第30卷：第8期 2010年8月
光谱学与光谱分析 Spectroscopy and Spectral Analysis
Vol.30,No.8,pp2171-2174
August，2010
葡萄糖甘油二脂对纤溶酶原和纤溶酶原激活剂二级结构的影响
郝斐，吴文惠，翟佳华，包
斌*
上海海洋大学食品学院，上海201306
摘要为研究葡葡糖甘油二脂(GDG)对纤溶酶原和纤溶酶原激活剂二级结构的影响。应用圆二色谱法(CD)、聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)研究了GIXG对纤溶酶原和纤溶酶原激活剂二级结构的影响。在 GDG分别与单链尿激酶型纤溶酶原激活剂和链激酶相互作用后，使其二级结构发生改变，不同浓度的GDG 对一毕纤溶因子的螺旋、折叠、9转角和无规卷曲产生不同程度的影响。GDG对纤溶酶原和纤溶酶的。螺旋、9折叠、β转角和无规卷曲没有明显影响。利用SDS-PAGE发现了GDG促进纤溶酶原/单链尿激酶型纤溶酶原激活剂相互转化的作用。从耐可得出结论，GDG对单链尿激酶型纤溶酶原激活剂和链激酶的活性产生影喇，表明GDG通过改变单链尿激酶型纤溶酶原激活剂的内因性活性来促进纤溶作用。
关键调
葡萄糖甘油二脂；单链尿激酶型纤溶酶原激活剂；纤溶酶原；纤溶酶；链激酶；圆二色谱；SDS聚内烯酰胺凝胶电泳
中图分类号：Q461：R965.1
引言
文献标识码：A
DOI: 10. 3964/j. issn. 10000593(2010)08-2171-04 1材料与方法
葡帮糖甘油二脂（glucosyldiacylglycerol，GDG）是从据藻中分离得到的大然化合物，其属于中性甘油糖脂的一种。经过研究发现葡需糖H油二脂在一定浓度下具有促进纤溶酵原和单链尿激酶型纤溶酶原激活剂的相互活化作用，GDG在体外构建的纤溶体系中作用于单链尿激酶型纤溶原激活剂，提高了单链尿激酵型纤溶酶原激活剂的内因性尿激酶型纤溶酵原活化因子的作用.2)。GDG被添加到构筑的大白鼠动物模型中，发现GDG其有促进血栓溶解的作用3]。
圆二色（circulardichroism，CD)光谱是研究稀济液中蛋白质构象的一种快速、简单、较为准确的方法，其可以灵敏地反映出蛋白质构象的变化，并且已经被广泛地应用。 TorbiomNilsson等利用圆二色谱研究了在近紫外区2-抗纤溶酶对纤溶酶原和纤溶酶的作用机制(5]。
本文应用调二色光谱研究了不同浓度GDG对纤溶酶原和纤溶酶原激活剂二级结构的影响，进一步研究GDG对酶构象的作用机制。并在此基础上利用SDS-PAGE进一步对 GDG促进纤溶酶原/单链尿激酶型纤溶酶原激活剂相互转化的作用。
收稿日期：2009-10-08，修订日期：2010-01-09
1.1材料与仪器 1.1.1GDG
能萄糖甘油二脂分离白微劳马尾藻（Sagarssumulueil-
lum)，分离得到的GDG溶解于氯伤中低温保存备用。 1.1.2实验试剂
单链尿激酶型纤溶酶原激活剂（singlechainurokinase typeplasminogen activator，缩写为pro-uPA）、纤溶酶原（plasminogen）、纤溶酶（plasmin）和链激酶（streptokinase）均
购自于美国sigma公司。 1.1.3实验仪器
J-715-150S圆二色谱仪；JY-SCZ2型电冰精。 1.2实验方法
1.2.1GDG与纤溶酶原和纤溶酶原激活剂作用的面二色谱
实验
在1mL的比色管中分别加人80μL4mg·mL-单链尿激酶型纤溶酶原激活剂，然后依次加人0，32、80和160 μL浓度为1mg，mL"的GDG，以去离子水定容到800μL，混合均匀后在37℃条件下保温30min，然后在光程为0.1 cm的石英样品池中，扫描波长范围为190~250nm，扫描速
基金项目：国家留学回国人员基金和上海市白热科学基金项目(2500060412，10ZR1413800)资助
作者简介：部斐，女，1982年生，上海海洋大学食品学院硕士研究生
*通讯联系人万方数据
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