NY/T 3012-2016
咖啡及制品中葫芦巴碱的测定高效液相色谱法
Determination of trigonelline in coffee and its products—High performance liquid chromatography
2017-04-01实施
2016-11-01发布
前 言
本标准按照GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。
本标准由农业部农垦局提出。
1 范围
本标准规定了咖啡及制品中葫芦巴碱含量的高效液相色谱测定方法。
本标准适用于生咖啡、烘焙咖啡、速溶咖啡中葫芦巴碱的测定。
本方法的定量测定范围为0.002g/100g~1g/100 g;方法的检出限为0.001g/100g∶方法的定量限为0.002g/100g。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件.仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/ T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
NY/T 1518 袋装咖啡取样
3 原理
试样中葫芦巴碱用沸水提取，沉淀蛋白，过滤，用配有紫外检测器的高效液相色谱仪测定，外标法定量。
4 试剂和材料
除另有说明外，水为GB/T 6682规定的一级水。
4.1 试剂
4.1.1 甲醇（CH、OH，CAS∶67-56-1）∶色谱纯。
4.1.2 乙腈（CH;CN，CAS∶75-05-8）∶色谱纯。
4.1.3 磺基水杨酸（C2HOS·2H2O.CAS∶5965-83-3）∶分析纯。
4.1.4 标准品∶葫芦巴碱标准品（C;H;O.N，CAS∶535-83-1）∶纯度≥98%。
4.2 标准溶液配制
4.2.1 磺基水杨酸溶液∶称取磺基水杨酸 5.00 g，水溶解后定容至 100 mL。
4.2.2 葫芦巴碱标准储备溶液∶称取葫芦巴碱50mg（（精确至0.1mg），置于10ml.烧杯中，水溶解后转移到25mL.容量瓶中定容至刻度，配制成质量浓度为2000mg/L.标准储备液。该储备液在4℃冰箱避光条件下，有效期6个月。
4.2.3 葫芦巴碱标准工作溶液∶分别吸取适量的标准储备溶液，用水稀释质量浓度分别为1.0mg/L、2.0mg/L5.0mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L.和50.0mg/L.的混合标准工作溶液。该标准工作溶液4℃冰箱避光条件下，有效期1个月。
5 仪器设备和器具