ICS13.300;13.020.40 A 80
-
电
中华人民共和国国家标准
GB/T27860—2011
化学品 高效液相色谱法估算士壤和
污泥的吸附系数
Chemicals-Estimation of the adsorption coefficient (K) on soil and on sewage sludge using high performance liquid chromatography (HPLC)
2012-08-01实施
2011-12-30 发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
发布 GB/T27860—2011
前言
本标准按照GB/T1.1一2009的规则起草。 本标准与经济合作与发展组织（(OECD)化学品测试导则NO.121(2001年）《高效液相色谱法 估
算土壤和污泥中吸附系数》（英文版)技术内容相同。
本标准做了下列结构和编辑性修改：
将适用的化学物质示例由正文移人附录B中；一一计量单位改为我国法定计量单位；一为与现有标准系列一致，将标准名称改为《化学品高效液相色谱法估算土壤和污泥的吸附
-
系数》。 本标准由全国危险化学品管理标准化技术委员会（(SAC/TC251)提出并归口。 本标准起草单位：环境保护部化学品登记中心、沈阳化工研究院安全评价中心、上海市检测中心。 本标准主要起草人：周红、刘纯新、张鑫、侯松嵋、李莹、刘敏、邓芸芸、周林军。
I GB/T27860-2011
化学品高效液相色谱法估算土壤和
污泥的吸附系数
1范围
本标准规定了高效液相色谱法（HPLC)估算化学品在土壤和污泥中吸附系数的术语和定义、受试
物信息、方法概述、试验准备、试验、质量控制、数据与报告。
本标准适用于试验期间化学性质稳定的物质，尤其适用于难以用其他方法测试的物质，如：挥发性物质、由于水溶性差而无法分析检测其浓度的物质、对吸附试验器血具有强亲和性的化学物质，也适用于含有不能完全分离洗脱带的混合物体系（测试混合物的1gK。应给出其上下限）。
本标准适用的吸附系数（1gK。）范围为1.5～5.0。 本标准不适用于可与高效液相色谱固定相或流动相发生反应的物质、可与某些无机物以特殊方式
发生作用的物质（如，与粘土矿物质基础形成络合物）和表面活性剂、无机物、中强酸和碱。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T21851化学品批平衡法检测吸附/解吸附试验 GB/T21852化学品分配系数（正辛醇-水）高效液相色谱法试验
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3. 1
分配系数Kpartitioncoefficient 平衡状态下，化学物质在吸附剂（土壤或污泥)与水相之间的浓度之比。两相浓度均以质量浓度表
示时，K。无量纲；若水相浓度以质量/体积方式表示，则Ka的单位为毫升每克（mL/g）。K。值随吸附剂的性质不同而不同，并与吸附剂的浓度有关。见式（1)：
或
Ka= C水”
产
(1)
C水
式中： Ka 分配系数，无量纲或单位为毫升每克（mL/g）； C±一——平衡时土壤中受试物浓度，单位为微克每克（μg/g)； C污魂——平衡时污泥中受试物浓度，单位为微克每克（μg/g)； C水一—平衡时水相中受试物浓度，单位为微克每克(μg/g)或微克每毫升（μg/mL)。
3.2
弗罗因德利希吸附系数K，Freundlichadsorptioncoefficient 化学物质在水相中的平衡浓度为1μg/mL时，化学物质在吸附剂（土壤或污泥）（/m）中的浓度。
K：值随吸附剂的性质不同而不同。
1 GB/T27860--2011
对于大多数分子型化学物质，在土壤或污泥与水的两相系统中的吸附规律，遵循弗罗因德利希方程。见式（2）：
Ig＝=lgKt +1· gC*
2)
式中： K: -弗罗因德利希吸附系数： x/m- 平衡时吸附剂m吸附受试物的量，单位为微克每克（μg/g)； 1/n 吸附等温线斜率； C水
平衡时受试物在水相中的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）。
