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2011No.3 SerialNo.228
China Brewing
微生物繁凝剂产生菌的筛选及鉴定苏峰"，赵祥颖，张家祥2，韩延雷，刘建军1.2
Research Report
（1.山东轻工业学院食品与生物工程学院，山东济南250353;2.山东省食品发醇工程重点实验室，山东济南250013）
摘要：从活性污泥中筛选得到了1株产絮凝剂的细菌菌株X-1,经细菌生理生化试验和16SrDNA基因序列分析初步鉴定为在白杆菌属（Ochrobactrumsp.）。菌株X-1的主要代谢产物通过蛋白质、糖类物质的定性分析初步定性为多糖类化合物.该菌的发醇液对印染
污泥和印染废水均具有较好的絮凝处理效果。关键调：微生物絮凝剂：菌种筛选；鉴定
中图分类号：Q93-331
文献标识码：A
文章编号：0254-5071(2011)030094-03
Screening and identification of microbial flocculant-producing strain Ze
(I.School ofFoodandBioengineering,ShandongInstitute ofLight Industry,Jinan250353,China:
2.ShandongProvincialKeyLaboratoryofFoodandFermentationEngineeringResearch,Jinan250013,China)
eooooaaegadeeosseeooaoei biochemical properties of bacteria and 16S rDNA gene sequence analysis demonstrated that X-1 was closely related to the genus Ochrobactrum sp The main metabolic products of strain X-1 were preliminary identified as polysaccharide compounds through the qualitative analysis of protein and
carbobydrate. The bacteria fermentation liquid had good flocculantion effects on dyeing and printing waste. Key words: microbial flocculant, strain screening; identification
微生物累凝剂是一类由微生物产生的具有需赛活性的代谢产物，主要成分有糖蛋白、多糖、蛋白质、纤维素和 DNA等。微生物絮凝剂具有生物分解性和安全性，是新型、高效、无毒、无二次污染的累凝剂间。微生物累凝剂作为一类新型絮凝剂，由于其具有广谱絮凝活性、可生物降解性及使用的安全性，在水处理、食品加工和发酵工业等方面有广阔的应用前景，已经成为国内外新型水处理剂研究和开发的热点内。我国微生物累凝剂的开发大多处在菌种筛选阶段，从生产实际出发，能否筛选出微生物累凝剂的高产菌株是现阶段的关键技术之。本研究以筛选絮凝剂高产菌为目的，并对筛选出的菌株进行了生理生化试验、16SrDNA基因序列分析以及产物的初步定性鉴定。
1材料与方法 1.1材料
1.1.1分离材料
采自印染废水厌氧污泥、生活污水站曝气池中活性
污泥、培养厌氧颗粒污泥的上清液等8份样品。 1.1.2培养基
富集培养基：牛肉膏3g/L，蛋白陈10g/L，NaCI5g/L，苯酚0.4g/L，pH7.0~7.2。
平板分离培养基：牛肉青3g/L,蛋白陈10g/L,NaC15g/L，琼脂20g/L.pH7.0~7.2。
斜面保藏培养基：牛肉膏5g/L,蛋白陈10g/L,NaC15g/L，琼脂20g/L.pH7.0~7.2。
收稿日期：2010-11-24
液体种子培养基：牛肉膏3g/L，蛋白陈10g/LNaC15g/L， pH7.07.2。
发酵培养基：葡萄糖20g/L，磷酸氢二钾5g/L，磷酸二氢钾2g/L，NaC10.1g/L，硫酸铵0.2g/L，尿素0.5g/L，酵母膏
0.5g/L.pH7.0。 1.2试验方法 1.2.1菌种分离
取1g或1mL分离材料于富集培养基中，30℃振荡培养
24h，适当稀释后涂布于分离平板上，30℃培养1d~2d，观察菌落生长情况，挑取乳白色且黏稠菌落移接至斜面保藏培
养基中，30℃培养48h后备用。 1.2.2摇床初筛
以1株接1瓶进行摇瓶发酵初筛，摇瓶装液量为 35mL/250mL三角瓶，30℃、180r/min培养3d，发酵结束后，测定发酵液的絮凝活性，以未接种液体培养基作空白对照。 1.2.3摇床复筛
以1株接3瓶的方式进行摇瓶发酵复筛，摇瓶装液量为 35mL/250mL三角瓶，30℃、180r/min培养3d，然后测定发酵液的絮凝活性，
1.2.4紫凝活性的测定
在25mL比色管中加入20mL4g/L高岭土悬浊液和 0.5mL1%CaCl,的溶液，然后加0.5mL发酵液，将比色管上下颠倒10次，慢速颠倒10次，静置15min。取上清液于波长 550nm处测吸光度值，用未接种液体培养基代替发酵液作
作者篇介：苏峰(1984)，男，硕士研究生，研究方向为微生物资源开发；刘建军*，教授，通讯作者。