
SC/T 7232-2020
虾肝肠胞虫病诊断规程
Code of diagnosis for Enterocytozoon hepatopenaei disease
2020-08-26发布
2021-01-01实施
1 范围
本标准给出了虾肝肠胞虫病(Enterocytozoon hepatopenaei disease)诊断试剂和材料、器材和设备、临床症状,规定了采样、组织病理、套式 PCR和 TaqMan 荧光定量 PCR等病原检验的3 种方法和综合判定。
4.11 矿物油;要求无DNA酶和RNA酶,用于无热盖的 PCR扩增仪,还可以降低气溶胶产生的风险。
4.12 分子量标准∶DL2000 Marker。
4.13 琼脂糖。
4.14 抽提液Ⅰ;按附录 A中 A.2的规定执行。
4.15 抽提液Ⅱ∶按A.3的规定执行。
4.16 TE缓冲液∶按 A.4的规定执行。
4.17 1× TAE电泳缓冲液∶按 A.8的规定执行。
4.18 核酸凝胶染色剂;10 mg/mL 溴化乙锭(EB)储存液按A.10 的规定,或其他 EB替代品。
4.19 组织病理阳性对照∶受 EHP感染的对虾制成的组织切片。
4.20 组织病理阴性对照∶未受 EHP感染的对虾制成的组织切片。
4.21 套式PCR和 TagMan 荧光定量 PCR 阳性对照;为已知 EHP 阳性的组织样品 DNA模板,满足PCR分析需要,-20℃保存。
4.22 套式PCR和 TaqMan荧光定量 PCR 阴性对照∶为已知 EHP阴性的组织样品 DNA模板,一20℃保存。
4.23 套式 PCR和TagMan荧光定量 PCR空白对照为无菌双蒸水。
5 器材和设备
5.1 组织病理法所用器材和设备∶按照GB/T 28630.4—2012中第4章的规定执行。
5.2 PCR扩增仪。
5.3 实时荧光定量 PCR仪。
5.4 核酸浓度测定仪。
5.5 电泳仪。
5.6 水平电泳槽。
5.7 紫外观察仪或凝胶成像仪。
5.8 普通台式高速离心机。
5.9 手掌型离心机。
5.10 水浴锅或金属浴。
5.11 普通冰箱。
5.12 加热设备∶电炉或微波炉等。