当水相中的平衡浓度C水为1μg/mL时，见式（3）：
IgK= g二
(3)
m
3.3
吸附系数Kadsorption coefficient 通过吸附剂（土壤或污泥)中有机碳含量对化学物质的分配系数（K。）或弗罗因德利希吸附系数
(K,)进行归一化而得到，使不同的化学物质之间具有可比性，尤其适用于非离子化物质。由于K。与 Kr的单位不同，K。可以是无量纲常数，也可以具有计量单位毫升每克（mL/g)或微克每克（μg/g）。K。 与Ka并不总呈线性关系。K。值随土壤的不同而有差异，但相对K。和K：而言，其差异明显减小。见式(4)：
会或
K=
(4)
fo fae
式中： Ko 吸附系数，无量纲，或单位为毫升每克（mL/g)或微克每克（μg/g）； K.- 分配系数，无量纲，或单位为毫升每克（mL/g）； K - 弗罗因德利希吸附系数； fo- 有机碳含量。
3. 4
容量因子 capacityfactor 分配平衡时，组分在固定相中的质量与在流动相中的质量比值。实际测试时，常根据化学物质的保
留时间计算而得。见式（5）：
_ tR-te
*(5)
to
式中： k"—.容量因子； tR 保留时间，单位为分（min）；
-死时间，单位为分（min）。
to
3. 5
正辛醇-水分配系数Ppartitioncoefficientofn-octanol-—water 平衡状态下，化学物质在正辛醇与水相之间的浓度之比，无量纲。见式（6）：
C正辛业 (= K。w)
（6)
P.
C
式中： Pow,K.w -正辛醇-水分配系数； C正幸停
-
平衡时受试物在正辛醇中的浓度，单位为微克每克（ug/g）或微克每毫升（μg/mL）；
2 GB/T27860—2011
C水—一平衡时受试物在水相中的浓度，单位为微克每克（μg/g)或微克每毫升（μg/mL）。
4受试物信息
受试物信息包括： a）分子式和结构式； b）纯度； c) 电离常数； d) 水、有机溶剂中溶解度； e) 正辛醇-水分配系数； f) 水解性。
5方法概述
5.1方法说明
K.c可通过它与化学物质的水溶性和正辛醇-水分配系数的相关性估算[2~5.8~9,13]。本方法用高效液相色谱(HPLC)法估算化学物质在土壤和污泥中的吸附系数K。10)。与定量构效关系方法(QSAR)相比，本方法具有更高的可靠性。但作为一种估算方法，本方法不能完全代替批平衡试验方法 (GB/T21851)。 5.2方法原理
HPLC采用含亲脂和极性基团的商业化氰基硅胶分析柱，该固定相具有中等极性，其硅胶表面键合相如下：
-0-Si —CHz-CH2—CH， -CN
非极性区
极性区
硅胶
:
当化学物质随流动相进入色谱柱，在流动相和固定相之间进行分配而被保留。由于氰基硅胶分析柱的固定相同时含有极性和非极性两种基团，可相应地与化学物质的极性和非极性基团发生作用。这与化学物质在土壤和污泥上的吸附具有相似之处。由此，建立化学物质液相色谱保留时间与吸附系数之间的关系。
pH值对物质，尤其是极性物质的吸附行为有非常重要的影响。农业土壤和污水处理池的pH值一般在5.5~7.5之间。对于pH值为5.5～7.5时电离度不小于10%的离子化合物，要求通过适当的缓冲溶液体系，分别测试受试物处于离子状态与非离子状态下的K。
本标准仅利用化学物质在HPLC柱上的保留时间与吸附系数之间的关系来测定受试物的吸附系数，不涉及定量分析方法，只需测定受试物的保留时间。采用一系列合适的参比物，在标准试验条件下进行测定，因此，可以提供一种快速、有效的估算受试物吸附系数K。的方法。 5.3参比物
通过HPLC保留时间数据来测定受试物的吸附系数K。c，首先应建立lgK与lgk之间的拟合校准曲线。选择参比物时应注意校准曲线至少由6个点拟合而成，其中大于和小于受试物K。值的各至少一个。
同时，应注意试验结果的准确性与参比物的选择有重要关系，因此，尽量选择与受试物结构相似的
3 GB/T27860—2011
参比物。
若此类信息不足，可选择适当的校准物质。通常选择同系物进行校准。附录A中表A.1和表A，3 分别给出了一些物质在土壤和污泥中的K。，可以用来作为校准物质。如有正当理由，也可选择其他校准物质。 5.4方法的准确性和有效性说明
