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实用医学杂志2013年第29卷第8期
辅助生殖技术中人类精子优化技术的相关研穷
尹秀玲综述习英审校
人类精子优选技术是辅助生殖技术(assisted reproductive technology ,ART) 的产物，是指在体外通过人工方法对精液进行处理的
的一门技术。其目的是
减少或去除精液中的活性氧、死精子去获能因子等物质，
以获得优选、浓
缩、高活力且具备受精能力的精子悬液，并启动精子获能，进面增加精子的
运动能力和穿卵能力，
提高临床妊娠
率[1]。日前常用的精子优选方法有上游法、密度梯度离心法，其他还有磁珠分选法、玻璃纤维滤过法、分子玻璃纤维滤过法等。下面将这些精子优选技术作一综述。
上游法（swim-up）
是利用活动精子具有游过液体界面进人不同培养液的能力，从而自行与不活动精子、
白细胞及杂质分离的
种精子优选方法。其体做法是先将
精液放人试管底部
培养液放于精液
上方，或者将精液注人培养波下方，从
而在两种液体并将其放人3
育1h左右
面形
动的精口
人上层培养液液中活动的精子
数量、
的界面告养箱内单过界面进
上层培养
鉴启收集
该方法适用于精子
活率及活力均较高的精液的优
化处理。其优点是由于是纯物理作用分离，对精子损伤小，获得的精子质量较高，操作简单，成本低。缺点是耗时长，精子回收率低。Zini等[2)研究发现上游法可显著降低一氧化氮产量，后者可降低精子的运动特性而被认为是精子毒物。
2密度梯度离心法（densitygradient centrifugation,DGC)
是根据正赏精子与不活动精子、畸形精子及精液中的其他细胞成分在
doi: 10.3969/j.issn.1006-5725.2013.08.066
贵州省遵义医学
作者单位：563003 院第一附属医院生殖中心
E-mail; diaoying12@
通信作者：刁英 yahoo.com.cn
密度梯度溶液柱中的运行能力、浮力密度和运动轨迹等方面存在着差异，通过离心力的作用使得精液中的各种成分在密度梯度溶液柱中达到平衡，面停留在各自的等浮力密度点上，从
而达到分离正是洗涤效果好收率较高
可能有 CAMP效子质量降 CAMP效
精的的。
其优点
、精子的回
精
会导致精率的精
会导致精子
质量降
异常精子经DCC处理后
项体反应率、
认方
得到精子的
低渗肿胀实验阳性率和
核成熟比例均优于上游法
在ART中
，精液中的精子和白细
胞产生的活性氧能损价
防精子细胞膜
降低精子 reol
胶体硅形成！用，能降低到的损伤
而影响精卵的结合。
咨融经能每著
对富用的税度
证实Pe 有垂件
妊娠率，且Pen
大量研究略烧丽具
即使通过洗涤也不能完全去除其中的内毒素，可能存在内毒素污，故1996 年已停止用于临床，之后便开发了含聚乙烯吡略烷酮的替代品
目前市场上常用的Percoll替代品有 Isolate,PureSperm 和 Spermgrad 等。它们均是硅烷包裹的二氧化硅微粒，并用多聚糖调整渗透压，毒性很小，无刺激性，已被批准用于人体。研究表明34]；用Isolate，PureSperm和Spermgrad进行精液优化处理与Pereoll比较，精子回收率、活动力、存活率及正常形态精子等指标，均优于后者。总的来说，Percoll 替代品是有效的，目前已广泛运用于 ART的实施过程中。
3磁珠分选法（magnetic-activated cell sorting, MACS)
其原理是：已包被一抗的避珠与
细胞表面相应分子特异性结合，磁珠携带与之结合的细胞吸附于分离柱或试管上，从而实现阳性细胞与阴性细胞的分离。具体方法是：用错锚定蛋白标记具有超顺磁性的磁珠，再利用错定蛋白与
磷脂酰丝氨酸(phos
极强的亲和力子质膜
预的与精子损的定
分离桂精子因质错定蛋顺磁性子的磁珠
铁珠的分离柱因无P
面可顺利通从而装
ohatidylserie，PS)有
不能通过完整的精
精子质膜受
定蛋白若
此
铺发
完整性受盗温下与含铁珠的
调工
员,PS外显，而与
此时锚定蛋白已与超因此，结合有凋亡精过磁场时即被滞留于含
而质膜完整的精子能与磁珠结合，从
分离柱移出磁场以被洗脱下来，
与正常精子分离开来。
气是管时日建
快，
精子
操作过程
子造成机械性压力，不影
理功能和活性。缺点是需要很
强的醋场来分离细胞，需要
离租册1
一次性的分
能在普通试管内进行，成本昂 Said等
[认为经MACS处理过
的精液行冻精复苏与未经过处理的精液行冻精复苏后，前者精子的复苏后存活率及运动能力明显增高。有研究表明（)：与传统的精子优化技术相比， MACS结合DGC能明显提高精子的活力、活率、非凋亡精子率，可有效别除质量差的精子，提高精子的受精能力，从而提高ART的成功率。但Nadalini 等[3研究却发现与上游法相比，MACS 不能提高体外受精中精子受精率。鉴于MACS在临床上的应用尚不多，各家报道的结果又不尽相同，故MACS 在精子优化技术中的运用还有待更多的研究证实。
玻璃纤维过滤法（glasswool 4
filtration，GWF)
是利用精子的白身运动和玻璃纤