科技论坛
紫外－可见分光光度法测定增食口服液中总黄酮的含量
用
姚会敏秦雅英孟凤梅
（哈药集团三精制药有限公司，黑龙江哈尔滨150000）
要：日的：建立增食口服液中总黄酮的含量测定方法。方法：利用蒙外-可见分充光度法测定总黄酮的含量。结果：在8.14296μg" 摘
mL-"-48.85776μg*mL浓度范图内芦丁的峰面积和浓度具有良好的线性关承，R=0.9993；平均回收率为98.68%，RSD=0.57%（n=9)。结论：本方法准确、可靠、重复性好，造用于增食口服液的质量控制。
关键词：增食口服液：总黄酮；崇外-可见分光光度法
Abstract: Objective:To establish an assay of detemination of Total Flavonoids in Zengshi Oral Solution by UV spectrophotometry Method: The Content of Total Flavonoids was detemined by UV spectrophotometry.Results:The standard curve was in good linearity in the range of 8.14296μg*mL48.85776μg*mL- ,R=0.9993 for determination of its related substances.The average recovery rate was 98.68% with RSD of 0.57%.Conclusion: The method is aceurate, reliable and reproducible. The method can be used for the quality control of Zengshi Oral Solution.
Key words:Zengshi Oral Solution;Total Flavonoids; UV spectrophotometry
1仪器与试药
紫外-可见分光光度计:VARIANCARY 100
亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、乙醇（分析纯)。
蒸馏水。
芦丁对照品(中国药品生物制品检定所)。
增食口服波(自制)。 2方法与结果
2.1标准曲线的制备"。精密称取芦丁对照品25mg，置50mL量瓶中，加乙醇适量，超声处理使溶解，放冷，加乙醇至刻度，摇匀。精密量取20mL，置50mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得（每1mL中含无水芦丁0.2mg)。精密量取芦丁对照品溶液（0.2mg/mL)1、2.3、4.5.6mL（相当于无水芦丁200，400，600，800，1000、 1200μg），分别置25mL量瓶中，各加水至 6mL，加5%业硝酸钠落液1mL，摇匀，放置6分钟，加10%硝酸铝溶液1mL，摇匀，放置6分
编号浓度（H/mL）吸光度（A）
编号低中高
平均回收率(%） RSD%P9)
1 8.14296 0.0979
样品中总黄酶的含量（g）
4.36.90 4.36.90 4.36.90 4.36.90 4.36.90 4.36.90 4.36.90 436.90 4.36.90
钟，加氢氧化钠试液10mL，再加水至刻度，摇
勾，放置15分钟，以相应试剂为空白，立即照紫外-可见分光光度法，在510mm的波长处测定吸光度，以浓度(μg/mL)为横坐标，吸光度(A)为纵坐标，绘制标准曲线，
2.2品处理。精密量取本品1mL，置25mL量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自"加水至6mL"起依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的浓度(μg/mL)，计算即得。
2.3线性关系考察。照标准曲线的制备方法，以浓度(μg/mL)为横坐标，吸光度(A)为纵尘标，对芦丁进行线性回归，结果见表1。
回归方程为：A=0.01322C-0.01950
R=0.9993
结果表明，芦丁在8.14296μg/mL~48.85776μg/mL浓度范围内线性关系良好
2.4精密度试验。取线性试验项下的对照品溶液，在510mm的波长处测定吸光度，重复测定6次，吸光度的RSD为0.03%，小于 2%，精密度良好。
2.5重复性试验。取同一批次样品，按供试品溶液制备方法配制 6份相同浓度的供试品溶液，在510nm的波长处测定吸光度，测得平均含量为87.38mg/100ml，RSD为0.38%，小于2%，重复性良好。
2.6回收率试验。精密称取芦丁对照品25mg，置50mL量瓶中，加乙醇适量，超声处理使溶解，放冷，加乙醇至刻度，摇匀。精密量取 20mL，置50mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，作为对照品储备液（每 1mL中含无水芦丁0.2mg)。分别精密量取上述对照品储备液 1.65ml,2.10ml,2.60ml（分别相当于0.5ml样品中总黄酮含量的 80%、100%、120%）各3份，分别置25mL量瓶中，再分别加人样品
表1线性关系测定结果
2 16.28592 0.1930
3 24.42888 0-2955
4 32.57184 0-4040
表2回收率测定结果
加入耐照品的量(rg）
35.90 335.90 335.90 427.51 427.51 427.51 529.29 529.29 529.29
测得总黄酮的总量（g）
768.21 767.95 768.22 85074 86394 8909 957.15 95619 95601 98.68 0.57
5 40.71480 05182
回收率(%)
98.63 9856 9864 99.34 99.89 98.76 98.29 98.11 98.08
6 48.85776 06345
均值(%)
98.61 99.26
98.16
0.5ml置上述25ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自"加水至 6mL"起依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的浓度(μg/mL),计算回收率,结果见表2。
结果表明，芦丁的回收率在98～102%之间，9个回收率数据的相对标准偏差小于2%，该方法准确可靠。
2.7稳定性试验。取同一供试品溶液，分别于0,5、10、15,20分钟在510mm的波长处测定吸光度1次，考察样品溶液稳定性。吸光度的RSD为0.95%，小于2%，样品落微在20分钟内稳定，
2.8结论。通过方法学验证，结果表明该方法精密度、准确度高，线性关系良好，能满足含量测定的要求。
3讨论
3.1放置时间的选择。对各步反应的放置时间"进行了考察，结果表明方法中放置时间最佳。
对亚硝酸钠溶液
3.2亚硝酸钠溶液、硝酸铝溶液浓度的选择。
硝酸铝溶液浓度进行了考察，结果表明方法中浓度最佳。
参考文献
[1]中华人民共和国药典(一部)[M].北京：化学工业出版社,2010:372-373.
[2]林淋,邹期,曲中原等.虎眼万年青总黄酮的提取及含量测定[]黑龙江医药,2014,27(4):731733
[3]候江雁,李彦冰.蓝载果果实中总黄酮的含量测定[].黑龙江医药 2001.14(4):252.