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2010 No.8 SerialNo.221
China Brewing
微生物絮凝剂产生菌的筛选杨五静"，赵祥颖？，张家祥，田延军，刘建军12
Research Report
（1.山东农业大学食品科学与工程学院，山东泰安271018;2.山东省食品发酵工程重点实验室，山东济南250013）
摘要：以菌株发酵液对高岭土悬浊液的絮凝效果为指标，从活性污泥等样品中筛选获得53株具有絮凝活性的菌株。经进一步摇瓶复筛获得一株摇瓶发酵液累激率达71.8%的菌株2-21。依据菌落形态、菌体形态及部分生理生化特征研究，初步鉴定菌株2-21可能为
肠杆菌属（Enterobacter)。结合蛋白质定性检测及糖类物质的呈色反应初步推断该菌株所产絮凝剂的主要成分为糖蛋白。关键调：微生物絮凝剂：菌种：筛选：鉴定
中图分类号：Q93-331
文献标识码：A
文章编号：02545071(2010)08-0094-03
Screening of bioflocculant-producing strains
YANG Yujing', ZHAO Xiangying", TIAN Yanjun’, ZHANG Jiaxiang°, LIU Jianjun2*
(l.College ofFood Science and Engineering,Shandong Agricultural University,Taian271018, China,
2.Key Lab ofFood and Fermentation Engineering ofShandong, Jinan 250013, China)
Abstract: Based on flocculating activity of fermented broth to kaolin clay suspension, 53 strains were isolated from activated sludge. After shaked flask fermentation, strain 2-21, whose flocculating efficiency achieved 71.8%, was acquired for future study. Studies on colony morphology, physio logical and biochemical characteristics primarily identified the strain 2-21 was Enterobacter. Main ingredient of bioflocculant was preliminarily deter-
mined as glycoprotein by qualified test of proteins and colorimetric reactions of polysaccharides. Key words: microbial flocculant; strain; screening; identification
微生物絮凝剂是一种由微生物产生的具有絮凝活性的高分子化合物，其化学成分主要是多糖、蛋白质、糖蛋白和核酸等物质，分子量为几十万Da以上。与无机和有机高分子累凝剂相比，微生物累凝剂具有安全、高效、无毒无害、易被生物降解、无二次污染等优点，微生物累凝剂的研究已引起人们的关注。但由于缺乏高产优良的生产菌株及生产工艺的系统研究，关于微生物累凝剂的多数研究尚处于实验室研究阶段因，因此，寻找高效絮凝剂产生菌，提高累凝活性，降低微生物累凝剂生产成本和使用成本是制约微生物累覆剂产业化的因素。
可产生絮凝剂的微生物广泛分布于土壤、污水和活性污泥中，包括藻类、细菌、真菌、放线菌等。从活性污泥等样品中筛选获得一株絮凝活性比较高的菌株2-21，摇瓶发酵液絮凝率达71.8%，且絮凝活性稳定，初步鉴定该菌株可能为肠杆菌属（Enterobacter)，所产累凝剂的主要成
分为糖蛋白。 1材料与方法 1.1试验材料 1.1.1分离样品
取自啤酒厂、淀粉厂、城市下水道等8份活性污泥或底泥样品。
1.1.2试验仪器
JY2002电子天平，GNP-9080型隔水式恒温培养箱， CHK-BI45光学显微镜，YXQ02型手提电热式灭菌锅，卧
收稿日期：2010-02-12
式电热式蒸汽消毒器，新型洁净工作台HD-920，HZQ-Y振荡箱，AnkeTDL-5-A台式离心机，722型光栅分光光度计，
SBA-50型生物传感器，分析天平METTLERAE200。 1.1.3 培养基
富集培养基：牛肉膏3g/L，蛋白陈10g/L，氯化钠5g/L，苯酚0.4g/L，琼脂18g/L.pH7.0~7.2。
分离培养基：牛肉膏3g/L，蛋白陈10g/L，氯化钠5g/L，苯酚0.4g/L，琼脂18g/L，pH7.0~7.2。
斜面培养基：牛肉膏3g/L，蛋白陈10g/L，氯化钠5g/L，苯酚0.4g/L，琼脂18g/LpH7.0~7.2。
液体种子培养基：牛肉膏3g/L，蛋白陈10g/L，氯化钠 5g/L,苯酚0.4g/L.pH7.0~7.2。
摇瓶发酵培养基：葡萄糖20g/L，磷酸氢二钾5g/L，磷酸二氢钾2g/L，氯化钠0.1g/L，硫酸铵0.2g/L，尿素0.5g/L，
醇母膏0.5g/L，硫酸镁0.2g/L，pH8.0。 1.2试验方法
1.2.1产絮凝剂菌株的筛选
平板初筛：取1g分离样品于富集培养基中，30℃振荡培养12h、24h、48h、60h后，适当稀释，吸取0.1mL涂布于分离平板，30℃恒温培养3d，观察菌落生长情况，挑取粘稠、表面粗糙的单菌落围，移接到斜面培养基上，30℃恒温培养3d 取出备用。
摇瓶发酵初筛：250mL三角瓶装35mL摇瓶发酵培养基，1株接1瓶，30℃、170r/min摇瓶发醇3d，发酵结束后，测
作者简介：杨玉静（1983-)，山东聊城人，在读硕士研究生，研究方向为食品微生物：刘建军*，教授，通讯作者。