ICS 11.040.30
CCS C 30
团
体 标 准
T/JFX-003-2023
重组人源 Fc gamma RIIIA / CD16a (V176)
蛋白质量标准
2024 - 07 - 22 发布 2024 - 07 - 22 实施
北京发明协会 发 布
T/JFX-003-2023
前 言
本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则》给出的规则起草。
本文件由北京发明协会提出并归口。
本文件起草单位：北京百普赛斯生物科技股份有限公司、百斯医学诊断科技（北京）有限公司、杭
州韬圃科技有限公司、苏州新微溪生物医药有限公司
本文件主要起草人：陈宜顶、苗景赟、张立帆、刘茜、朱艳泽、蔡苗、秦丽丽、葛平菊、任文林、
张健夫
1
T/JFX-003-2023
目次
前 言 ............................................................................... 1
1 范围 ............................................................................... 3
2 规范性引用文件 ..................................................................... 3
3 术语和定义 ......................................................................... 3
4 技术要求 ........................................................................... 6
5 实验方法 ........................................................................... 6
6 检测规则 ........................................................................... 7
7 标签 ............................................................................... 8
8 包装、运输、储存 ................................................................... 8
2
T/JFX-003-2023
重组人源 Fc gamma RIIIA / CD16a (V176)蛋白
质量标准
1 范围
本文件规定了重组人源 Fc gamma RIIIA / CD16a (V176)蛋白技术要求、检验规则、标签、包装、
运输、储存，描述了检测方法。
本文件适用于重组人源 Fc gamma RIIIA / CD16a (V176)蛋白，该蛋白主要用于含有 Fc 段的单抗，
双抗，多特异性抗体，ADC，Fc 融合蛋白等生物药物 Fc 段效应的评估，不同突变体与受体的亲和力不
同，介导的抗体效应也不同。利用 SPR 技术体外检测相关药物与 Fc 受体蛋白的亲和力，进而直观评估
相关药物 Fc 段的免疫效应的强弱及有无。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注明日期的引用文
件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适
用于本文件。
《中华人民共和国药典》2020 年版三部相关章节本文件第六章节有描述。
3 术语和定义
3.1 下列术语和定义适用于本文件。
3.1.1
Fc 受体
Fc 受体是一类能够和抗体 Fc 片段特异结合的细胞表面蛋白，不同类型的细胞可以表达不同类型的
Fc 受体，对应的不同结构类型的抗体也和不同类型的 Fc 受体结合，从而诱导后续的不同类型的免疫反
应。
不同类型的细胞可以表达不同类型的 Fc 受体，对应的不同结构类型的抗体也和不同类型的 Fc 受体
结合，从而诱导后续的不同类型的免疫反应。Fc 受体包含多个家族，各个家族成员之间的结构都非常
相似。IgG 类型抗体的 Fc 受体是 FcγR，依据和 Fc 片段亲和力的强弱 FcγR 又可以被分为三个亚家族：
FcγRI、FcγRII 和 FcγRIII；包括高亲和力的 FcγRⅠ(CD64)，可结合单体 IgG；低亲和力的 FcγR
Ⅱ(CD32)和 FcγRⅢ(CD16)。FcγRIII 在体内有 FcγRIIIa 和 FcγRIIIb 两种亚型，和 IgG 的结合分别
为中度和低亲和力。FcγRIIIa 几乎在所有白细胞中表达，主要负责 NK 细胞的 ADCC 作用和巨噬细胞对
3
T/JFX-003-2023
抗体-抗原免疫复合物的清除。
其中重组人源 Fc gamma RIIIA / CD16a (V176)蛋白的序列见附件 A。
3.1.2
重组蛋白
重组蛋白（recombinant protein）是指应用重组 DNA 或重组 RNA 技术而获得的蛋白质。重组蛋白
工程先应用基因克隆或化学合成技术获得目的基因，连接到适合的表达载体，导入到特定的宿主细胞例
如 HEK293 细胞，利用宿主细胞的遗传系统，培养并表达出有功能的蛋白质分子，再经提取和纯化等步
骤制备而成。。
3.1.3
抗原
能引起机体免疫反应并产生抗体的物质。
3.1.4
抗体
机体由于抗原的刺激，由 B 细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原特异性结合的免疫球蛋白。
3.1.5
单克隆抗体/单抗
由单一 B 细胞分化增殖的子代细胞所分泌的高度均质性针对单一抗原决定簇的特异性抗体。
3.1.6
培养基
供给微生物以及植物、动物的细胞或者组织生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。
3.1.7
核酸
核酸是一类大分子聚合物，是所有已知生命形式必不可少的组成物质，是生命体遗传信息载体，为
脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）的总称。
3.1.8
DNA
脱氧核糖核酸，由脱氧核苷酸组成的大分子聚合物，能够携带生命体的遗传信息。
3.1.9
4
T/JFX-003-2023
克隆载体
携带目的基因进入宿主细胞进行复制、扩增或表达的工具，即用于克隆、运载和转移目的基因并能
自我复制的 DNA 分子。
3.1.10
质粒
细胞染色体外能够自主复制的环状 DNA 分子。
3.1.11
蛋白表达
利用生物细胞将外源基因通过一系列机制最终合成蛋白的一种技术途径。
3.1.12
蛋白表达系统
在蛋白表达时，由宿主、外源基因、载体和辅助成分组成的体系，通过该体系可以实现外源基因在
宿主中表达的目的。
3.1.13
纯化
从包含多种物质的混合物中，根据不同分子的物理、化学、生物特性，通过一定技术手段，提取得
到特定物质的过程。
3.1.14
转染
将外源基因转入真核细胞的过程。
3.1.15
HEK293
人胚胎肾细胞，衍生自人胚胎肾细胞的细胞系，广泛用于生产蛋白、疫苗、抗癌试剂及重组腺病毒
包被等。
3.1.16
MALS/ HPLC-MALS(Multi-Angle Light Scattering/High Performance Liquid
Chromatography-Multi-Angle Light Scattering).
