶滴；细胞三维培养；药敏实验；胃癌
【中图分类号】R730;R735.2【文献标识码】A【文章编号】16724992(2015)11147504
胃癌在所有恶性肿瘤中发病率为第四位，致死率为第二位(1)。胃癌分为早期胃癌和进展期胃癌，无论有无淋巴结转移，早期胃癌的预后明显优于进展期胃癌，总体5年生存率超过90%[2]。由于各种原因，我国早期胃癌的诊断率只有 10%，临床诊断的胃癌大部分为进展期胃癌。对于有可切除病灶的胃癌患者，由于诊断技术和手术技术的改进，通过标
【收稿目期】：
2014 11 27
【修回日期】【基金项目】【作者单位】
【作者简介】【通讯作者】
201501 06
国家自然科学基金项目（N0.81220108023，81401969）南京医科大学鼓楼临床医学院，江苏南京210008“南京大学附属鼓楼医院肿瘤中心，南京大学临床肿瘤研究所，江苏南京210008
辛恺（1988-），男，山东莱阳人，在读硕士生，主要从事肿瘤体外药敏的相关研究。
刘宝瑞（1963-），男，吉林较河人，主任医师，教授，博士生导师，主要从事肿瘤临床个体化和靶向治疗的研究。Email;baoruiliu@ nju. edu. cn
DOI:10.3969/j. isn. 1672 4992.2015. 11. 01
准的胃癌根治性切除术和术后辅助化疗(3]，可以获得相对较好的预后；然而，对于局部晚期、术后复发或者是有远处转移的胃癌患者，预后往往很差}，此时化疗是主要的治疗手段。但由于患者个体间和肿瘤组织内部的异质性[3]，导致不同病人或是同一病人的不同病灶，对化疗药物的敏感性不一致，而药物敏感性实验检测可以提供更多重要的信息。
在药物敏感性实验的指导下个体化选择有效的化疗药物，是提高胃癌全身和区域化疗有效率的关键。药物敏感性实验分为体内药敏实验和体外药敏实验。体内药敏实验主要是基于裸鼠的移植瘤模型[6-8]，此方法的预测准确性好，但耗时长，成本高，且存在一定的伦理学问题。因此，大量研究集中于体外药敏实验。传统的MTT法和CCK8法是基于体外细胞二维培养层面，其预测的准确性备受质疑，后续临床应用潜力有限[9]。另外，克隆形成实验[8-11]、胸腺嘧啶核苷掺入法[12]等方法由于存在各种问题，至今尚未用于临床。
三维培养的细胞一般呈团状或球状生长，其分化和增殖方式更接近于实体瘤[13]。因此，如果能够构建一种稳定的