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中药玄参中哈巴俄苷和肉桂酸的高效液相色谱法测定
孙海飞
(哈尔滨怡康药业有公司，黑龙江哈尔滨150000)
摘要：本文采用高校液相测定了玄参中肉桂酸和哈巴俄苷的含量，固定相为：安捷伦Cl8(4.6mm×250mm，5um)，以0.03%磷酸溶液和乙睛梯度洗脱为流动相，检测波长为210mm;哈巴俄苷在5~250μg*mL范图内呈良好的线性关系；肉桂酸在10~320μg*mL范图内呈良好的线性关系。哈巴俄苷和肉桂酸的平均回收率分列为99.8%、99.7%,RSD为0.63%(n=6)、0.61%(n=6);此方法简便、准确、重现性好，可用于玄参中哈巴俄苷和肉桂酸的含量测定。
关键词：玄参；哈巴俄苷；肉桂酸
玄参别名为元参、浙玄参、黑参、乌元参重台、正马、黑参、野脂麻等，为双子叶植物玄参科Scrophulariaceae玄参Scrophularia ningpoensisHemsl.的干燥根。玄参具有清热凉血、泻火解毒、滋阴等功效-。玄参常用于热病伤阴、舌绛烦满、骨蒸劳嗽、目赤、咽痛、津伤便秘、察病、白喉等+。《本草正》记载：“玄参，此物味苦而甘，苦能清火，甘能滋阴，以其味甘，故降性亦缓。“本文采用高校液相测定了玄参中肉桂酸和哈巴俄苷的含量。
1仪器与试药
STI-501Plus梯度高效液相色谱仪（赛智科技（杭州）有限公司）：必能信超声波清洗器-CPX2800-C(必能信超声（上海）有限公束扫描型紫外可见分光光度计（上海美谱达仪器有限公司）：日本岛津AUW220电子天平、分析天平（福州精科仪器仪表有限公司)：0-rionStarA便携式高端pH测量仪（赛默飞世尔科技水质分析仪器);RT2加热制冷循环器(作沃技术(中国)有限公可);SHB-(I)循环水式真空泵(上海楚柏实验室设备有限公司)。哈巴假者和肉桂酸对照品由中国药品生物制品检定所提供。乙睛（上海杰星生物科技有限公司）、三乙胺（上海业坦化工科技有限公司）、甲醇（上海杰星生物科技有限公司）、四氢呋响（上海业坦化工科技有限公司）、十二烷基硫酸钠(台州市椒江阳春化工有限公司)、磷酸二氢钠(衢州瑞尔丰化工有限公司）、醋酸钠天津赛孚瑞有限公司）、磷酸（台州市椒江阳春化工有限公司）。
2含量测定
21色谱条件：依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下。色谱柱为安捷伦Cl8规格为(4.6mm×250mm,5μm)；以乙腊为流动相A，以0.03%磷酸溶液为流动相B，按下表进行梯度洗脱，检测波长为210；流速1.0mL+min*；柱温：30℃。理论板数按肉桂酸峰计算应不得低于2000(表1)。
2.2供试品溶液的制备
取玄参适量，粉碎，精密称取，置50mL量瓶中，加50%甲醇适量.冷浸10小时，超声处理50分钟.放置至室温，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。
2.3对照品溶液的制备
时间（分钟）
oo 10-20 20-25 2530 3086 35e7
表1
流动相A(%）
310 103 33 50 50--80 8 8-3
流动相B（%
9790 9067 6750 50-20 20 2097
法制备供试品，按质量标准含量测定项下方法测定含量，并计算样品的RSD值，RSD值为0.63%，0.55%，结果表明.此含量测定方法的重现性良好。
2.7稳定性试验
依照2.3项下供试品制备方法制备供试品溶液，分别在 0，2.4，8小时进样测定，供试品哈巴俄昔和肉桂酸峰面积的RSD分别为0.62%和0.69%。结果表明哈巴俄苷和肉桂酸至少在8小时内稳定。
2.8回收率试验
采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，分精密添加一定量的哈巴俄苷和肉桂酸对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶液.测定含量.计算回收率。6次测定的平均回收率分别为99.8%和99.7%，RSD分别为0.63%和0.61%。
2.9样品含量测定
依照上述含量测定方法，测定玄参中哈巴俄苷和肉桂酸的含结果结果三批样品的哈巴俄苷和肉桂酸总含量为0.46%、
量：
0.51%,0.52%
3讨论
分别考察乙腈-0.05%磷酸二氢钠-0.05%十二烷基硫酸钠-三乙胺-磷酸（50:20:30:0.01:0.01），甲醇-乙-pH6.5磷酸盐缓冲液(20：20：60),0.067mol·L-磷酸二氢铵溶液-乙晴-三乙胺(60： 40:0.02)，甲醇-水(70:30)，乙腈-1%冰醋酸溶液(20：80)甲醇0. 08%磷酸溶液（25:75），乙脂-0.05%磷酸二氢钠-0.05%十二烷基硫酸钠-磷酸（40:30:30:0.01），以0.03%磷酸溶液和乙睛梯度洗脱为流动相，结果以以0.03%磷酸溶渡和乙睛梯度洗脱为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用以0.03%磷酸溶液和乙睛梯度洗脱为
分别精密称取肉桂酸和哈巴俄苷对照品6mg、2mg，置100mL
流动相。
容量瓶中，用50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
2.4标准曲线的制备
制备浓度为5μg*mL-",50μg*mL-",100 μg*mL-"、150μg*mL-"、 200μg*mL-"250μg*mL-的哈巴俄苷对照品溶波，制备浓度为",-Tu, 8 rlo91',-TU, lo8,-TU, 8 rlot",-Tu, 8 rloz",-Tu, 8loT 320μg"mL-的肉桂酸对照品溶液。分别按哈巴俄苷、肉桂酸的测定参数继续测定。以吸光度为横坐标，浓度为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，哈巴俄首在5-250μg*ml-范围内呈良好的线性关系；肉桂酸在10-320μg*mL*范围内呈良好的线性关系。
2.5精密度试验
依照2.3项下制备对照品溶液，分别精密吸取哈巴俄昔和肉桂酸对照品溶液重复测定6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD分别为0.68%和0.53%。结果表明，本实验精密度良好。
2.6重现性试验
分别称取同批玄参样品6份.分别依照2.3项下供试品制备方
参考文献
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