JJF
中华人民共和国国家计量技术规范
JJF1718—2018
转基因植物核酸标准物质的研制
The Production of Genetically Modified Plant Nucleic Acid Reference Materials
2018-06-25发布
2018-09-25实施
国家市场监督管理总局发布 JJF1718—2018
转基因植物核酸标准物质的研制
JJF 1718—2018
TheProductionofGeneticallyModified
Plant Nucleic Acid Reference Materials
归口单位：全国标准物质计量技术委员会
主要起草单位：中国计量科学研究院参加起草单位：浙江省计量科学研究院
中国农业科学院生物技术研究所
本规范委托全国标准物质计量技术委员会负责解释 JJF1718—2018
本规范主要起草人：
王 晶（中国计量科学研究院）隋志伟 （中国计量科学研究院）董莲华（中国计量科学研究院）
参加起草人：
高运华（中国计量科学研究院）余笑波 （浙江省计量科学研究院）李亮 （中国农业科学院生物技术研究所） JJF1718—2018
目 录
引言 1 范围
(IⅡ) (1 ) (1) (1) (2) (3) (3) (3) (3) (3) (4) (4) (4) (4) (4) (4) (5) (5) (5) (5) (5) (5) (6) (6)
引用文件. 3 术语和定义· 4 通用性原则· 5 研制策划 6 制备 6.1 候选物要求 6.2 制备和包装·· 7 均匀性评估.· 8 稳定性评估 9 互换性评估 9.1评估原则 9.2评估方案 10 定值 10.1 转基因植物基体标准物质的定值 10.2转基因质粒标准物质和转基因植物基因组标准物质的定值 10.3 质量控制
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数据评估
10.4 10.5 标准物质的定值结果及不确定度 11研制报告和证书 11.1 研制报告 11.2 证书和标签 12保存附录A转基因玉米NK603质粒标准物质（GBW10086）互换性评估示例.....·（7）
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- JJF 1718—2018
引言
转基因植物核酸标准物质作为测量量值溯源与传递的载体，广泛应用于转基因植物及其产品的检测活动中，标准物质的质量对于确保上述活动的有效性和解决转基因植物及其产品检测结果一致性具有重要意义。本规范的目的是规范转基因植物核酸标准物质的研制过程，为转基因植物及其产品的检测等活动提供符合质量要求的标准物质。
本规范以JJF1342《标准物质研制（生产）机构通用要求》和JJF1343《标准物质定值的通用原则及统计学原理》为指导原则，参考了GB/T3543.5《农作物种子检验规程真实性和品种纯度鉴定》等技术文件的内容
本规范为首次发布。
I JJF1718—2018
转基因植物核酸标准物质的研制
1范围
本规范规定了转基因植物核酸标准物质研制策划、制备、均匀性评估、稳定性评估、互换性评估、定值、不确定度评定、研制报告和证书、包装和保存等要求，适用于指导转基因植物核酸标准物质的研制。
2 引用文件
本规范引用了下列文件： JJF1006一级标准物质技术规范 JJF1059.1 测量不确定度评定与表示 JJF1186木 标准物质认定证书和标签内容编写规则 JJF1218 标准物质研制报告编写规则 JJF1265 生物计量术语及定义 JJF1342 标准物质研制（生产）机构通用要求 JJF1343 标准物质定值的通用原则及统计学原理 GB/T3543.5农作物种子检验规程真实性和品种纯度鉴定 GB8170 数值修约规则与极限数值的表示和判定 NY/T672转基因植物及其产品检测通用要求 NY/T1101转基因植物及其产品食用安全性评价导则 《农业转基因生物安全管理条例》（中华人民共和国国务院令第304号）全国科学技术名词审定委员会，遗传学名词凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本规范：凡是不注日期的引用文
件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本规范。
3术语和定义
3.1转基因植物geneticallymodifiedplant
通过基因工程技术改变基因组构成的植物。 【NY/T672，3.1.2】
3.2受体植物recipientplant
指被导人重组DNA分子的植物。 【NY/T1101，2.3】
3.3转基因植物核酸标准物质geneticallymodifiedplantnucleicacidreferencematerial
具有足够均匀和稳定的特性，用于转基因植物核酸成分测量程序校准、确认与质量控制的一种物质。
