ICS 71.040.10 N 53
T/CIMA 标
体
准
团
T/CIMA 0012—2019
火锅底料中吗啡、可待因胶体金免疫层析检测卡 Colloidal gold immunochromatography test cassette for
morphine and codeine in the hotpot
2019-07-18发布
2019-10-01实施
中国仪器仪表行业协会 发布 T/CIMA 0012—2019
前言
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中国仪器仪表行业协会食品快检专业委员会提出，本标准由中国仪器仪表行业协会归口，本标准起草单位：北京智云达科技股份有限公司、北京勤邦生物技术有限公司、北京普赞生物技术
有限公司、北京众检四方检验检测技术有限公司、北京市理化分析测试中心、中粮营养健康研究院、中国科学院过程工程研究所。
本标准主要起草人：钱瑞、张敬晗、桑华春、王覃、曹擎、谢艳红、王文珺、王新华、曹东山、邓乾民、 孙清、张晓梅、贾丽、钱承敬、张贵峰、马立利。
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火锅底料中吗啡、可待因胶体金免疫层析检测卡
1范围
本标准规定了火锅底料中吗啡、可待因胶体金免疫层析检测卡术语和定义、要求、试验方法、检验规
则、标志、使用说明书、包装、运输和贮存，
本标准适用于采用竞争性抑制免疫层析原理定性分析的火锅底料中吗啡、可待因胶体金免疫层析检测卡（以下简称“检测卡”）。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T191包装储运图示标志 GB/T2828.1一2012计数抽样检验程序第1部分：按接收质量限（AQL）检索的逐批检验抽样
计划
GB/T6682—2008分析实验室用水规格和试验方法 DB31/2010一2012食品安全地方标准火锅食品中罂栗碱、吗啡、那可丁、可待因和蒂巴因的测
定液相色谱-串联质谱法
KJ201707食品中吗啡、可待因的快速检测胶体金免疫层析法：总局关于发布《食品中吗啡、可待因成分的快速检测胶体金免疫层析法》等3项食品快速检测方法的公告（2017年第92号）[EB OLJ.(2017-8-4)[2017-12-1J.http://samr.cfda.gov.cn/WS01/CL0087/176020.html
3术语和定义
KJ201707界定的以及下列术语和定义适用于本文件。
3.1
胶体金免疫层析法colloidalgoldimmunochromatographyassay 利用竞争抑制免疫层析的原理，样本中的吗啡、可待因在层析的过程中与胶体金标记的特异性单克
隆抗体结合，抑制了抗体和NC膜检测线（T线）上吗啡、可待因-蛋白偶联物的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。通过检测线的颜色深浅变化或与控制线（C线）颜色深浅比较，对样品中吗啡、可待因进行定性判定。 3.2
检测卡testcassette 由试纸条及配套卡壳组装而成（见图1）。其中，试纸条由样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜（NC膜）和
吸水纸构成。将特异性的抗原或抗体以条带状固定在硝酸纤维素膜（NC膜）上，胶体金标记试剂（多克隆抗体或单克隆抗体)吸附在金标垫或金标微孔中，当加入待检样本后，样本溶解金标垫上或金标微孔中的胶体金标记试剂并与之相互反应，通过毛细作用向前移动，移动至固定抗原或抗体的区域时，待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留，聚焦在测试线（T线）上，可通过目测观察到显
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色结果。
金标垫
NC膜
吸水纸
C线
T线
样品垫
样品流动方向
加样孔
0
S
图1检测卡组成示意图
3.3
检测限 limit of detection 在本文件规定的试验条件下，使检测卡呈现阳性结果时的样品中吗啡、可待因的最低浓度。
3.4
假阴性率 false negative rate 在本文件规定的试验条件下，达到实际最低检出水平时，阳性样品中检出阴性结果的最大概率（以
百分比计），具体计算参见附录A。 3.5
假阳性率 false positive rate 在本文件规定的试验条件下，达到实际最低检出水平时，阴性样品中检出阳性结果的最大概率（以
百分比计），具体计算参见附录A。 3.6
