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普瑞巴林胶囊主药成分定量研究端：
许剑峰陈涛
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（哈药集团三精制药有限公司，黑龙江哈尔滨150000）
摘要：目的：本文参阅多篇国内文缺方法及欧洲药典及印度药典方法，通过对比试验，优选并优化建立普瑞巴林胶景主药成分普瑞巴林的定量方法。方法：HPLC-UV法。色谱柱：固定相为十八统基硅统键硅胶柱（品牌型号AgilentZORBAXSB1=0.25m,O=4.6mm，孔径5μm），柱温：30摄氏度；流动相：有机相为甲醇，水相为3.40g/L的磷酸二氢钾溶液（用氨水调pH值至6.3)，有机相：水相=15:85，等度洗既；进样量：20μl；检测器UV的波长为210nm；流速为1.0ml/min。结果：普瑞巴林胶景主药成分—普瑞巴林的进样量在2.0064μg~ 20.0640μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9998)，高中低9样加样回收率为99.94%，RSD为0.31%；结论：本文建立的高效液相色谱法测定普瑞巴林含量的方法准确度高、重复性较好，可以用于普瑞巴林胶景的定量控制。
关键词：高效液相色谱法；含量测定：普瑞已林胶衰：普瑞已林
普瑞巴林由辉瑞公司原研、生产，并于2004年在英国率先上市销售。普瑞巴林是新一代神经痛治疗药物，钙离子通道调节剂，主要通过调节过度兴奋的神经元，减少过度兴奋性神经递质的释放，是治疗带状疱疹后神经痛等神经病理性疼痛的首选药物，目前已被众多国际指南列为一线药物。其治疗具有快速、高效、持久的特点，并且不良反应少、安全性高。目前主流的普瑞巴林胶囊含量测定方法有UV法、荧光分析法、HPLC-UV法、HPLC-MS法等，本文参阅多篇国内文献方法及欧洲药典及印度药典方法，通过对比试验，优选并优化建立普瑞巴林胶囊主药成分普瑞巴林的定量方法。
1仪器与材料
Agilent1100HPLC色谱仪.十万分之一电子分析天平。普瑞巴林对照品（自制150226，纯度99.7%)。流动相用甲醇为色谱纯，水为去离子水。其余试剂为分析纯。供试样品为辉瑞公司生产的普瑞巴林胶囊。
2方法与结果
21色谱条件：色谱柱：AgilentZORBAXSBC18（250x 4.6mm5μm)；柱温：30℃；流动相：有机相为甲醇，水相为3.40g/L的磷酸二氢钾溶液(用氨水调pH值至6.3),有机相：水相=15:85。进样量： 20μ1，流速：1.0ml/min，波长：210nm
22对照品溶液储备液配制。称取普瑞巴林对照品约50mg，置于 25mL量瓶中，记录精密质量，加人流动相使溶解并稀释至刻度。配置成每1ml含普瑞巴林2mg的对照品溶液储备液，备用。
2.3供试品溶液制备：取普瑞巴林胶囊20粒，内容物研成细粉.精密称取适量(相当于普瑞巴林200mg,置50mL容量瓶之中,加人流动相 35ml超声10分钟使溶解后.继续加人流动相稀释至刻度.摇匀.即得供试品溶液。
24标准曲线制备(线性关系考察)。精密量取普瑞巴林对照品溶液储备液0.5ml，1.0ml.2.0ml,3.0ml.4.0ml5.0ml于10ml溶量瓶之中，分别加流动相稀释至刻度，摇匀，制成0.1,0.2.0.4,0.6,0.8,1.0mg/ml的普瑞巴林对照品溶液。精密量取上述6个对照品溶液，分别注人液相，依照普瑞巴林含量测定色谱条件进行测定，记录液相色谱图，以色谱峰面积A为纵坐标，对照品落液浓度C为横坐标，制备标准曲线（回归方程）为： A=5236.7C+0.8548r=0.9998，试验结果如下：详见表1，