1 JJF1718—2018
注： 1以不同品系转基因植物组织制成的物质，为转基因植物基体标准物质（geneticallymodified
plantmatrixreferencematerial），其特性量值为转基因植物与非转基因植物组织材料的质量分数或外源基因与内源参考基因拷贝数比值。
2以含有特定转化体基因或基因片段的重组质粒制成的物质，为转基因质粒标准物质（geneti-
callymodifiedplasmidreferencematerial），其特性量值为外源基因与内源参考基因拷贝数比值和拷贝数浓度。
3以转基因植物提取的基因组制成的物质，为转基因植物基因组标准物质（genetically
modifiedgenomematerial)，其特性量值为外源基因与内源参考基因拷贝数比值和拷贝数浓度。
3.4质粒plasmid
细菌细胞内一种自我复制的环状双链DNA分子，能稳定地独立存在于染色体外，并传递到子代，一般不整合到宿主染色体上。
【JJF1265，4.28】
3.5基因组genome
一种生物体具有的所有遗传信息的总和。 【JJF1265，4.35】
3.6引物primer
在聚合作用的起始时，可以引发合成另一种大分子，并与反应物以共价键形式连接的寡核苷酸序列。
【JJF1265,3.14】 3.7内源参考基因endogenousreferencegene
在生物体自身基因组内，具有恒定拷贝数，不发生等位基因变异的特定序列基因，可用于分析目标生物体基因组和基因表达。 3.8外源基因exogenousgene
经过转基因步骤导人受体细胞的基因。 【全国科学技术名词审定委员会．遗传学名词03.122】
3.9（转基因质粒标准物质的）互换性 commutability （of genetically modified plasmid reference material)
转基因质粒标准物质的属性，是指利用转基因质粒标准物质和转基因植物基体标准物质进行聚合酶链式反应扩增时的扩增效率、所产生标准曲线的截距和线性相关系数的一致性。
注：又称互通性。 4通用性原则
4.1应遵照JJF1342、JJF1343对标准物质研制的相关要求。 4.2转基因植物核酸标准物质的研制场所、操作活动、废物处理等应该遵照国家法规、 标准、国际公约、转基因生物安全管理等的相关要求。
注：参见《农业转基因生物安全管理条例》（中华人民共和国国务院令第304号）等。
2 JJF1718—2018
5研制策划 5.1标准物质研制机构承担转基因植物核酸标准物质研制（生产）项目的策划和管理。 5.2转基因植物核酸标准物质的类型和不确定度水平应适用于其在不同转化体转基因植物及其产品核酸检测中的预期用途，包括测量程序校准、确认、质量控制以及转基因植物产品核酸测量结果计量溯源性的建立。 5.3根据进出口贸易、市场监管、生物安全评估等需要进行转基因植物核酸标准物质的需求评估。 5.4评估转基因植物核酸标准物质候选物或原料的可获得性，并说明候选物的转基因生物安全管理风险。 5.5评估转基因植物核酸标准物质定值方法的计量溯源性。 5.6评估转基因植物核酸标准物质均匀性、稳定性、互换性等方法的适用性满足标准物质的研制需求。 6制备 6.1候选物要求 6.1.1候选物材料来源应清楚，信息完整，包括典型性、转化体纯度、转化体纯合度、 重组质粒中的转化体特异性外源基因序列、转基因生物安全管理和登记信息等。当国际公约、国家法规有规定时，应说明转基因植物核酸标准物质的候选物来源的合法性。 6.1.2候选物的选择应满足适用性、代表性，以及容易复制的原则。候选物应有足够的数量，以满足在有效期间使用的需要 6.1.3候选物的鉴定应科学合理，根据标准物质的不同类型进行鉴定。如农作物转基因植物基体标准物质候选物的鉴定应包括典型性鉴定、转化体纯度、转化体纯合度等，可参照GB/T3543.5分别确定转基因植物候选物中插入的外源基因的真实性、遗传背景和纯度，其中候选物的外源基因和内源参考基因等位基因的检测纯度均应大于99.9%。 6.2制备和包装 6.2.1制备的转基因植物核酸标准物质应与实际分析样品的基体尽可能保持一致，适用时可采用人工材料或基因工程方法等。 6.2.2转基因质粒和基因组标准物质纯度应满足吸光值A260/A280值介于1.8～1.9之间，A260/A230值大于2.0。 6.2.3应考虑采用适当的工艺措施保证转基因植物核酸标准物质的稳定性和均匀性。 6.2.4包装应满足该标准物质的预期用途。一般应选用密封性好、便于使用和品质良好、免吸附的包装材料，针对易氧化和见光易分解的标准物质应采用隔氧、避光包装。 7均匀性评估 7.1JJF1343对标准物质均匀性评估的要求适用于转基因植物核酸标准物质。 7.2均匀性评估方法
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