ICS 13.300;13.020.40
CCS A 80
侣
中华人民共和国国家标准
GB/T 42367—2023
化学品 原生动物活性污泥抑制试验
Chemicals—Protozoan activated sludge inhibition test
2023-03-17发布
2023-10-01实施
国家市场监督管理总局
发布国家标准化管理委员会
GB/T 42367—2023
目次
前言 ………………………………………………………………………………………………………………Ⅲ
引言 ………………………………………………………………………………………………………………………IV
1 范围 …………………………………………………………………………………………………………………1
2 规范性引用文件 …………………………………………………………………………………………1
3 术语和定义 ………………………………………………………………………………………………………1
4 试验原理 ……………………………………………………………………………………………………2
5 受试物信息 ……………………………………………………………………………………………………2
6 参比物 ……………………………………………………………………………………………………………2
7 试验准备 …………………………………………………………………………………………………2
8 试验程序 …………………………………………………………………………………………………………4
9 质量保证与质量控制 …………………………………………………………………………………………5
10 数据处理………………………………………………………………………………………………………5
11 报告…………………………………………………………………………………………………………7
附录 A(资料性) 试验用水 …………………………………………………………………………………8
附录B(资料性)底物……………………………………………………………………………………10
附录C(资料性) 洋地黄皂苷溶液…………………………………………………………………………11
附录D(资料性) 浓度-效应曲线 …………………………………………………………………………12
参考文献 …………………………………………………………………………………………………………13
GB/T 42367—2023
化学品 原生动物活性污泥抑制试验
1 范围
本文件描述了化学品原生动物活性污泥抑制试验的试验原理、受试物信息、参比物、试验准备、试验程序、质量保证与质量控制、数据处理、报告。
本文件适用于化学品的原生动物活性污泥抑制试验。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 21801 化学品 快速生物降解性 呼吸计量法试验GB/T 21802 化学品 快速生物降解性 改进的MITI试验(I)GB/T 21803 化学品 快速生物降解性 DOC消减试验GB/T 21831 化学品 快速生物降解性 密闭瓶法试验GB/T 21845 化学品 水溶解度试验
GB/T 21852 化学品 分配系数(正辛醇-水) 高效液相色谱法试验GB/T 21853 化学品 分配系数(正辛醇-水) 摇瓶法试验GB/T 21856 化学品 快速生物降解性 二氧化碳产生试验GB/T 21857化学品 快速生物降解性 改进的OECD筛选试验
GB/T 22228 工业用化学品 固体及液体的蒸气压在10-¹Pa至10⁵Pa范围内的测定 静态法GB/T 22229 工业用化学品 固体及液体的蒸气压在10-3Pa至1Pa范围内的测定 蒸气压平衡法
GB/T 27850 化学品 快速生物降解性 通则
EN 15934 污泥、处理过的生物废弃物、土壤和废弃物 通过测定干物质含量或水分计算干物质质量分数(Sluge,treated biowaste, soil and waste—Calculation of dry matter fraction after determina-tion of dry residue or water content)
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
x%效应浓度x% effective concentration;EC在给定测试周期内，与对照组相比，导致活性污泥吞噬活性降低x%时的受试物浓度。
3.2
无可观察效应浓度 no observed effect concentration;NOEC
在给定测试周期内，与对照组相比，在统计学意义上对试验组未产生显著效应(p≥0.05)的最高受试物浓度。
4 试验原理
4.1 本方法用于评估特定条件下不同浓度的化学物质对活性污泥吞噬作用(即分散细菌的消耗)的影响，适用于可溶于水、难溶于水和挥发性的受试物。对于水溶解度有限的受试物，可能无法得到ECso值。对于挥发性的受试物，尽管试验过程中使用密闭的试验容器，但仅当暴露期结束时仍有大于80%的受试物留存在反应体系中时，试验结果才是有效的。难测试化学物质的试验见参考文献。
4.2 采用2mL培养体积的玻璃试验瓶，将活性污泥样品暴露于受试物。试验瓶用氧渗透型瓶盖密封后置于22℃±1℃振荡22h。试验开始时，污泥样品中的原生动物以悬浮细菌为食，导致对照组中细菌浊度降低，但受到化学抑制的试验组中细菌未被消除。为了量化原生动物的吞噬活性，分别在培养2h(t₁)和22 h(t₂)测定光密度(λ=440 nm),以获得所添加细菌随时间的减少量。基于两个光密度值的差异，计算与未经处理的对照组相比吞噬活性减少的百分比。本试验通常用于确定受试物的EC,(如
EC)。为补偿添加的细菌底物与污泥絮体之间的非特异性反应(如结合作用)或受试物对污泥样品浊度的影响(如解聚作用),空白对照组和每个浓度的试验组中都应包括去除原生动物(因而无吞噬作用)的污泥平行样品。
5 受试物信息
试验前，应掌握下列受试物信息：
a) 结构式；
b) 纯度；
c) 按照GB/T 21852和GB/T 21853测定的正辛醇-水分配系数；
d) 按照GB/T 21801、GB/T 21802、GB/T 21803、GB/T 21831、GB/T 27850、GB/T 21856和GB/T 21857测定的快速生物降解性；
e) 按照GB/T 21845测定的水中溶解度，尤其是受试物在试验条件下的水溶解度；
f) 按照GB/T 22228和GB/T22229测定的蒸气压；水溶解度和蒸气压可用于计算亨利常数，以表征受试物的挥发性；
g)受试物在试验溶液中的定量分析方法。
6 参比物
参比物测试作为一种技术手段，用于验证试验条件是否符合要求。3,5-二氯苯酚对活性污泥吞噬作用抑制的ECso在1.5 mg/L～5.1mg/L范围内。由于EC值可能因试验所用的污泥不同而具有显著差异，上述ECso值范围仅供参考，并非满足试验有效性的必要条件。参比物的试验结果应在测试报告中注明。
7 试验准备
7.1 试验设备
常规设备包括：
a) 透明玻璃螺口瓶，45mm×15mm(外观尺寸),体积4 mL;
b) 开孔盖(开孔螺纹盖),特氟龙表面、硅胶衬垫；
c) 转速可调至250 r/min的旋转振荡器，其支架可使试验瓶呈倾斜状，与水平面呈20°～40°