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2014 Vol.33 No.9 Serial No.271
China Brewing
乳饮品中耐胃酸乳酸菌的分离鉴定与筛选
李明珠1李辉王丹
（1.青岛工学院食品工程学院山东青岛2663002.四川出入境检验检疫局四川成都610041
Research Report
摘要利用溶钙圈法结合乳酸菌纸层析实验从乳饮品中分离出3株乳酸菌对分离出的乳酸菌进行形态学鉴定及生理生化鉴定根据鉴定结果结合伯杰细菌学整定手册初步判定3株乳酸菌均为短乳杆菌。对三株乳酸菌进行人工胃酸模拟实验结果L2、L3经过人工胃酸处理后存活率分别为2.7%和3.9%存活率比L1高所以L2、L3菌株可以作为耐胃酸乳酸菌经过别化后应用食品的生产加工关键词耐胃酸筛选分离鉴定
中图分类号TS201.3
文献标识码A
doi:10.11882/j.issn.02545071.2014.09.011
文章编号0254-5071(2014)09-0042-03
Isolation, identification and screening of gastric acid tolerant lactic acid bacteria from milk drinks
LI Mingzhu', LI Hui*, WANG Dan
(1.Colege of Food Engineering, Qingdao University of Technology, Qingdao 266300, China
2.Enty-Exit Inspection and Quarantine Bureau of Sichuan, Chengdu/ 610041, China)
A bstract: By lactic acid dissolved calcium circle and paper chromatography method, three lactic acid bacteria were isolated from milk drinks. With morphological identification of physiological and biochemical identification, combining with Berger bacteriological identification manual identifica tion results, the results showed that three lactic acid bacteria were L actobacillus brevis. By gastric resistant test of three lactic acid bacteria, the sur-vival rates of strain L2 and L3 were 2.7% and 3.9%, which were higher than strain L1. So strain L2 and L3 could be used as gastric acid-tolerant strains, which could be applied to food production.
K ey words: gastric acid tolerance, screening; isolation and identification
目前活菌型乳酸菌乳饮品越来越受到人们的青睐，它不仅含有活性乳酸菌而且是零脂肪配方更好地满足了人们对健康的要求，乳酸菌乳饮品中起主要作用的当屈乳酸菌，它能维持肠道微生物菌群的生态平衡"。乳酸菌必须经过消化道环境进入大肠才能发挥其生理活性。但是经过消化道环境后乳酸菌数量大幅降低孟祥臣等闪通过研究模拟胃酸pH值条件下对双歧杆菌存活的影响，发现短双歧杆菌在pH1.5条件下作用3h后存活率仅有0.0045%
造成乳酸菌活性降低的原因有两个：一方面是由于
酸的低PH值环境影响，可使蛋自质的空间结构松散进而失去生物活性日;另一方面是肠液分泌的胆汁对乳酸菌的存活也有一定的影响[4,由于胆汁中胆盐的存在改变了菌体外膜的通透性，但是对乳酸菌的存活影响不大。新志强等通过对植物乳杆菌耐酸耐胆盐的体外实验研究发现菌株在0.3%胆盐的环境下活菌数有所下降但是下降不明显且菌株对不同胆盐的耐受性也没有显著差异。试验利用溶钙圈法结合乳酸纸层析法丛乳酸菌饮品中分离出乳酸菌并初步鉴定通过模拟胃酸试验筛选出耐酸能力较强的乳酸菌菌株应用于食品加工，为提高乳
收稿日期2014-07-30
基金项目：山东省高等学校科技计划项目(2012KY004)
酸菌在人体胃肠道内存活率并发挥其功效奠定一定的理论基础。
1材料与方法 1.1材料与试剂 1.1.1原料
活菌型乳酸菌乳饮品蒙牛优益CTM 1.1.2试剂
胃蛋白酶（100000U/g）：上海如吉生物科技发展有限公司强自藤、牛肉膏、酵母浸粉均为生化试剂北京奥博星生物技术有限责任公司盐酸、葡萄糖、氯化钠、乙酸钠磷酸氢二钾、硫酸锰、硫酸镁均为分析纯上海埃彼化学试
剂有限公司， 1.1.3培养基
MRS液体培养基蛋白陈10.0g牛肉膏10.0g酵母浸粉5.0g柠檬酸氢二铵2.0g，乙酸钠5.0g磷酸氢二钾2.0g 硫酸镁0.58g硫酸锰0.25g葡萄糖20.0g吐温-801.0mL，琼脂18.0g蒸馏水1000mLpH6.2~6.6
脱脂乳培养液将适量的新鲜牛奶加热煮沸20~30min 冷却后除去上层乳脂获得脱脂乳将其加入三角瓶中加
作者简介李明珠(1987-）男助教颈士研究方向为食品微生物
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