SC/T 7236-2020
对虾黄头病诊断规程
Code of diagnosis for infection with yellow head virus genotype 1
2021-01-01实捷
2020-08-26发布
5 试剂和材料
5.1 除非另有说明，文件中使用的水为蒸馏水、去离子水或相当纯度的水。
5.2 二甲苯∶分析纯。
5.3 中性树胶。
5.4 DAFA固定液∶见附录 A中的 A.1。
5.5 苏木精染色液∶见 A.2。
5.6 1%伊红储存液∶见A.3。
5.7 1%焰红储存液∶见A.4。
5.8 伊红-焰红染色液∶见A.5。
5.9 粘片剂∶见A.6。
5.10 95%乙醇;分析纯。
5.11 85%乙醇;见A.7。
5.12 80%乙醇∶见A.8。
5.13 75%乙醇∶见A.9。
5.14 70%乙醇∶见A.10。
5.15 50%乙醇;见A.11。
5.16 组织病理学检测阳性对照为受 YHV1感染且显示明显病理变化的对虾头胸甲组织切片。
5.17 组织病理学检测阴性对照为未受 YHV1感染的健康对虾头胸甲组织切片。
5.18 DEPC水;见A.12的规定或商品化试剂。
5.19 总 RNA提取试剂或其他等效产品。
5.20 RNA酶抑制剂（RNasin 或 RNase Inhibitor，40 U/μL），—20℃保存。
5.21 M-MLV逆转录酶（200 U/μL），一20℃保存。
5.22 5×M-MLV逆转录酶缓冲液，一20℃保存。
5.23 dNTPs（各10 mmol/L），含dATP、dTTP、dGTP、dCTP各10 mmol/L的混合物，-20℃保存，用于逆转录。
5.24 dNTPs（各2.5mmol/L），含dATP、dTTP、dGTP、dCTP各2.5mmol/L的混合物，-20℃保存，用于PCR。
5.25 10×PCR缓冲液，无 Mg²，-20℃保存。
5.26 MgCl，（25 mmol/L），-20℃保存。
5.27 Tag 酶（5 U/μL），一20℃保存。
5.28 套式 RT-PCR检测阳性对照为已知受 YHV1感染且套式 RT-PCR结果显示阳性的对虾组织RNA，-70℃保存。
5.29 套式RT-PCR检测阴性对照为 SPF 对虾组织RNA，一70℃保存。
5.30 套式 RT-PCR检测空自对照为 DEPC水。