一般情况下，用本方法估算的吸附系数与用批平衡法测得的吸附系数差异在士0.51gK。（参见附录 A中的表A.1）。如果选择结构与受试物结构非常相似的参比物，可以获得更高的准确性，
对48种物质（大部分是农药）的研究验证，用本方法估算的吸附系数与用批平衡法测得的吸附系数的相关系数R=0.95C1,11。
11个实验室之间的比对，进一步验证了本方法的有效性（参见附录A中的表A.2)(12]。 已证实本方法对列人附录A的表A.1中的物质是有效的，本方法也适用于列人附录B的物质。
6试验准备
6.1仪器设备
高效液相色谱仪，应配有无脉冲泵、适当的检测器、带有定量环的进样阀、硅胶键合氰基色谱柱。 相同固定相的保护柱置于进样系统与分析柱之间。色谱柱的一般选择原则为采用甲醇：水为
55：45的流动相。对lgK。=3.0的物质，其在色谱柱上的容量因子1gk>0.0；对1gK。=2.0的物质其在色谱柱上的容量因子1gk>一0.4。 6.2流动相
推荐使用以下两种流动相：
甲醇/水（55：45，体积比） —-甲醇/0.01M柠檬酸盐缓冲溶液pH6.0(55：45，体积比）用HPLC级甲醇、二次蒸馏水（或超纯水)或柠檬酸盐缓冲溶液配制洗脱液，使用之前需脱气处理。
采用等度洗脱方法。如果甲醇/水混合体系流动相不合适，可尝试其他有机溶剂/水混合体系，如：乙醇/ 水，乙腈/水混合体系。
对于离子型物质，建议使用缓冲盐溶液获得稳定的pH。但使用有机溶剂/缓冲盐溶液混合体系时，应避免盐析和色谱柱柱效的降低。
离子对试剂会影响固定相的吸附性质，使固定相发生不可逆的改变，因此，禁止使用含该类添加剂的流动相。若确使用添加剂，建议使用单独的色谱柱进行试验。
7试验
7.1溶质
受试物和参比物都应用流动相配制。 7.2温度条件
测试过程中记录实验室温度，建议使用恒温箱以确保校准、估算和测试过程中温度恒定。
7.3确定死时间t。
有两种方法可以确定HPLC死时间to。
4 GB/T27860-2011
一种是通过同系物测定。见化学品分配系数（正辛醇-水）高效液相色谱法试验（GB/T21852）[7。 另一种是通过不被色谱柱保留的惰性物质（如甲酰胺、硫脲或硝酸钠）测定。测定时至少重复进样
两次。 7.4确定保留时间
只要确认每种参比物的保留时间不受其他参比物的影响，可直接混合物进样，测定各参比物的保留
时间。各参比物的保留时间每天至少应在一定的时间间隔内校准两次，确保色谱柱性能稳定，未发生改变。如，在受试物进样前后分别进参比物，确保前后的保留时间没有发生飘移。受试物应单独进样，记录保留时间；进样尽可能少，避免色谱柱过载。
8质量控制
至少平行测定2次，两次平行测定之间的差异不大于0.251gKc。
9数据与报告
9.1数据处理
根据式（5），由死时间t和保留时间很，分别计算各参比物和受试物的容量因子。 根据参比物的IgK。（用批平衡法测得）与lgk'（参见附录A中的表A.1），建立校准曲线，校准曲线至少由6个点拟合而成，其中大于和小于受试物K。值的各至少个。 通过该校准曲线，由受试物的lgk值计算受试物的lgK值。 方法的准确性与参比物的选择有重要的关系，因此，尽量选择与受试物结构相似的参比物。如果此
类数据信息不足，也可选择结构不同的物质进行校准。 9.2试验报告
报告应包括以下内容：
受试物和参比物的名称、纯度，如果相关，应给出pK。值；一描述实验仪器和操作条件，如：分析柱和保护柱类型和规格、检测方式、流动相（包括组成比例和pH值）、测试过程的温度范围；
死时间及其测定方法；一受试物和参比物的进样量；一用于校准的参比物的保留时间；
-lgk'与1gK。的拟合回归线和曲线图；受试物的平均保留时间和1gK的估算；
一
一色谱图。
e GB/T 27860—2011
附 #录A （资料性附录）
不同方法获得的相关化学物质的K。值
不同方法获得的土壤和污泥K。值的比较见表A.1。
A.1
表A.1 不同方法获得的土壤和污泥K。值的比较1>,2)
污 泥 IgKo
土 壤
CAS
物 质
IgKo
4 (批平衡法) IgKo 0. 48
IgKoc HPLC法 2. 20 2. 89 3, 40 2. 26 3. 52 2. 94 1. 25 1, 66 1. 69 1. 64 2. 58
4
（批平衡法） (HPLC法)
1912-24-9 1.66 330-55-2
