第36卷，第3期 2016年3月
光谱学与光谱分析 Spectroscopy and Spectral Analysis
Vol. 36, No. 3, pp765-769
March,2016
同步荧光光谱法结合分子对接研究金雀花碱与牛血清白蛋白间相互作用
吴雨杭，韩忠保"，马嘉泽"，何妍"，刘丽艳"，辛士刚，于湛1，
110034
1，沈阳师范大学化学化工学院，辽宁沈阳
2沈阳师范大学实验中心，辽宁沈阳110034
摘要金雀花碱(Cy)是一种生物碱，主要存在于豆科毒豆属植物种子中。Cy具有较强的生物活性，特别是作为戒烟药物已得到广泛应用。在模拟生理条件下，应用荧光光谱法研究了Cy同牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用以及Cy猝灭BSA荧光发射的机理。详细考查了水浴温度、水浴时间以及溶液pH等因素对荧光猝灭的影响，并且通过Stem-Volmer方程计算了Cy与BSA间的结合类型、结合位点数目以及结合常数。结果表明，Cv与BSA可形成摩尔比为1：1的非共价复合物，其结合常数为5.6×103，其猝灭类型为静态痒灭。同步荧光光谱研究结果表明，Cy的结合主要影响BSA的Trp残基的荧光发射。进一步应用分子对接研究表明，氢键与疏水作用是Cy与BSA形成复合物的主要推动力。Cy与BSA中Trp213及其周围的氨基酸残基间存在氨键与疏水作用，这种作用将改变Trp213所处微环境的疏水情况，从而导致BSA的荧光发生弊灭，
关键词金雀花碱；牛血清白蛋白；荧光辞灭；同步荧光光谱法；分子对接
中图分类号：0657.3
引言
文献标识码：A
DOI: 10. 3964/j.issn. 1000-0593(2016)03-0765-05
实验中金雀花碱表现出一定的抗癌活性(")，因此Cy是一种潜在的抗癌药物。
Cy与蛋白质相互作用的研究未见报道，在模拟生理条
分子间相互作用，尤其是药物小分子与生物大分子间相互作用研究，已逐渐成为化学、生命科学和医药科学等领域中最为活跃的研究热点之一。血清蛋白是血浆里含量最高的蛋白质，是体内重要的载体。药物进人体内后一般无法直接作用于病灶部位，需通过首先与血清蛋白结合进行运输，随后再释放为游离态的方式作用于病灶部位。因此研究血清蛋白与药物分子间相互作用对掌握药物的运输、药理作用的发挥以及药物代谢都具有十分重要的意义"。牛血清白蛋白(BSA)含有583个氨基酸残基，分子量为66.4kDa，因其结构稳定、价格不高且与人血清白蛋白(HSA)同源，因此常用来替代HSA，研究药物在人体内的转运过程。
金雀花碱（cytisine，Cy)）是一种主要存在于豆科毒豆属植物种子中的唑诺里西啶生物碱(")(结构见图1)。Cy生理功能类似烟碱，能反射性地兴奋呼吸，使人心跳加速，血压急剧上升，与烟碱乙酰胆碱受体（nAChR)亲和力较强，用作戒烟药物使用已有超过40年的历史(")。最近人们发现，在体外
收稿日期：2014-11-12，修订日期：2015-03-12
件下，通过荧光光谱法研究了Cy对BSA荧光的痒灭作用，并利用同步荧光光谱法以及分子对接分析了Cy在BSA上的结合位点。
NH
Fig. 1 The structure of cytisine (Cy)
实验部分 1.1
仪器与试剂
CaryEclipse荧光光谱仪（瓦里安公司），FE20K型pH
基金项目：国家自然科学基金项目(21205080)，教育部留学回国人员科研启动基金项目（教外司留[2012]1707)，沈阳师范大学优秀人才支
持计划(2013年)和辽宁省高等学校优秀人才支持计划(LJQ2015105)资助
作者简介：吴雨杭，女，1989年生，沈阳师范大学硕士研究生
*通讯联系人
万方数据
e-mail; yuzhan@synu, edu, cn
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