JJF
中华人民共和国国家计量技术规范
JJF 1665—2017
流式细胞仪校准规范
Calibration Specification for Flow Cytometers
2017-11-20 发布
2018-02-20实施
国家质量监督检验检疫总局发布 JJF1665—2017
流式细胞仪校准规范 Calibration Specification for
JJF 1665—2017
Flow Cytometers
归口单位：全国生物计量技术委员会
主要起草单位：中国计量科学研究院
参加起草单位：贝克曼库尔特商贸中国公司
北京深迈瑞医疗电子技术研究院有限公司
碧迪医疗器械（上海）有限公司
本规范委托全国生物计量技术委员会负责解释 JJF1665—2017
本规范主要起草人：
张玲 (中国计量科学研究院）刘瑛颖（中国计量科学研究院）隋志伟（中国计量科学研究院）
参加起草人：
潘娜 (贝克曼库尔特商贸中国公司) 董丽芳（北京深迈瑞医疗电子技术研究院有限公司）宋志华「碧迪医疗器械（上海）有限公司 JJF1665—2017
目 录
引言
(IⅡ) (1 ) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (1) (2) (2) (2) (3) (3) (3) (4) (4) (5) (5) (5) (6) (7) (9) (10)
范围… 2 引用文件 3术语· 3.1 等量可溶性荧光分子. 4 概述· 5计量特性· 5.1 分辨力· 5. 2 线性相关系数 5.3 检出限· 5. 4 漂移. 5. 5 重复性·· 5.6 示值误差· 6校准条件.… 6. 1 环境条件： 6.2 标准物质和校准设备 7校准项目和校准方法 7. 1 分辨力 7. 2 线性相关系数 7. 3 检出限 7. 4 漂移. 7. 5 重复性· 7. 6 示值误差.. 8 校准结果表达·· 9 复校时间间隔· 附录A 校准原始记录参考格式附录B校准证书内页推荐格式附录C示值误差校准不确定度评定示例
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.
I JJF1665—2017
引言
本规范主要参考了JJG1061一2010《液体颗粒计数器》和医药行业标准YY/T0588 2005《流式细胞仪》。
本规范为首次发布。
ⅡI JJF1665—2017
流式细胞仪校准规范
1范围
本规范适用于基于荧光检测原理的分析型流式细胞仪的校准。其他类型的流式细胞仪（以下简称仪器），可参照本规范执行。
2引用文件
本规范引用了下列文件： JJF1071一2010国家计量校准规范编写规则 JJF1265生物计量术语及定义凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本规范；凡是不注日期的引用文
件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本规范。
3术语
JJF1265定义的及以下术语和定义适用于本规范， 3.1等量可溶性荧光分子moleculesofequivalentsolublefluorochrome，MESF
颗粒发出的荧光信号强度相当的可溶性荧光素分子的物质的量浓度。用于表示颗粒发出的荧光信号强度。
4概述
流式细胞仪由液流系统、光学系统、检测系统和分析系统四部分组成（见图1）。 测量原理为鞘液和样品流在喷嘴附近组成一个圆柱流束，与水平方向的激光束垂直相交，染色的细胞受激光照射后发出荧光或产生散射光，这些信号分别被光电倍增管荧光检测器和光电二极管散射光检测器接收，经过计算机储存、计算、分析这些数字化信息，就可得到细胞的大小、活性、核酸含量、酶和抗原的性质等物理和生化指标。 5计量特性 5.1分辨力 5.2线性相关系数 5.3检出限 5.4漂移 5.5重复性 5.6示值误差
- JJF1665—2017
样品
细胞悬液 0
9
o 样品液
侧向角散射光
00 o C
o 。 . 。流动池
前向角散射光
:
侧向角散射光
前向角散射光
激光器 488 nm
光学滤器
绿色荧光(FL1)
?
。 .
荧老
橘红色荧光(FL2)
· 荧光
2 0o
红色荧光(FL3)
000 废液液流系统
:
光学系统
检测系统
分析系统
图1 流式细胞仪组成示意图
6校准条件 6.1环境条件
实验室环境应当满足仪器厂家的安装要求：环境温度（15～30）℃；相对湿度≤70%。
6.2标准物质和校准设备 6.2.1标准物质
单一荧光强度的荧光微球标准物质；多重荧光强度混合荧光微球标准物质；计数荧光微球标准物质；淋巴细胞计数标准物质。 校准时应采用有证标准物质，相对扩展不确定度不超过20%（k=2）。
6.2.2化学试剂
去离子水（18.2MQ2·cm，0.22μm滤膜过滤）； 0.1mol/L磷酸钠缓冲液pH（7.2～7.4）。
6.2.3校准设备
移液器，量程（200～1000）uL，B级及以上。校准设备需经检定合格。
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