2.14 2.96 3.58 2. 21 3. 72 3. 03 1. 00 1. 49 1.53 1. 47 2.59
1. 81 2. 59 3. 31 1. 99 4. 09 2. 87 1. 26 1, 93 1.26 2. 07 2. 55
阿特拉津利谷隆倍硫磷灭草隆菲苯甲酸苯酯苯甲酰胺 4-硝基苯甲酰胺乙酰苯胺
0. 39 0. 30 0. 09 0. 27 0. 57 0. 07 0. 01 0. 27 0. 08 0. 43 0. 03
2. 43 3.75 1. 46 4. 35 3. 26 1. 60 1. 52 1.52 1.74 2. 45
0. 53 0. 17 0. 75 0. 63 0. 23 0.60 0. 03 0. 01 0. 27 0.14
55-38-9 150-68-5 85-01-8 93-99-2 55-21-0 619-80-7 103-84-4 62-53-3 95-82-9
苯胺 2,5-二氯苯胺
A.2 HPLC方法11家实验室间的比对结果见表A.2。
表A.2 11家实验室采用HPLC方法的比对结果3)
Ko
IgKx
IgKx (批平衡法） 1. 81 1. 99 2. 37 2. 59 3. 31
CAS 1912-24-9 150-68-5 77608-88-3 330-55-2 55-38-9
物 质
（HPLC法）
阿特拉津灭草隆抑芽唑利谷隆倍硫磷
78 ± 16 100 ± 8 292 ± 58 465 ± 62 2 062± 648
1. 89 2. 00 2. 47 2. 67 3. 31
1) W.Kordel,D. Hennecke,M. Herrmann (1997).Application of the HPLC--screening method for the determina-
tion of the adsorption coefficient on sewage sludges.Chemosphere,35 (1/2),121-128. 2) W.Kordel,D. Hennecke,C.Franke (1997).Determination of the adsorption-coefficients of organic substances on
sewage sludges.Chemosphere,35(1/2),107-119. 3) W.Kordel,G.Kotthoff,J. Muller (1995).HPLC-screening method for the determination of the adsorption coef-
ficient on soil—Results of a ring test.Chemosphere,30 (7),1373-1384
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GB/T27860—2011
化学品 高效液相色谱法估算士壤和
污泥的吸附系数
Chemicals-Estimation of the adsorption coefficient (K) on soil and on sewage sludge using high performance liquid chromatography (HPLC)
2012-08-01实施
2011-12-30 发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
发布 GB/T27860—2011
前言
本标准按照GB/T1.1一2009的规则起草。 本标准与经济合作与发展组织（(OECD)化学品测试导则NO.121(2001年）《高效液相色谱法 估
算土壤和污泥中吸附系数》（英文版)技术内容相同。
本标准做了下列结构和编辑性修改：
将适用的化学物质示例由正文移人附录B中；一一计量单位改为我国法定计量单位；一为与现有标准系列一致，将标准名称改为《化学品高效液相色谱法估算土壤和污泥的吸附
-
系数》。 本标准由全国危险化学品管理标准化技术委员会（(SAC/TC251)提出并归口。 本标准起草单位：环境保护部化学品登记中心、沈阳化工研究院安全评价中心、上海市检测中心。 本标准主要起草人：周红、刘纯新、张鑫、侯松嵋、李莹、刘敏、邓芸芸、周林军。
