第30卷，第2期 2010年2月
光谱学与光
谱
青分析
Spectroscopy and Spectral Analysis
Vol.30.No.2,pp476-480 February,2010
荷叶中紫云英替和DNA相互作用的光谱学研究
邓胜国，邓泽元，范亚革，单斌，熊冬梅
南昌大学食品科学与技术国家重点实验室，南吕大学高等研究院，江西南吕
330047
摘要在pH7.4的Tris-HCI的缓冲溶液中，采用紫外及荧光光谱法研究了荷叶中紫云美苷（AST)与 DNA之间的相互作用，探讨了离子强度和朗离子火剂KI对紫云英及紫云英售-DNA体系荧光强度的影响，同时考察了紫云英和中性红与DNA结合的竞争性。结果表明DNA通过静态猝灭作用机制猝灭紫云英售的荧光，并测得其在298及308K时的猝火速率常数（K)分别为3.120×101和2.630×1012L， mol-1·s"，结合常数(K)分别为3.412×10*和1.762×10*L·mol-1，结合位点数(n)分别为1.007和 0.962；DNA的存在使紫云英替的紫外吸收光谱发生减色效应且吸收波长产生红移；发现离子强度的改变对紫云英苷及紫云英昔-DNA体系的炎光强度影响不大；KI对结合形式存在的紫云英苷的荧光猝火效率明显小于白由形式存在的紫云英苷的荧光辞灭效率；紫云英可插人DNA中置换出与DNA结合的中性红。这
些结果说明荷叶中紫云英肯以嵌插模式与DNA进行结合。关键调相互作用；紫云英昔；DNA，荧光光谱；嵌插
中图分类号：TQ464.3，Q523
引言
文献标识码：A
脱氧核糖核酸(DNA)是遗传信息的承担者，具有储存和传递信息的功能，药物分子与DNA的相互作用，会影响到 DNA的牛理功能和物理化学性质，改变DNA的转录和复制"，因此研究药物小分子与DNA的作用机理，有助于人们对药物与DNA相互作用方式及药代动力学的认识，同时也为以DNA为靶标的药物分子设计提供有价值的信息23)。荷叶主要的活性成分是黄副类化合物，具有解暑清热、生发清阳、散瘀止血等功效，已成为研究、利用的热点46)。有关黄酮类化合物与DNA的作用已有研究"，但是目前国内尚无研究紫云英苷（从荷叶中分离纯化得到的一种黄副苷类化合物)与DNA相互作用的文献报道。本实验采用紫外及荧光光谱法研究紫云英苷与DNA的相互作用，探讨它们之间的结合方式，并根据实验处理相关的光谱数据，求得DNA对紫云英背的灭速率常数K。、结合常数K。及结合位点数 n，力求从分子水平操讨紫云美售与DNA相互作用的机制。以期为进一步探讨和研究具有生物活性的黄酮类药效小分子的药用机理及新型药物的设计提供一定的理论参考和依据。
收稿日期：2009-01-29，修订日期：2009-05-03
DOI: 10. 3964/j. issn,1000-0593(2010)02-0476-05 1
实验部分 1.1
主要仪器及试剂
F-2500型荧光光度计（日本日立公司)；UV-2450紫外可见分光光度计（日本岛津公司)；pHS-3C型酸度计（上海雷磁仪器厂)；DK-98-Ⅱ型恒温水裕锅(大津市泰斯特仪器有限公司)；Finnpipette可调式移液枪（美国芬兰雷勃公司)。
小牛胸腺DNA(ct-DNA，DNA，北京华美生物T.程有限公司产品），用0.05mol·L-的NaCl游液配制成500μg mL-1的贮备液，纯度用UV光谱检测（Ao/A>1.8)合格，浓度用260nm处的摩尔消光值（eao=6600L·mol~1， cm=1)来确定，落液保存于277K的冰箱中备用；紫云英昔(AST，本实验室从简叶中分离纯化获得，含单大于95%)用甲醇溶解供试；pH7.4的Tris-HCI缓冲溶液；1.00×10-* mol·L-"的中性红(NR)；4.00 mol·L-"的NaCI溶液； 0.01mol·L-1的KI溶液，其他所用试剂均为分析纯，实验
用水为二次蒸馏水。 1.2实验方法
(1)DNA与紫云英苷作用的荧光光谱及其紫外吸收光谱的测定
基金项目：国家自然科学基金项目(20562008)以及教育部长江学者和创新团队发展计划资助项目(IRT0540)资助
作者简介：邓胜国，1970年生，南品大学食品科学与技术国家重点实验室博士研究生
*通讯联系人
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