灵敏度 sensitivity 在本文件规定的试验条件下，达到实际最低检出水平时，检出阳性结果的阳性样品数占总阳性样品
数的百分比，具体计算参见附录A。 3.7
特异性 specificity 在本文件规定的试验条件下，达到实际最低检出水平时，检出阴性结果的阴性样品数占总阴性样品
数的百分比，具体计算参见附录A。
4要求
4.1 工作条件
仪器在下列条件下应能正常工作：
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a）环境温度：15℃~30℃。 b）工作环境应洁净，操作时避免阳光直射。
4.2外观
检测卡表面光滑平整，颜色均匀一致，纤维膜面无露底、起泡、麻点、起皱、刷痕等缺陷；点样孔应洁净 4.3 性能指标 4.3.1试纸条宽度
试纸条宽度应不小于3mm。 4.3.2 ：层析速度
层析速度应不低于10mm/min。 4.3.3 检测限
吗啡、可待因均为40μg/kg。 4.3.4灵敏度
灵敏度应不小于99%。 4.3.5 特异性
特异性应不小于95%。 4.3.6 假阴性率
假阴性率不大于1%。 4.3.7 假阳性率
假阳性率不大于5%。 4.3.8 ：重复性
重复性为100%。 4.3.9 稳定性
在37℃下放置60d，或者50℃下放置25d，检测卡应符合4.3.1～4.3.8的要求， 4.3.10 批间差异性
取3个批号检测卡，检测浓度为40ug/L的吗啡、可待因样品液，反应结果应一致，显色应均一。
5 试验方法
5.1试验条件 5.1.1试验环境条件
本试验应在4.1规定的条件下进行，
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5.1.2试剂与材料 5.1.2.1试剂
除另有规定外，本试验所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682一2008规定的二级水。 甲醇（CHOH）：分析纯。 乙醇（CzH;OH）：分析纯。
5.1.2.2仪器与设备
包括： a）天平：分度值0.01g。 b）离心机：不低于4000r/min。 c）振荡器。 d）计时器。 e) 移液器。 f) 游标卡尺：精度为0.02mm。
5.1.3标准物质 5.1.3.1 吗啡，分子式C1H1.NOs，CAS编号57-27-2，或等同可溯源物质。 5.1.3.2 磷酸可待因，分子式C18H21NO：·H.PO4·3/2HO，CAS编号41444-62-6，或等同可溯源物质。 5.1.4标准溶液的配制 5.1.4.1吗啡、可待因标准储备液（1mg/mL）：分别精密称取适量吗啡、可待因参考物质，用甲醇溶解，并稀释成浓度为1mg/mL的吗啡、可待因标准储备液。一20℃避光保存，有效期1年。 5.1.4.2吗啡、可待因标准中间液（10μg/mL）：精密移取吗啡、可待因标准储备液（1mg/mL）1mL分别置于100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成浓度为10μg/mL的吗啡、可待因标准中间液。 一20℃避光保存，有效期3个月。 5.1.4.3吗啡、可待因溶液（80μg/L）：精密移取吗啡、可待因标准中间液（10μg/mL）0.8mL分别置于 100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，制成浓度为80ug/L的吗啡、可待因标准工作溶液。4℃避光保存，有效期1个月。 5.1.4.4吗啡、可待因溶液（40uμg/L）：精密移取吗啡、可待因标准中间液（10μg/mL)0.4mL分别置于 100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇勾，制成浓度为40uμg/L的吗啡、可待因标准工作溶液。4℃避光保存，有效期1个月 5.1.4.5吗啡、可待因溶液（20uμg/L）：精密移取吗啡、可待因标准中间液（10ug/mL）0.2mL分别置于 100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，制成浓度为20ug/L的吗啡、可待因标准工作溶液。4℃避光保存，有效期1个月。 5.1.5质控试样 5.1.5.1阴性质控样品：取B.1.3质控样品，按DB31/2010一2012，LC-MS法确证。 5.1.5.2阳性质控样品：取B.1.3质控样品，然后逐渐添加适量标准溶液，使液体样品中吗啡、可待因含量为40ug/L，半固体样品或固体样品中吗啡、可待因含量为40μg/kg。
注：根据每次试验时的基质类型做相应的基质加标质控试验。 4