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当代化工研究
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生物制药与研究
A13+对螺旋霉素发酵的影响
*朱义彬赖坤刘学威蔡森牛金刚（天方药业有限公司河南463000）
使螺旋素组分下降，总组分升高，关键词：全属高子；螺裁露素；组分中图分类号：Q
文献标识码：A
InfluenceofAl3+onSpiramycinFermentation Zhu Yibin, Laishen, Liu Xuewei, Caisen, Niu Jingang(Tianfang pharmaceutical co., Itd, He'nan, 463000)
2017-05
Abstract: In rhis paper; through adding metal ion in rhe pocess of spiramgcin fermentation, we hane fornd zhar at the time of 40h, adding 0.64g/L, rhe AJ3+ nor only can improve the ziter by az least 10.64%, ban also can improve the producf quality, as a resul, reduce rhe spinamycin component J and increase the total components.
Key words: metal ion; spiramycin; componen!
螺旋霉素（spiramycin，SPM）是由生二链霉菌所产生的多组分大环内酯类抗生素，其分子结构含有十六个骨架的大环内醋部分，其主要成分有端旋霉素1、Ⅱ、，故端旋霉素是三种组分的复合物，为白色至微黄色无定形物质。螺旋霉素可溶于氯仿、醇类、己醇、酮、乙酸丁酯等有机溶剂，微溶于水。临床上主要用于革兰氏阳性菌及部分革兰氏阴性菌等引起的感染。
在螺旋霉素的发酵研究中，金属离子一直是代谢调控方向的研究重点。一些研究认为，金属离子作为酶活中心可以不同程度地对影响螺旋霉索内酯环生物合成的酰基激酶和酰基辅酶A合成酶起到激活作用，提高螺旋霉素的发酵水平。通常带我们认为，二价金属离子可以作为酶活中心，见诸报道的有Co2+、Mg2+、Mn2+等，几乎没见到三价金属离子如A3+ 作为酶活中心对螺旋霉素生产的影响。螺旋莓素碱发酵中对其产量和组分研究报道较少。本文通过摇瓶试验，研究以不同添加浓度、不同添加时间添加A3+，对螺旋霉素发酵水平
和组分的影响。 1.材料与方法
(1)荫种
螺旋霉素链霉菌(Streptomycesspriamyceticus)，由天方药业有限公司提供。
(2)培养基及培养条件
斜面培养基成分。斜面培养基成分为淀粉、蛋白陈，黄豆饼粉、玉米浆、氯化钠、碳酸钙、琼脂：培养温度为(26±0.5)℃,相对度30%50%，培养12d，待跑子长好后，将成熟的斜面置4~6℃冰箱中保存待用。
平板培养基成分。平板培养基成分为淀粉、蛋白陈、黄豆饼粉、玉米浆、氯化钠、碳酸钙、琼脂；培养条件同斜面培养，待菌落长好后，置4～6℃冰箱保存备用。
种子培养基成分。种子培养基成分为淀粉、蛋白陈、黄豆饼粉、玉米浆、氯化钠、碳酸钙；温度26±0.5)℃，摇床转速220r/min，培养40h，
发酵瓶培养基成分。发醇瓶培养基成分为淀粉、黄豆饼
方方数据
粉、鱼粉、玉米浆、葡萄糖、氯化钠、硝酸铵、硫酸镁、磷酸二氢钾、碳酸钙、豆油；温度（26±0.5）℃，摇床转速 220r/min，培养96h。氯化铝的加量在正文中说明。
(3)测定方法
螺旋霉素碱组分效价测定采用高效液相法：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙睛-0.1mo1/L醋酸铵溶液（60：40）（用醋酸调节pH值至7.2±0.1）为流动相：取发酵液2ml，精密量取，加流动相5ml稀释并摇匀，精密量取201注入液相色谱仪，记录色谱图，螺旋霉素碱各组分的保留时间依次为：螺旋霉素1、螺旋霉素川、端旋霉素川。量取峰面积。另取螺旋霉素碱标准适量，同法测定，以外标
法以峰面积计算出螺旋需索碱的含量。 2.结果与讨论
(1)不同浓度的氯化铝的影响
为了初步考察氯化铝对螺旋霉素发酵的作用，在发酵培养基中加入不同浓度的氢化铝，接入相同的种子液，测效价及组分，结果见表1。从表1的数据可以看出，添加氯化铝后，发酵摇瓶效价比对照最高提高11.17%，可见，氯化铝加入到发酵培养基中对螺旋毒系的发醇有促进作用。
氯化铝浓度g/L 效价(u/ml)
对照 3002
0.01 3086
0.02 3075
0.04 3172
80'0 60
0.16 3061
0.32
0.64
32403353
表1不同浓度氨化铝下螺旋霉素碱摇瓶发酵情况(2)不同时间添加氯化铝的影响
在不同时间添加氯化铝试验中，24h添加0.32g/L氯化铝有较好结果，结果见表2，最高提高11.49%，我们分析认为，最佳添加时间可能在24h左右：此时对数生长期结束，菌丝伸展、粗壮、染色深、生命力强，能耐外界刺激。
添加时间效价(u/ml)
对照 3292
0 2965
12 3373
24 3782
95 3564
表2不同时间添加氯化铝下螺旋雾素碱摇瓶发酵情况