第33卷，第11期 2013年11月
光谱学与光谱分析 Spectroscopy and Spectral Analysis
基于荧光光谱法对银查黄酮糖苷的检测研穷
邵菊芳，温宗壮，朱红威
中国矿业大学化工学院，江苏徐州221116
Vol. 33 ,No. 11 -pp3055-3060
November ; 2013
摘要银杏黄酮糖苷因具有多种生物活性而被制药、食品、日用品等诸多领域广泛应用。针对目前银杏黄酮糖者检测操作紧项、成本高、耗时长的不足，建立广一种高精确、低成本的快速测定方法。根据黄酮类化合物能与A1+反应形成荧光整合物的原理，以芦丁为标样探索测试条件，结果表明在激发波长入三400 nm，发射波长入=520nm，pH为3.6的A1(NO:)-(HAc-NaAc)反应体系中反应1500s，整合物荧光强度趋于稳定且达到最大值。求得芦丁浓度与荧光值的线性回归方程为y=29.92x十36.49（R=0.986），线性范围为1.8×10-～3.2×10-”mo1·L-1。用这种方法检测了银否悬浮培养细胞中黄酮糖苷的含量，并进行加
标回收实验，平均回收率为101.3%。该方法灵敏度高，重现性好，操作简单，具有良好的应用前景。关键词荧光光谱法：银杏：黄酮糖苷
中图分类号：0657.3
3文献标识码：A
引言
DOI: 10, 3964/j issn. 1000-0593(2013)11-3055-06
生代谢物方面也有许多报道。在检测银杏黄酮组分中也已有应用。Zhag等用毛细管电泳法检测了菊花黄酮，建立了浓度与电流响应的线性关系"]。Chi等利用毛细管区带电泳分
银杏黄酮具有抗菌、抗氧化和抗肿瘤等诸多作用，是生物制药、保健食品、功能性产品、化妆品和动物饲料添加剂等诸多行业产品开发的主要原料口。紫外-可见分光光度法(ultraviolet and visible spectrophotometry，UV），高效液相色谱法（highperformance liquid chromatography，HPLC)等方法是常用于检测植物中黄酮类化合物的手段。其中UV法是最传统、应用最广泛的方法。Zhu等利用紫外-可见分光光度法对五种提取马齿苋黄酮方法的结果进行了检测3。 Wang等对刺五加用同样的方法做过类似的研究3]。但是该种方法用于测定植物中未经纯化的黄酮租提物，结果会很大程度上受到杂质的干扰，其原因在于许多提取物中常见的杂质如咖啡酸和质也具有邻苯二基结构，也能参与AP十的显色反应，使得测定结果会比实际值偏高。HPLC法测定结果相对准确，但设备贵、仪器维护成本高、使用费时且测定各成分时需要标准品对照，检测成本也高，实力一般的科研机构难以接受，通常为广得到更为精确的组分信息，经常与质谱（massspectrum，MS）、核磁共振（nuclearmagnetic resonance，NMR)等手段连用，进行定性定量检测。Qing等利用HPLC-MS结合"CNMR法从月季中鉴定了4个黄酮糖苷+」。Anja"]、Zhao]、Chang等都从不同的生物样本中分离鉴定广多种黄酮类化合物。毛细管电泳法在分析植物次
收稿日期：2013-05-03，修订日期：2013-08-09
基金项目：国家自然科学基金项目(21206190)资助
作者简介：邵菊芳，1978年生，中国矿业大学化工学院讲师
离检测了中国凉茶中儿种黄酮物质，这种方法能高效分离、省时、所需样品少、重现性好}，但其具有HPLC法相同的缺点。此外气相色谱法在黄酮类化合物的分析中应用很少，这主要是由于黄酮类化合物不耐受高温，检测前需将其衍生化，增加了实验成本，操作复杂，不被广泛采用。
根据黄酮类化合物能与A+反应形成荧光整合物的原理，建立了以芦丁为标品的银杏黄酮糖苷荧光光谱法（fluo-ro-spectrophotometrymethod，FSM）的检测手段。Serbia等曾研究了荧光分光光度法对人血清桑色素的检测，以液相色谱法的检测结果为对照，表明两种方法的相对标准误差在可接受范围内，荧光分光光度法是可靠的]。本试验中以银杏款浮增养细胞为样晶提取黄酮糖者并测定其含量，为植物药的开发利用提供了有力保障。
1实验部分 1.1材料与试剂
银杏细胞为本实验室培养所得，烘干并碾成粉末，贮存于干燥器于暗处保存备用。氢氧化钠、硝酸铝、亚硝酸钠、无水乙醇、芦丁均为分析纯及色谱级，甲醇产自国药集团化学试剂有限公司。棚皮系、山蔡系和异鼠季系标准晶（纯度
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