
第35卷,第8期 2015年8月
光谱学与光谱分析 Spectroscopy and Spectral Analysis
Vol. 35,No. 8 -pp2176-2179
August,2015
变温拉曼光谱和DSC探讨人参臭替Rb1分子与DPPC双层膜的作用
惠歌,2,刘威,张景洲,周铁莉,王思明,赵雨1·,赵冰
1,长春中医药大学,吉林长春130117
2.吉林大学超分子结构与材料国家重点实验室,吉林长春130012
摘要研究人参皂苷分子与生物膜的作用对于深入了解中药人参的药理活性及其生物学功效至关重要 DPPC作为具有双分子层结构的脂质分子,常被许多国内外学者作为模拟膜的模型来研究药物分子与细胞膜的作用;Rb1作为中药人参中的重要皂苷成分,具有显著的药理学功效和生物性能。拉受光谱是探讨分子间作用的有力工具,差示扫描量热技术(differentialscanningcalorimetry,DSC)是研究脂双层分子单体及其与药物分子作用的常用技术,而将两者结合研究药物分子对细胞膜作用的研究的报道较少。本文采用变温拉曼光谱和DSC探讨了在温度变化条件下人参皂苷Rb1单体分子与DPPC双层膜的作用。通过拉曼光谱测试,在Rb1作用前后,DPPC分子极性头部O一C一C一N十和C一C伸缩振动区域以及烷基链部分C一H链的伸缩振动区域的变化表明,随着温度的增加,含有一定浓度Rb1的DPPC磷脂极性头部旁氏构象没有发生变化,脂酰链的无序性构象增多,侧向排列的无序性增强,DPPC脂双层的流动性增加。由DSC实验得到的几个热力学常数[相变温度(T)、半峰宽(△Ti/)及相转变恰值(△H)的变化表明,DSC进一步验证了变温拉受实验结果,随者Rb1浓度的增大,DPPC双层膜的相变温度显著下降,流动性增强,说明Rb1对DP PC双层膜的影响较大。
关键词变温拉受;DSC人参皂苷Rbl;DPPC双层膜
中图分类号:0657.3文献标识码:A
引言
DOI : 10., 3964 /j. issn. 1000-0593 (2015 )08-2176-04
1实验部分
药物和细胞膜的作用对该药物发挥其药效、探讨药物的作用机制至关重要。二棕榈酰磷脂酸胆碱(1,2-dipalmitoyl-glycero-3-phosphocholine,DPPC)作为通用的生物膜模型广泛用于模拟研究药物与细胞膜的作用(1.2)。人参皂苷Rb1在名贵药材人参的百余种成分含量中占主导地位,其特殊的药理活性及医用价值深受多数研究者的青3.1}。近年来,科研工作者们采用多种手段逐渐开展了药物与生物膜作用的研究5.。本研究组也试图从分子水平研究了人参皂苷分子与生物膜的作用了,并取得了比较理想的结果。为了深人探讨单体皂苷分子的作用机制,在本文中,首次应用变温拉曼光谱和差示扫描量热技术(differentialscanningcalorimetry+ DSC技术研究广人参皇者Rb1分子与DPPC双层膜的作用,
对阐述皂苷Rb1分子的构效学研究具有重要意义。收稿日期:2014-07-12,修订日期:2014-10-22
1.1试剂与材料
人参皂苷Rbl试剂标准品采购于中国药品生物制品检定所,经色谱分析其纯度在95%以上。二棕榈酰磷脂酸胆碱(DPPC)购于AvantiPolarLipidsInc。柠檬酸、磷酸氢二钠等
试剂均为分析纯。 1.2样品制备
参照文献制备DPPC囊泡。将含有Rb1与DPPC按比例混合后溶于氯仿和甲醇溶液(V氯仿:V甲醇=7:3)中,通氮气吹干有机溶剂,真空条件下保存24h,于缓冲液(10 mmol·L-,磷酸氢二钠-柠檬酸,50mmol·L-1Nacl, pH7.2)中55℃条件下水化1h,变温拉曼样品中人参皂苷 Rbl的浓度分别为0和20mol%,DSC样品中Rb1的浓度分别为0,5,10,15,20mo%。拉曼和DSC样品中DPPC的
基金项目:国家自然科学基金项目(81373937,21273091,21103062),国家“十二五"科技支撑计划项目(2011BAI03B01-04),高等学校博士
学科点专项科研基金项目(20110061110017)和吉林省科技发展计划项目(20150520139JH)资助
作者简介:惠歌,女,1981年生,长春中医药大学讲师
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