第32卷，第9期 2012年9月
光谱学与光谱分析 Spectroscopy and Spectrsl Analysis
Vol.32,No.9,pp2433-2437 September,2012
光镊拉曼光谱法分析红法夫酵母内虾青素含量王雪1，2，孙美娟1，2，刘军贤1，邓洋鸽1，莫玉香1，陶站华2
1.广西师范大学物理科学与技术学院，广西桂林541004 2.广西科学院生物物理实验室，广西南宁530007
摘要建立一种用激光镊子拉曼光谱法快速定量红法夫酵母细胞内虾青素含量的方法。测定不同浓度虾青素标准品溶液的拉曼光谱，取其1520cm-1峰峰高绘制虾青素标准曲线；取不同氮源、碳源的红法夫醇酵母细胞，-部分用激光锻子拉曼光谱法测定，一部分用紫外-可见分光光度法测定；最后分析两者间的相关性。结果表明虾青素标准曲线的相关系数到达0.9983。在单位质量红法夫醇母虾青素含量与单位体积红法夫醇母发酵液虾青素产量方面，对比激光锻子拉曼光谱法与紫外-可见分光光度法，两种方法所得数据具有良好的相关性，其相关系数分别达到0.9177和0.9054，表明激光镊子拉受光谱法能够达到紫外-可见分光光度
法的测定效果，是定量分析红法夫酵母细胞内虾青素的更有效方法。关键调光谱学；激光镊子拉曼光谱；红法夫醇母；虾青素
中图分类号：0657.3；Q93-3
引言
文献标识码：A
虾青素是一种位于红橙色带的类胡萝下素，具有极强的抗氧化性，摄人虾青索有利于减缓衰老，降低某些癌症和心血管疾病的风险，并增强对病毒、细菌、真菌的免疫力，减少寄生虫感染的可能性[1-47。此外，它为一些鸟类，甲壳类，鲑鱼类提供了主要色素[5]，因此，虾青素在制药，食品保健，饲料工业等方面都有广泛需求。
相比子化学合成的虾背素，天然虾青素安全性更高，也更具市场前景。而红法夫酵母能发醇酵多种糖类合成虾青素，且生长速度快、生长条件温和，因此，用红法夫酵母生产虾青素一直受到人们的广泛重视，但红法夫酵母虾青索产量偏低，不能满足工业化生产需求，现今人们已在菌株选育及生长条件优化方面做了大量工作[6,7，为了检测选育和优化效果，势必需要一种快速、高效、灵敏的检测手段。传统的检测方法，如高效液相色谱法、紫外-可见分光光度法都需要先对样品内的虾青素用有机溶剂进行萃取，但因虾青索结构高度不稳定，在提取过程中，有机溶剂、光照、高温都可能引起虾青素结构的变化*)，因此，传统分析方法很难保证结果的准确性与重现性。
收接日期：2012-04-05，修订日期：2012-07-05
DOI; 10. 3964/j. issn. 10000593(2012)09-2433-05
拉变光谱法是一种通过用激发光照射目标物，收集其内部分子对激发光的散射光谱，从而判断目标物内分子结构及含量的方法。与传统的生物检测法相比，拉受光谱法无需样品预处理，简洁，快速，且对样品无损，可实现样品的实时监测。
近年来，拉曼光谱技术已广泛应用于生物领域，如疾病判断(")，微生物鉴定Co)，细胞成像)等方面。传统的共焦显微拉曼光谱法在测定时需要采用物理或化学方法将靶细胞固定，这易使靶细胞失去活性。面结合了光锻技术的激光锻子拉曼光谱法(lasertweezersRamanspectroscopy，LTRS)使为在培养基中分析单个、运动的活体细胞提供了可能。光锻是利用高汇聚的激光束囚禁目标物，以达到在溶液中将其固定的效巢。这一技术使拉要光谱分析的细题更接近其自然生理状况，降低了细胞运动时产生的不确定性，减少了杂光的干扰，提高了信噪比。因此，LTRS已广泛应用于癌细胞12]，弛子[13]，线粒体(14]等生物样品的研究，
研究工作首先测定不同浓度虾青素标准品落滋的拉曼光谱并绘制用于虾青素定量分析的标准曲线，证实拉曼光谱相关特征峰的强度与虾青繁的浓度有良好的线性关系，然后用拉曼光谱法及紫外-可见分光光度法分别测定不同氮源、碳源培养基培养的红法夫酵母细胞所含虾青素，再结合生物
基金项目：国家自然科学基金项目(31060128)，广西自热科学基金项目（桂科回0731013)，广西科学院基本科研业务费项目（11YJ24WL01)
和广西师大博士科研启动基金项目资助
作者简介：王雪，女，1985年生，广西师范大学物理科学与技术学院硕士研究生
*通讯联系人
万方数据
e-mail;xcatx@yahoo.cn
e-mail; taozhanhua163. com; taozhanhuahotmail. com