多角度激光散射技术/高效液相色谱-多角度激光散射技术。
5
T/JFX-003-2023
3.1.17
SPR 表面等离子共振 (Surface Plasmon Resonance, SPR)，它通过检测生物传感芯片上配位体与
分析物之间的相互作用情况，进而探测物质的性质和结构。根据金属表面偶联的配体是否与分析物结合
而产生不同的共振角，通过监测共振角度的变化，可以推断出生物分子相互作用的亲和性、亲合常数、
结合动力学等信息。
4 技术要求
4.1 原液
4.1.1 纯度
SDS-PAGE 纯度：大于等于 95%
单体大于等于 95%
4.1.2 分子量（SDS-PAGE）40-50 kDa 是
4.1.3 生物学活性
与 Herceptin 亲和力 KD 为 0.1uM±3 倍
4.2 成品
4.2.1 性状：白色疏松体
重构后外观：澄清
4.2.2 蛋白含量：标识量的 100%-110%
5 试验方法
5.1 纯度
电泳法
依照《中华人民共和国药典》2020 年版三部部通则 0541“电泳法”第四法“SDS-聚丙烯酰胺凝胶
电泳法”测定；SDS-PAGE:还原型 SDS-PAGE。
依照《中华人民共和国药典》2020 年版三部部通则 0514 尺寸排阻色谱与多角度光散射联用
SEC-MALS 。
5.2 分子量：还原型 SDS-PAGE
依照《中华人民共和国药典》2020 年版三部部通则 0541“电泳法”第四法“SDS-聚丙烯酰胺凝胶
电泳法”测定。
5.3 生物活性
6
T/JFX-003-2023
表面等离子共振法。依照《中华人民共和国药典》2020 年版三部通则 3429 免疫化学法中表面等离
子共振法测定。通过表面等离子共振法测定重组人源 Fc gamma RIIIA / CD16a (V176)蛋白与 Herceptin
的亲和力。
5.4 外观
肉眼观察蛋白含量测定。
5.5 蛋白含量
依照《中华人民共和国药典》2020 年版三部通则 0731“蛋白质含量测定法”第六法 紫外-可见分
光光度法测定。
6 检验规则
6.1 生产批
以一次冻干成型的产品为一个生产批。
6.2 出厂检验
6.2.1 取样
6.2.1.1 通常情况下，从包装好的最小规格产品中随机抽取应检量的样品作为检测与留样样品。
6.2.1.2 对于每批最小包装产品，从包装好的产品中随机抽取 1 个最小包装作为检测、留样。
6.2.2 样品
6.2.2.1 抽样后样品瓶标签信息应包含产品名称、产品批次、产品货号、产品规格。
6.2.3 检验项目
本文件第五章节的所有要求。
6.2.4 判定规则
——所有出厂检验项目都合格，则判定该批产品出厂检验合格；
—— 出厂检验项目有一项不合格，则判定该产品为不合格品。
6.3 型式检验
6.3.1 正常生产时每年进行一次，如遇下列情况亦进行型式检验：
——当原辅材料、工艺有重大改变时；
——更换设备，或停产超过半年以上再恢复生产时；
——质量监督部门要求时。
6.3.2 合格判定
7
T/JFX-003-2023
——所有检验项目都合格，判定该产品型式检验合格。
7
标签
7.1 产品标签上应有下列内容：
——产品名称；
——产品货号；
——生产企业名称；
——产品批号；
——规格型号。
8 包装、运输、储存
8.1 包装
采用西林瓶密封包装。
8.2 运输
应在常温条件下运输，防止水浸或阳光直射。运输工具应无毒、无害、无污染。不得对包装有所破
坏。
8.3 储存
冻干品应在-20℃的干燥环境下储存（不排除短时间常温储存，尤其是重构后常温放置时间不超过
24 小时）。严禁有毒、有害、有腐蚀性的物质混合。
8
T/JFX-003-2023
附件 A 资料性
序列信息
Accession
# P08637-1 （ AA Gly 17 - Gln 208 ， V176 ）
GMRTEDLPKAVVFLEPQWYRVLEKDSVTLKCQGAYSPEDNSTQWFHNESLISSQASSYFIDAATVDDS
GEYRCQTNLSTLSDPVQLEVHIGWLLLQAPRWVFKEEDPIHLRCHSWKNTALHKVTYLQNGKGRKY
FHHNSDFYIPKATLKDSGSYFCRGLVGSKNVSSETVNITITQGLAVSTISSFFPPGYQ
9