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中华人民共和国国家计量技术规范
JJF1530—2015
凝胶成像系统校准规范
Calibration Specification for Gel Documentation Systems
2015-09-15实施
2015-06-15发布
国家质量监督检验检疫总局发布 JJF1530—2015
本规范主要起草人：
谭和平（中国测试技术研究院）沈兴中 (中国测试技术研究院)
参加起草人：
戚小进 （中国计量科学研究院）苏红雨（中国测试技术研究院）傅博强（中国计量科学研究院） JJF1530—2015
目
录
引言
(IⅡ) (1 ) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (2) (2) (2) (2) (2) (2) (2) (2) (2) (2) (2) (2) (2) (3) (3) (3) (4) (4) (4) (5) (6) (8)
范围 2引用文件. 3术语和计量单位· 3.1灰阶等级· 3.2紫外激发光谱， 4概述…· 4.1 原理· 4.2 组成·· 5计量特性 5.1分辨率…. 5. 2 灰阶等级 5.3 信噪比 5. 4 光照度 5. 5 光照度不均匀率 5.6 紫外激发源光谱辐射相对分布率 6校准条件 6.1环境条件 6.2 校准用标准器及其他设备
校准项目和校准方法 7. 1 分辨率. 7. 2 灰阶等级 7. 3 信噪比… 7. 4 光照度. 7.5紫外激发源光谱辐射相对分布率 8 校准结果表达
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复校时间间隔附录A校准证书内页推荐格式附录 B 白光照度校准结果的不确定度评定示例附录 C 紫外激发源校准装置
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引言
本规范依据国家计量技术规范JJF1071一2010《国家计量校准规范编写规则》
JJF1001一2011《通用计量术语及定义》JJF1059.1一2012《测量不确定度评定与表示》编制。
本规范的制定主要参考了GB/T9403一1988《反射式灰度级测试图》、GB19258 2003《紫外线杀菌灯》、GB/T20225一2006《电子成像词汇》、GB/T20733一2006《数码照相机术语》、JB/T10362一2010《数码照相机》、ISO12233一2000《摄影电子静物照相机分辨率测量》（Photography一Electronicstill一picturecamerasResolution measurements）等标准。
本规范为首次发布。
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凝胶成像系统校准规范
1范围
本规范适用于对核酸电泳凝胶、蛋白电泳凝胶进行成像的凝胶成像系统的校准，其他类型的凝胶成像系统，可参照本规范执行。
2引用文件
本规范引用了下列文件： GB/T9403一1988反射式灰度级测试图 GB19258一2003紫外线杀菌灯 GB/T20225—2006电子成像词汇 GB/T20733一2006数码照相机术语 JB/T10362—2010数码照相机 ISO12233—2000 摄影电子静物照相机分辨率测量（Photography
Electronic stillpicture cameras Resolutionmeasurements)
凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本规范；凡是不注日期的引用文
件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本规范。 3术语和计量单位
GB19258一2003紫外线杀菌灯、GB/T20225一2006电子成像词汇、 GB/T20733一2006数码照相机术语、JB/T10362一2010数码照相机中界定的及以下术语和定义适用于本规范 3.1灰阶等级grayscale
对凝胶成像系统获得的图像明暗程度的定量描述。
3.2紫外激发光谱ultravioletexcitationspectrum
光谱全称为光学频谱，是复色光通过色散系统（如光栅、棱镜）进行分光后，依照
光的波长（或频率）的大小顺次排列形成的图案。凝胶成像系统紫外激发源的紫外激发光谱是特指波长200nm400nm的近紫外光谱。
4概述
凝胶成像系统是一种采用成像装置对置于暗箱内的核酸电泳凝胶、蛋白电泳凝胶进行成像，并将采集的图像输人计算机：通过相应的分析软件，对凝胶条带作定性和半定量分析的仪器。 4.1原理
由于样品在电泳凝胶上的迁移率不一样，以标准品或者其他替代对照品作参照，根据未知待测样品在图谱中的位置可以估测其相对分子质量大小，即定性分析。在一定浓
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度范围内，灰度值（光密度）与样品的一定浓度或一定质量成线性关系，根据未知样品的灰度（光密度），通过与已知浓度的标准品或替代对照品条带的灰度（光密度）值相比较，就可以得到未知样品的浓度或质量，即半定量分析。 4.2组成
凝胶成像系统主要由成像装置、暗箱、光源和分析软件等部件构成。光源可装配白光光源和紫外激发源，其中紫外激发源由紫外灯和一级滤光片组成。
5计量特性 5.1 分辨率 5.2灰阶等级 5.3信噪比 5.4光照度 5.5光照度不均匀率 5.6紫外激发源光谱辐射相对分布率 6校准条件 6.1环境条件
实验室环境满足仪器安装条件要求 6.2校准用标准器及其他设备
a）ISO12233分辨率测试图卡允许使用与该图卡等效的分辨率测试图卡（按GB/T20733一2006数码照相机术
语中5.19的规定）。
b）灰度级测试图卡符合GB/T9403一1988的要求。 c）一级光照度计测量范围含0.11x～199.9klx，相对示值误差不超过士4%。 d）紫外激发源校准装置工作范围包含200nm～400nm的光谱辐射计，波长示值误差不超过1nm，读数
的有效位在3位以上，探测部分的非线性误差小于1%。
e）配图像处理软件的计算机。 7校准项目和校准方法
7.1分辨率
开启白光光源，预热，待光源稳定后，将ISO12233分辨率测试图卡或其他等效的分辨率测试图卡置于样品台上，使图卡水平方向粗框与画面水平框平行，图卡的有效高度（分辨率测试图卡粗框内侧的高度）正好占满画面，进行拍摄，拍摄图像输入计算机，用专用软件测定拍摄图像的有效像素。
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7.2灰阶等级
开启白光光源，预热，待光源稳定后，将灰度级测试图卡置于样品台上，使灰度级测试图卡水平方向边框与画面水平框平行，图卡正好占满画面，进行拍摄，拍摄图像输人计算机，使用专用软件按实际像素图像模式进行测定，应能分辨灰度级测试图卡上的每个灰阶，同时用专用软件读取每个灰阶中心100×100像素区域的灰度值 7.3信噪比
在无光源照射条件下，进行拍摄，拍摄图像作为噪声图片，用专用软件读取噪声灰度值。
信噪比按公式（1）进行计算。
S =20 × lg L 1
(1)
式中： s L1 洁净图片的灰度值，取7.2中所能分辨的最大灰度值作为洁净图片的灰
信噪比；
度值；
LN 噪声图片的灰度值。 7.4光照度 7.4.1平均光照度
开启白光光源，预热，待光源稳定后，将光照度计探头置于样品台各点，见图1，逐一测定照度，每点分别测定3次，记录测量数据，
图1照度计布点示意图
分别计算每个点的照度平均值E，：按公式（2）计算平均光照度，作为照度的校准
结果。
(2)
式中： E E. 一 -第i个点的照度平均值，1x；
平均光照度，1x；
测量点的个数。
n
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