第31卷，第7期 2011年7月
光谱学与光
谱分析
Spectroscopy and Spectral Analysis
Vol.31,No.7.pp1838-1841
July，2011
荧光光谱法研究羟基自由基诱导的酪氨酸氧化
孙艳辉，王卫龙，吴霖生，贾小丽滁州学院化学与生命科学系，安徽源州
239012
摘要
二酪略氨酸是酪氨酸氧化的标志性产物。为研究影利羟基自由基诱导酪氨酸氧化的因素，采用同步荧光光谱结合二维相关技术研究羟基白由基诱导酪氨酸氧化的反应过程。结果表明：PH变化时，二酪氨酸的荧光峰位、峰强发生变化。在羟基白由基诱导酪氨酸氧化体系中，随着酪氨酸浓度的增加，二酪氨酸产量升高；随着过氧化氨浓度的增加，二酪氮酸产量降低；酸性条件下，该反应易于发生，碱性条件下该反应难以发生；随着反应的进行，二酪氨酸荧光强度先增加后减小。二维同步荧光光谱相关分析表明，292nm处荧光强度的变化快于281，300和374nm处炎光强度的变化。因此，荧光光谱法研究羟基白由基诱导酪氮酸氧化，简单可行。
关键调
荧光光谱；酪氮酸；二酪氮酸；羟基自由基；二维相关光调
中图分类号：0657.3 引言
文献标识码：A
DOI; 10. 3964/j. issn. 1000-0593(2011)07-1838-04
系6
二维相关光谱结合红外分析技术已经广泛用于中药品质控制、化学反应等分析研究(*)，而二维相关光谱在荧光研究
活性氧是由氧点接或间接转变生成的氧自由基及其衍生物，包括：超氧阴离子自由基及脂质自由基和脂质过氧化物等]。活性氧导致含脂食品氧化、人体生理病变[2,)。酪氮酸(tyrosine，Tyr)易被活性氧攻击氧化生成二聚酪氨酸（di-tyrosine，DT)，其含量已作为分析氧化状念的良好指标()。羟基自由基可由Fe+和H:O反应产生，具有很强的氨化性，其氧化能力仅弱于氟。酪氮酸在羟基白由基的作用下发生的氧化反应比较复杂，生成二酪氮酸进面转化为多巴、多巴胺、多巴醒其至三聚酪氮酸等，Feda等采用高效液相色谱、质谱等技术研究了羟基自由基诱导酪氨酸氧化的反应历程。酪氨酸及其产物具有荧光特征，荧光光谱法具有操作简单、灵敏度高和检验参数比较全面的特点。因此，可以采用荧光光谱法研究酪氮酸氧化反应，
二维相关光谱起源于30年前的核磁共振（NMR)领域，
它是通过多脉冲技术激发核白旋，采集时闻域上原子核白施驰豫过程的衰减信号，经双傅里叶变换得到的。其显著的特点是将光谱信号扩展到第二维上以提高光谱分辨率，简化含有许多重叠峰的复杂光谱，通过选择相关的光谱信号鉴别和研究分子内和分子间的相生作用。这种二维相关谱图反映的是一个化学体系内部，各种组成成份或者微观结构单元相应于外界微扰的变化情况，以及这些变化之间相互的联
收日期：2010-08-26，修订日期：2010-12-26
领域的应用较少(%10]
本文中采用荧光光谱法研究羟基白由基诱导的酪氨酸氧化，分别考察酪氨氮酸浓度、过氧化氢浓度、PH值对二酯氨酸产量的影响，并以反应时间为外扰，二维相关同步荧光光谱技术分析了氧化反应进程。该研究为采用荧光光谱法考察酪氨酸氢化提供了有价值的实验数据和理论依据。
实验部分 1.1
仪器和参数设置
采用CaryEclipse荧光分光光度计，VARIAN有限公司。1cm石英比色池，激发狭缝5nm，发射狭缝10nm，扫
捕速度600nm·min~1，间隔0.2nm， 1.2试剂与方法
采用超纯水配制20mmol·L-酪氨酸标准贮备液、 1mmol·L-"硫酸亚铁标准贮备液、20mmol·L-"过氧化氢标准贮备液，避光保存。根据试验需要配制成工作液。
首先分别向100mL容量瓶中加人70mL的超纯水，立即吹氮气10min以驱除溶液中的氧气，分别向其中加人10 mL的酪氮酸工作液和10mL的硫酸亚铁工作液，最后向其中加入10mL的过氧化氢工作溶液，启动反应。37℃温育，
基金项目：国家自然科学基金项日（30901129)和安徽省应用化学重点建设学科基金项目(200802187C)资助
作者简介：孙艳辉，1978年生，滁州学院化学与生命科学系副教授万方数据
e-mail;syh2004@126.com