第30卷，第11期 2010年11月
谱学与光谱分析光
Spectroscopy and Spectral Analysis
Vol.30,No.11.pp2998-3001
November, 2010
卵黄低密度脂蛋自结构的红外光谱和激光拉曼光谱分析
薛慧君，孙润广，王小梅，常恰光
陕西师范大学物理学与信息技术学院，生物物理与生物医学工程实验室，陕西西安710062
摘要低密度脂蛋白是把朋固醇运输到肝脏合成肌酸一种重要的脂蛋白。低密度脂蛋白结构的研究对弄清动脉硬化发病机理有着非常重要的意义，用硫酸铵分离法快速分离鸡蛋黄中各种蛋白成分，用Sephadex G-200柱层析分离、纯化获得纯度很高的低密度脂蛋白，对其进行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测，结果显示低密度脂蛋白主要包含5种脱辅基蛋白。激光拉曼和红外光谱测定，检测出低密度脂蛋白中对称CHz以及不对称CHs的伸缩振动。红外光谱还检测到脂蛋白肽键中C~O伸缩振动、脂链中PO的伸缩报动和磷脂中胆碱聚集体的N*（CH,），的不对称报动。两种光诺分析为研究低密度脂蛋白的结构提供了有效信息。
关键调红外光谱；激光拉曼光谐；低密度脂蛋白；SDS聚内烯酰胺凝胶电泳；C一H伸缩振动
中图分类号：0433.4；Q63
引言
文献标识码：A
DOI; 10. 3964/j. issn. 1000-0593(2010)11-2998-04
分离和柱层析纯化的方法从鸡蛋黄中提取低密度脂蛋白，实验周期短，4C条件下能很好地保持脂蛋白的活性。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术定性检测低密度脂蛋白的纯度，分
低密度脂蛋白的主要功能是把胆固醇运输到肝脏合成胆酸，是体内携带胆固醇最多的脂蛋白。在疾病机理的研究中已发现低密度脂蛋白具有重要的作用例如在动脉中，低密度脂蛋白水平过高容易引起动脉粥样硬化，动脉内膜有大量的低密度脂蛋白堆积物。因此，了解低密度脂蛋白结构对弄清动脉硬化发病机理有重大意义。
卵黄低密度脂蛋白是鸡蛋黄的主要成分之一，约占蛋黄干重的三分之二，含有11%～17%的蛋白质和83%～89% 的脂类，并且含有由脱辅基蛋白、磷脂和未脂化的胆固醇包围的脂核")，密度为0.982g·mL-"，具有水溶性。Hold-sworth等[3]利用电子显微镜和X射线衔射实验发现低密度脂蛋白具有表面镶嵌结构，而这种结构中脂类和蛋白质占据截然不间的区城，彼此紧密联结不发生相互作用。目前，国外有一些学者已开始研究低密度脂蛋白交界膜的性质，如水/空气和油/水交界面吸附蛋白界面张力的变化，蛋白膜在交界面的黏度特性等。然而，由于缺乏对鸡蛋低密度脂蛋白分子结构与功能的认识，研究中不能很好地控制蛋黄的乳化性，使研究工作处于困境。
目前，低密度脂蛋白研究多偏向于脂蛋白的交界膜性质，与其相关的光谱检测文章很少。本实验使用硫酸铵梯度收稿日期：2009-12-26，修订日期：2010-03-28
析其构成成分。电泳图片显示低密度脂蛋白主要由5种脱辅基蛋白组成，这与国外学者研究结果相一致(")，提取的低密度脂蛋白在低温条件下干燥48h，通过对其进行红外和激光拉变光谱检测，以及对特征谱线的分析，得到了低密度脂蛋白的特定功能团，为后期微区结构的研究提供了实验依据。
1材料与方法
试剂与仪器 1.1
NaCl(分析纯)，Tris(fromsigma)，硫酸铵（分析纯），十二烷基硫酸钠(SDS)，N-[三(羟甲基)甲基]甘氨酸(Trince)，丙烯酰胺，甲叉双内烯酰胺，A巯基乙醇，考马斯亮蓝G-250，过硫酸铵为Aldrich产品（超纯）。
原子力显微镜（日本岛津，SPM-9500J3型），高速离心机（日本日立，CF16RX型），精密微量电子天平（美国DEN VER，TB-215D型)，电冰仪(北京六厂，DYY-6C型)，紫外可见分光光度计(北京普析，TU-1810型)，磁力揽拌器（上海浦东物理光学仪器厂），Avatar360E.SP.FTIR傅里叶变换红外光谱仪（尼高力），ALMEGA激光拉曼光谱仪。 1.2实验方法
基金项目：国家自然科学基金项目(20772077)和教育部高等学校博士学科点专项科研基金项目(200807180001)资助
作者简介：薛慧君，女，1983年生，陕西师范大学物理学与信息技术学院硕士研究生
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