136-
2011 No. 4 Serial No. 229
China Brewing
热带假丝酵母转化生产木糖醇条件优化
贾婵媛，杨平平·
（山东轻工业学院食品与生物工程学院，山东济南250353）
Research Report
摘要：利用热带假丝酵母（Candidetropicalis）生物转化木精醇工艺简单、能耗低并且产物稳定。该文研究了菌体培养时间、转化时间、pH 值、初糖浓度、据床转速、加人菌体量对转化率的的影响，从而确立了最佳条件，即菌体培养时间为16h，转化时间为10h、转化pH值为5.5、转
化初糖浓度为20g/L、转化摇床转速为150/min、加入菌体量为10%（v/v），优化后木糖醇生物转化率达90%。关键词：木糖；木糖醇：热带假丝酵母：生物转化
文章编号：02545071(2011)04013603
中图分类号：TQ923
文献标识码：A
Optimizationof xylitolproduction conditionswithCandidatropicalis
JIA Chanyuan, YANG Pingping
(School of Food and Bioengineering, Shandong Polytechnic Uninersity, Jinan 250353, China)
Abstract: The bioconversion method for preparation of xylitol with Candida tropicolis had the advantages of simple process, low esergy and stable quality of products. Effects of inoeubation time, coeversion time, pH value, initial sugar conoentration, shaking speed and inoculum on conversion rate were studied and the optimum fermentation conditions determined with orthogonal experimental design, which were as follows;incubation time 16h, conversion time 1Oh, pH value 5.5, initial sugar concentration 20g/L, shaking speed 150r/min, inoeulum 10% (v/v). And under the optimum conditions, the yield of xylitol reached 90%.
Key words;xylose; xylitol; Candida tropicalis; bioonvension
木糖醇（xylitol)是一种五碳糖醇，甜度相当于谨糖，热量相当于葡萄糖，能调整代谢异常，是糖尿病人的营养剂和治疗剂。研究证实,本糖醇具有防齿、改善糖尿病患者病情、消除血酮症及改善肝功能等特殊的功效")。此外，木糖醇还具有和甘油及其它多元醇相类似的性质，因而在食品、印染、纺织、国防、塑料、皮革及轻工业等领域也广泛应用(2]。工业生产采用化学法，但该法生产成本较高，且对环境污染较大。生物转化法通过微生物体内的术糖还原酶将木糖转化为木糖醇，利用此法生产木糖醇，反应条件温和，不需要高温、高压；工艺简单，容易控制"]。本研究主要从节约能源，更利于工业化生产的角度对转化条件进行优化。 1材料与试剂
菌种热带假丝酵母CICIMY0009（Candidatropicalis CICIMY0009)实验室保藏。
活化培养基：土豆汁60mL，葡葡萄糖1.2g，琼脂1.2g， 0.1MPa，灭菌15min。
种子培养基：土豆汁30mL，葡萄糖0.6g，pH5.5， 0.1MPa,灭菌15min。
菌体培养基：木糖10g，葡萄糖10g，醇母膏6g，蛋白陈 4g，硫酸镁0.2g，磷酸二氨钾5g：蒸馏水1000mL，pH5.5， 0.1MPa,灭菌15min。
转化液：10g/L木糖、20g/L木糖、50g/L木糖。 2实验方法
通过不同实验确定假丝酵母发酵生产木糖醇的最佳发酵条件。
收稿日期：2010-12-07
2.1标准木糖醇曲线
00/00/00 100mL、1.60mg/100mL及0.80mg/100mL，在紫外分光光度
计下测定吸光度值，绘制木糖醇标准曲线。 2.2菌体生长曲线
将菌种接于活化培养基3d，挑2环接入种子培养基中培养24h，然后接人菌体培养基30℃、200r/min下培养，每
隔1h测其重量，绘制菌体生长曲线。 2.3酵母菌菌体培养时间
菌体培养4h后，每隔2h取10mL培养液进行离心，弃上清液，用蒸馏水洗涤一次。将菌体加人到装有100mL转化液的250mL三角瓶中30℃、pH5.5、150r/min进行转化。
4h后每隔2h对转化液中木糖醇含量进行测定。 2.4转化时间的影响
取10%菌体加人到装有100mL转化液的250mL三角瓶中30℃、pH5.5、150r/min进行转化。每隔1h对转化液中术糖醇含量进行测定。
2.5转化pH值对本糖醇生物转化的影响
改变转化培养基的pH值,将培养基的pH值分别调为 3.5,4.0,4.5,5.0,5.5,6.0,6.5及7.0,在30℃,150r/min下转化,4h后每隔2h测木糖醇含量。
2.6转化初糖浓度对术糖醇生物转化的影响
改变初糖浓度，采用3个不同的木糖浓度，分别为 10g/L、20g/L、50g/L对相同种子培养基的菌种在30℃、 150r/min下进行转化，4h后每隔2h对木糖醇含量进行测定。
作者简介：费婵媛（1984一），女，颈士研究生，研究方向为生物制药；杨平平·，教授，通讯作者。