第30卷第11期 2013年11月
工学院学报
吉林化
JOURNAL OF JILIN INSTTUTE OF CHEMICAL TECHNOLOGY
文章编号：1007-2853(2013)11-0007-03
杂合抗菌肽MgJ抗菌活性的初步研究
尹佳
（吉林化工学院化工与生物技术学院，吉林吉林132022）
Vol. 30 Ne. 11 Nov.2013
摘要：采用琼脂孔穴扩散法和微量稀释法，对人工合成的杂合抗菌肽抗菌肽MgJ的抗菌活性进行研究，结果表明，抗菌肽Mg具有较强的抑制大肠杆菌与金黄色葡萄球菌的活性，对金黄色葡萄球菌的最低抑
菌浓度（MIC)为10μg/ml，对大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC)为5μg/ml. 关键词：杂合抗菌肽MgJ：最低抑菌浓度；抗菌活性
中图分类号：Q78
文献标志码：A
现今全球环境污染及食品安全间题已成为人类最为关注的热点问题.人们对防腐剂之类的食品添加剂在安全性能上提出了更高的要求，因此，人们开始把目光投向于天然防腐剂，它已成为食品科学领域一个重要研究课题.抗菌肽（antimi-crobialpeptides，AMP）是具有抗菌活性的肽的总称1]，其对引起食物，特别是肉类、鱼类等腐败的常见细菌，如大肠杆菌、葡萄球菌、产碱杆菌、假单胞菌、芽抱杆菌等均有较好的杀灭作用.研究结果表明，许多杂合抗菌肽的杀菌活性和抗菌谱都高于天然抗菌肽[2-3].杂合抗菌肽作为安全、高效和应用范围广的食品防腐剂，其研究开发无疑是个很有前途的重要课题，具有广阔的发展前景
本研究通过对抗菌肽Magainin-Ⅱ和Japoni-cinⅡ为基础人工合成的杂合抗菌肽MgJ的抗菌活性的研究，证明获得了比MagaininIⅡI和Japoni cinⅡ生物活性更高的抗菌肽，对利用基因工程技术生产抗菌肽作为安全、无毒副作用的天然食品防腐剂具有重要意义
材料与方法 1
1.1材料
氨苄青霉素（Amp）、LB培养基、MH肉汤培养基、MH平板培养基.杂合抗菌肽MgJ、金黄色葡萄球菌（StaphylococcusaureusATCC29213）、大肠杆菌（EscherichiacoliATCC25922）由吉林农业大学食品科学与工程研究室提供
1.2方法
1.2.1杂合抗菌肽Mg发酵过滤液的制备
将10mL的杂合抗菌肽MgJ发酵液原液分装到离心管中，以12000r/min离心10min，用孔径
为0.22μm无菌滤膜过滤，放4℃冰箱备用， 1.2.2供试菌的制备
将供试菌E.coliATCC25922和S.aureus ATCC25923接人到LB液体培养基中，37℃培
养，使其菌数达到1×10°CFU/mL备用. 1.2.3杂合抗菌肽Mg的活力单位
（1）把培养好的供试菌原液浓度用无菌生理盐水调至1.5×10°CFU/ml.取供试菌稀释液 50μL与50℃的LB固体培养基混匀后铺平板，待其凝固后，用酒精灯外焰灭菌过的打孔器（直径 5mm）打孔
(2）将Amp倍比稀释成1000、500、200、100 和50μg/mL，在每个孔中分别加入10μL做抑菌实验，用毫米尺测量抑菌圈直径，重复3次，根据抑菌圈直径大小表示抗菌活性.取杂合抗菌肽 MgJ发酵过滤液，用无菌生理盐水稀释成1.0、 1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0μg/mL,各取 10μL做抑菌实验.将杂合抗菌肽Mgl的各稀释梯度的抑菌圈大小和Amp各稀释梯度的抑菌圈大小进行比较
1.2.4杂合抗菌肽Mg最小抑菌浓度(MIC)的测定采用NCCLS的微量稀释法[4]
（1）将供试菌（E.coliATCC25922、S.aureus ATCC25923）接种到MH肉汤内，37℃培养12~ 18h，使细菌处于对数生长期，用无菌生理盐水稀
收稿日期：2013-08-15
作者简介：尹佳（1983-），女，吉林省吉林市人，吉林化工学院助教，主要从事食品生物技术与功能性食品方面的研
究
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