
NY/T 911-2020 代替NY/T911-204
饲料添加剂β-葡聚糖酶活力的测定分光光度法
Determination of β-glucanase activity in feed additives—Spectrophotometry
2021-04-01 实施
2020-11-12发布
5.7 β葡聚糖溶液(8.0mg/mL.》;称取β倘聚糖(PSEA}《含量≥95%)0.40 g(精确至0.a01 g),加乙醇(5.2)5.DmL,湿润β葡聚赔,再加乙酸乙酸钠缓冲溶液(5.5>10mL做力搅拌.同时缓缓加热,直至β葡聚糖完全溶解.停止加热.附续搅排至冷却,用乙酸乙酸钠缓冲溶液(5.5)定至50 mL捕匀。0℃—4℃避光密闭保存或一18℃密团保存,有效期为2个月。临用前37℃水溶中平衡 20 min。
5.8 葡萄糖标准储备剂液(10.0 mg/mL>;称取无水葡萄糖对照品约 0.5g(CAS号;50997,含量≥9.5%>(精确至0.001p.置50 ml.容量瓶中,加乙酸乙酸钠缓冲济液(5.5)溶解并定容至刻度,摇匀。o℃~4℃密闭保存,有效期为3个月。
5.9 标准系列溶液;准确量取适量标准储备溶液(5.8)于100 ml.容量瓶中,用乙酸-乙酸钠缓冲溶液(5.5)稀释定溶配成系列标准液,浓度分别为0mg/mL、0.1 mg/mL,0.2 mg/ml公.3 mg/mLD.4 mg/ml,0.5 mg/mL、0.6 mg/rmL.0.7 mg/ml
6 仪福设备
6.1 分光光度计。
6.2天平∶感量 0.001 g和0.0001g。
6.3 离心机∶转速不低于3 00 r/min。
6.4 pHI 计∶精确至0.01。
6.5 电热恒温干燥箱;(103±2)℃。
6.6 避力搅拌器;附加热功能。
6.7 恒温水浴钢;精确至±0.1℃。
6.8 讽旋混合器。
6.9 振满仪。
7样品
按照GB/T20195制备样品.粉碎使其全部通0.42 mm孔径的分析筛,充分混匀,装入磨口瓶中,密闭保存,备用。
8 试验步骤
8.1 试样溶液制备
8.1.1 固体样品
平行做2份试验。按照附录A中建议的取样量,称取试样适量(精确至0.0001 g>,置于150 ml.具塞锥形瓶中,加入乙酸乙酸钠缓冲溶液(5.5》40 mL,磁力搅拌或振荡30 min,转移至 100 ml.容量瓶中,用乙酸乙酸钠缓冲溶液(5.5)定容至刻度,播匀。在a℃~4℃条件下避光放置不少于1h,,摇匀,于3000 r/min离心3min,取上清液适量,用乙酸-乙酸钠缓冲溶液(5.5)稀释,若稀释后侧液的pH偏离5.5,先用乙酸溶液《5.3)或乙酸钠溶液(5.4)调节 pH至5.5,再用乙酸-乙酸钠缓冲溶液《5.5)稀释定容,使得待测酶溶液浓度为0.D4UJ/mL.~0. 08 U/ml。
8.1.2 液体样品
平行做2份试验。按照附录A中建议的取样量,精密移取试样适量,置于100 mL.容量瓶中,用乙酸-乙酸钠缓冲溶液(5.5)定容至刻度,捆匀。用乙酸-乙酸销缓冲溶液(5.5)稀释,若稀释后酶液的 pH 偏离5.5.先用乙酸溶液(5.3)或乙酸钠溶液《5.4)调节 pH至5.5,再用乙酸乙酸钠缓冲溶液(5.5)稀释定容,使待测酶溶液浓度为0.04 U/mL~~0.08 U/rml。
8.2 测定步骤