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高效液相色谱法测定黄连配方颗粒及饮片中盐酸小檗碱的含量
用
孙玉艳1张建国2
（00000000 商要：本文采用高校液相测定了黄连配方题粒及饮片中盐酸小聚碱的含量，围定相为：WalersXBridgeC18液相色语柱摘
（0000g）流动相，检测波长为345nm；盐酸小案碱在50-350μgmL-范图内呈良好的线性关系。盐酸小案碱的平均回收率为99.6%，RSD为0.96%(n=6);此方法简便、准确、重现性好，可用于黄连配方题程及饮片中盐酸小聚碱的含量测定。
关键词：黄连配方颗粒及饮片：盐酸小染碱：含量
黄连别名为味连、川连、鸡爪连，县有清热焕湿，泻火解毒的功效。纲目》记载：“黄连大苦大赛，用之降火媒湿，中病即当止，当可久服，使肃杀之令常行，而伐其生发冲和之气乎？”黄连具有抗菌、抗真菌、抗病毒、抗阿米巴、抗炎、抗腹泻、解热、降血糖、降血脂、抗氧化、抗溃荡等作用。黄连适用于胃显呕恶，脾虚泄泻，五更肾泻者等。本文采用高效液相法对黄连配方颗粒及饮片中的盐酸小檗碱的进行了含量测定，
1仪器与试药
XYF-H帕恩特超低有机物型超纯水机(北京湘顺源科技有限公司);通微EasySep-1020高效液相色谱仪(上海通微分析技术有限公司)：UV-2200双单色器双光束紫外/可见分光光度计(北京北分瑞利分析仪器（集团)公司)；YP1004万分之一电子分析天平(南京麒麟分析仪器有限公司)：HORIBA小型pH检测器(汕头市龙湖区协力贸易有限公司）：Chemvak无油真空泵(北京桑翌实验仪器研究所)盐酸小檗碱对照品由中国药品生物制品检定所提供。乙睛(武汉市铭业科技发展有限公司)、甲醇(山东丰仓化工有限公司)、冰醋酸(武汉市铭业科技发展有限公司)、磷酸二氢钾(成都格雷西亚化学技术有限公司）、十二烷基硫酸钠（山东丰仓化工有限公司）、磷酸（成都格雷西亚化学技术有限公司)。
2含量测定 2.1色谱条件
依照2.3项下制备对照品溶液，精密吸取盐酸小巢碱对照品溶
渡10止L重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.83%。结果表明，本实验精密度良好。
2.7重现性试验
分别称取同批黄连配方题粒样品6份，分别依照2.2项下供试品制备方法制备供试品，按质量标准含量测定项下方法测定含量，并计算样品的RSD值为0.55%，结果表明，此含量测定方法的重现性良好
2.8稳定性试验
依照2.3项下供试品制备方法制备供试品溶液，分别在 0.2.4.8，10小时精密吸取供试晶溶液注人液相色谱仪，进样测定，供试品盐酸小檗碱峰面积积分值的RSD为0.55%。结果表明盐酸小檗碱至少在10小时内稳定。
2.9回收率试验
采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，精密称定，分精密添加一定量的盐酸小檗碱对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶液，测定含量(同时测定样品含量)，计算回收率。6 次测定的平均回收率为99.6%，RSD为0.96%。
2.10样品含量测定
依照上述含量测定方法，测定黄连配方颗粒及饮片三批样品中盐酸小檗碱的含量，结果黄连配方题粒含量为13.21%、13.55%，
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下I-。色谱柱为
13.13%.黄连饮片含量为4.32%、4.21%，4.13%。
WatersXBridgeC18液相色谱柱；甲醇-乙晴-0.05mol/L磷酸二氢溶液(30:30：40)(每100毫升中加入十二烷基硫酸钠0.4克，再用磷酸调PH为4.0)为流动相；检测波长为345nm；流速1.0mL·min；柱温：30%。理论板数按盐酸小巢碱峰计算应不得低于2000
2.2供试品溶液的制备
分别取黄连配方颗粒及饮片适量，研细，精密称取(约含盐酸小巢碱10mg），置50mL量瓶中，加甲醇-盐酸（100：1)溶液适量，超声处理提取25分钟，放置至室温，加甲醇-盐酸(100：1)溶液稀释至刻度.摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。
2.3对照品溶液的制备
精密称取盐酸小巢碱对照品约10mg，置50mL容量瓶中，用加
3讨论
分别考察甲醇-乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(30:30：40)）（每100毫升中加人十二烷基硫酸钠0.4克，再用磷酸调PH为 4.0)，乙腊-水-三乙胺（30:70:0.1)，乙情-四氢峡响-三乙胺磷酸缓冲波（25:15:60）不同比例的流动相，结果以甲醇-乙睛-0. 05mol/L磷酸二氢钾溶液(30:30：40)(每100毫升中加人十二烷基硫酸钠0.4克，再用磷酸调PH为4.0)为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用甲醇-乙晴-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(30:30：40)（每100毫升中加入十二烷基硫酸钠0.4克.再用磷酸调PH为4.0）为流动相。本方法简单、快捷、准确。实验表明此方法可用于黄连配方颗粒的含量测定。黄连配方颗粒中盐酸小檗碱的含量为不少于
甲醇-盐酸(100：1)溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每1mL溶
13.0%。
液中含盐酸小巢碱0.2mg)。
参考文献
2.4阴性干扰试验
取除黄连的原料，按方中比例和制备工艺方法制成阴性制剂，用供试品溶液制备的方法，制成阴性对照溶液，用以上选定的测定条件进行吸收曲线绘制，观察在与盐酸小檗碱相同的保留时间处是否存在吸收峰，结果表明：在选定条件下测得的阴性液吸收曲线在与盐酸小巢碱相同保留时间处不存在吸收峰，因此说明选定的条件测定盐酸小檗碱无干扰，其有较强的专属性。
[1]王浴铭,张君增,朱风云,刘伟,杨云,范全民等.黄连配伍吴莱英对黄连中主要化学成分的影响[J].中国中药杂志，1994(2)
[2]侯建忠,俞利坚,杨诚.HPLC测定舒通安泰胶素中小檗碱、表小碱、黄连碱、巴马汀含量[J]中国中医药信息杂志，2014(7).
[3]孙承浩,王吉华.HPLC同时分析笃菊上清丸中7个化学成分的含量研究[].中国生化药物杂志,2014(7)
[4孔卫东,李婷峰,溪永杰.一测多评法测定一清颖粒中5种蕙配类
成分的含量[J].中国药房,2014(24).
2.5标准曲线的制备
制备浓度为50、100、150、200、250、300、350μg*mL-的对照品
溶液，分别精密吸取10μL注人HPLC，记录色谱图。以峰面积积分值A(μg)为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，盐酸小巢碱对照品在50-350μg*mL-范围内线性关系良好
2.6精密度试验
[5]区艳辉,朱晶品,王驾民,张启伟.一测多评法测定黄连中小聚碱、巴马汀、黄连碱、表小聚碱、药根碱含量[]中国药学杂志,2009(5)
[6]刘艺,何羲.高效液相色语法测定痔洗剂中盐酸小聚碱和盐酸巴马汀的含量[J]中国中医药信息杂志，2011(3)