第32卷，第5期 2012年5月
分析
光谱
学
与光
Spectroscopy and Spectral Analysis
DNA凝聚性质的紫外光谱研究
张婧，胡
林2，刘艳辉"，张碧程"
1.贵州大学生命科学学院，贵州贵阳550025
2.贵州大学理学院软聚象变物理实验室，资州贵阳
550025
Vol.32,No.5-pp1306-1309
May,2012
摘要为探讨DNA凝象的性质和机制，探究了不同浓度的精胺、亚精胺和三氟六氨合钻对小牛胸腺 DNA紫外吸收的影响。精胺、亚精胺与DNA相互作用在紫外光谱上具有相似特征，随着它们浓度的增加紫外光谐在260nm处都有先增色，后减色，再增色的趋势；随着三氧六氨合钴浓度的升高紫外光谱出现先减色，后增色，精胺、亚精胺和三氟六氨合钻与DNA相互作用均能使DNA凝案，但作用方式有所不同。三氟六氮合钻较之精胺、亚精胺与DNA相互作用更为敏感。多胺紫外光谱分析结果与最近单分子实验结果吻合。
关键词精胺；亚精胺；三氟六氮合钴；DNA凝案
DOI; 10. 3964/j. issn. 10000593(2012)05-1306-04
中图分类号：Q6-3
引言
文献标识码：A
1
生物体内，绝大多数DNA是以超螺旋形式存在的，其构象影响DNA信息遗传及基因突变等，对维持正常基因功能有重要意义，研究表明生物体中组蛋白、脂肪族含氮化合物，能够使DNA凝象成致密的结构(-)，近年来研究还发现大环多胺及其金属配合物()，多胺循生物、纯化组蛋白(})、金属络合物(三氯六氨合钻[Co(NH,)，JCl,等))、酒精等均可导致DNA凝聚现象，研究这类凝聚因子促使DNA形成致密结构的机制对于理解生物体中DNA染色体的形成和去凝案化都有重要意义，对进一步深人探讨生物体内基因复制及基因表达等重大问题有深远科学意义。研究多胺、金属络合物这两类物质与DNA的相互作用。目前国内外已采用紫外光谱法"，因二色谱法、核磁共报、傅里叶拉曼变换光谱法、原子力显微镜(*)等多种方法对多胺与DNA相互作用进行了研究，但这些研究中凝聚因子主要集中在低浓度（0.1 mol·L-1范围内)，因此本研究采用紫外光谱法，扩大凝案因子的浓度进行研究，观察到一些有愿的涨落现象。对高浓度的多胺、三氯六氮合钻与DNA相互作用进行检测。进步分析了高浓度的多胺、三氧六氮合钻与DNA相互作用的机制。为研究DNA发案和去凝聚化提供一定的实验依据，
实验部分
1.1
仅器与试剂
Ultrospec 2100pro型紫外-分光光度计购自美国GE Healthcare公司：BL-320H型电子天平购自日本SHIMAD ZU公司。
小牛胸腺DNA购自sigma公司.称取一定量DNA游解在三蒸水中，待完全溶解后用紫外分光光度计检测其纯度： Ae/Aze>1.8，符合实验要求，分装并在4C保存待用。
精胺Spermine(SPM)、亚精胺Spermidine(SPD)购自阿拉丁公司，均为分析纯；将精胺与业精胺用三蒸水分别配置为1mol·L-的母液，待用时逐级裕释。三氟六氮合钻[Co(NH，）。JCl，按文献[9]制备，三氧六氢合钻用三蒸水配置为
0.1mol·L-"的母液，待用时逐级稀释。 1.2方法
取20LDNA放人比色Ⅲ中，加人灭菌三蒸水定容200 μL，检测DNA样品浓度为40.37pg·mL-1。每次实验 DNA取此量。
取一定量的灭菌三蒸水加人到比色温中，在比色皿中加人20μLDNA及一定量的精胺，其在反应体系中的终浓度如表1所示；充分混合在室湿下静置反应2h后，以灭菌三
收稿日期：2011-08-16，修订日期：2011-11-20
基金项目：国家白然科学基金项目(11047022)，贵州省社会发展攻关项目（黔科合SY字[2009]3086)，资州省科技基金项日（野科合」字
[2010]2141号)，资州大学引进人才基全项日（费大人基合字[2009]001号)和资州省省长专项基金项目(露省专合字2010-5)资助
作者荫介：张始，女，1989年生，贵州大学生命科学学院硕士研究生
e-mail: azhangi100(@q9. com
，通讯联系人
万方数据
e-mail; hulin53@sina com