结果表明：普瑞巴林浓度在0.10032~1.00320mg/ml进样：20μ1)，即普瑞巴林进样量在2.0064μg~20.0640μg的范围内线性关系良好。
2.5精密度试验：精密量取上述标准曲线制备项下的0.40128mg/ml 的普瑞巴林对照品游液连续进样6针，记录液相色谱图，以峰面积为考察指标，计算RSD值，结果如表2。
结果表明，连续进0.40128mg/ml的普瑞巴林对照品溶液6针，以峰面积为指标的RSD值为0.75%，小于2%，表明仪器的精密度良好。
2.6重复性试验：按上述2.3供试品溶液制备方法，对一批辉瑞公司生产的普瑞巴林胶囊进行处理（规格75mg)，平行制备6份供品试液，分别进样，记录相关信息，代人标准曲线，计算6个供试品溶液的浓度，计算出每粒中普瑞巴林的含量。结果详见表3。
结果表明：6份普瑞巴林胶囊样品的含量RSD值为0.059%，说明该供试品溶液处理方法重复性好，可靠性高。
2.7普瑞巴林加样回收率试验：取普瑞巴林胶囊20粒,内容物研成细粉精密称取适量（相当于普瑞巴林100mg9份，置9个50mL容量瓶之中，分别加人相应高、中、低量的普瑞巴林对照品，再加人流动相35m 超声10分钟使溶解后，继续加人流动相稀释至刻度，播匀作为供样品
万方数据
度c(mg/ml) 峰面积A 线性方程线性范围
改数面料
找格
0.10032 525
表1线性关系考察结果
0.20064
0.40128
1031
2102
A=5236.7C+0.8548
0.50192
3203
0.80256
4192 ra0.9998
2.0064#20.0640F4
表2普瑞巴林精密度试验结果表
1 2105
含量（mg/粒）
编号欧液度中杭度高液度
50(%, n9)
批号
1
2 2121
2097
4 2083
5 2119
6 2122
表3普瑞巴林重复性试验结果
2
605
75.98
75.11
4 75.09
5 75.16
8 75.13
x 21.08
75.30
表4普瑞巴林加样回收率测定结果
加入件品中要集已量（mg）服服服
加入首期已林对源量(mg)
联股装器
两洋容端巴林总室(mg)
99.94 0.31
国贸超装装商务
1.00320 5238
ASD (%) 0.75
RSDS 59
#锁验品
表5四批样品中普瑞巴林含量测定结果
150727
含量（mg/粒）
75.24
150923 75.33
151223 75.02
99.73 99.95 100.15
150111 75.17
加样回收试验用的供试品溶液。过0.45μm微孔滤膜，分别精密量取上述供试品溶液，注人液相色谱仪，照上述色谱条件检测并记录色谱图，将降面积代人标准曲线分别得出含量，计算加样回收率，结果如表4。
结果表明，普瑞巴林的加样回收率在99.40%~100.39%之间，不同浓度共9份样品加样回收率数据的相对标准偏差为0.31%；误差在允许的范围内，回收率较好，该方法准确、可靠。
2.8四批市售普瑞巴林胶囊含量测定。采用高效液相色谱法对市售辉瑞公司生产的四批普瑞巴林胶囊样品进行测定，测定结果见表5。
结果表明：四批样品均符合含量范围98%~102%，产品合格。 3讨论
本文参阅多篇国内文献方法及欧洲药典及印度药典方法，通过对比试验，优选并优化建立普瑞巴林胶囊主药成分普瑞巴林的定量方法。试验中发现综合采用欧洲药典关于普瑞巴林有关物质的色谱条件及印度药典普瑞巴林胶囊含量测定供试品落液处理方法形成本文的检测方法重复性好，准确度高，明显优于国内文献的方法。
参考文献
[1]欧洲药典论坛Phameuropa 26.3,August 2014,298.[2FP度药典IP2010,PREGABALINCAPSULES，1961