I GB/T27860-2011
化学品高效液相色谱法估算土壤和
污泥的吸附系数
1范围
本标准规定了高效液相色谱法（HPLC)估算化学品在土壤和污泥中吸附系数的术语和定义、受试
物信息、方法概述、试验准备、试验、质量控制、数据与报告。
本标准适用于试验期间化学性质稳定的物质，尤其适用于难以用其他方法测试的物质，如：挥发性物质、由于水溶性差而无法分析检测其浓度的物质、对吸附试验器血具有强亲和性的化学物质，也适用于含有不能完全分离洗脱带的混合物体系（测试混合物的1gK。应给出其上下限）。
本标准适用的吸附系数（1gK。）范围为1.5～5.0。 本标准不适用于可与高效液相色谱固定相或流动相发生反应的物质、可与某些无机物以特殊方式
发生作用的物质（如，与粘土矿物质基础形成络合物）和表面活性剂、无机物、中强酸和碱。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T21851化学品批平衡法检测吸附/解吸附试验 GB/T21852化学品分配系数（正辛醇-水）高效液相色谱法试验
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3. 1
分配系数Kpartitioncoefficient 平衡状态下，化学物质在吸附剂（土壤或污泥)与水相之间的浓度之比。两相浓度均以质量浓度表
示时，K。无量纲；若水相浓度以质量/体积方式表示，则Ka的单位为毫升每克（mL/g）。K。值随吸附剂的性质不同而不同，并与吸附剂的浓度有关。见式（1)：
或
Ka= C水”
产
(1)
C水
式中： Ka 分配系数，无量纲或单位为毫升每克（mL/g）； C±一——平衡时土壤中受试物浓度，单位为微克每克（μg/g)； C污魂——平衡时污泥中受试物浓度，单位为微克每克（μg/g)； C水一—平衡时水相中受试物浓度，单位为微克每克(μg/g)或微克每毫升（μg/mL)。
3.2
弗罗因德利希吸附系数K，Freundlichadsorptioncoefficient 化学物质在水相中的平衡浓度为1μg/mL时，化学物质在吸附剂（土壤或污泥）（/m）中的浓度。
K：值随吸附剂的性质不同而不同。
1 GB/T27860--2011
对于大多数分子型化学物质，在土壤或污泥与水的两相系统中的吸附规律，遵循弗罗因德利希方程。见式（2）：
Ig＝=lgKt +1· gC*
2)
式中： K: -弗罗因德利希吸附系数： x/m- 平衡时吸附剂m吸附受试物的量，单位为微克每克（μg/g)； 1/n 吸附等温线斜率； C水
平衡时受试物在水相中的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）。
当水相中的平衡浓度C水为1μg/mL时，见式（3）：
IgK= g二
(3)
m
3.3
吸附系数Kadsorption coefficient 通过吸附剂（土壤或污泥)中有机碳含量对化学物质的分配系数（K。）或弗罗因德利希吸附系数
(K,)进行归一化而得到，使不同的化学物质之间具有可比性，尤其适用于非离子化物质。由于K。与 Kr的单位不同，K。可以是无量纲常数，也可以具有计量单位毫升每克（mL/g)或微克每克（μg/g）。K。 与Ka并不总呈线性关系。K。值随土壤的不同而有差异，但相对K。和K：而言，其差异明显减小。见式(4)：
会或
K=
(4)
fo fae
式中： Ko 吸附系数，无量纲，或单位为毫升每克（mL/g)或微克每克（μg/g）； K.- 分配系数，无量纲，或单位为毫升每克（mL/g）； K - 弗罗因德利希吸附系数； fo- 有机碳含量。
3. 4
容量因子 capacityfactor 分配平衡时，组分在固定相中的质量与在流动相中的质量比值。实际测试时，常根据化学物质的保
留时间计算而得。见式（5）：
_ tR-te
*(5)
to
式中： k"—.容量因子； tR 保留时间，单位为分（min）；
-死时间，单位为分（min）。
to
3. 5
正辛醇-水分配系数Ppartitioncoefficientofn-octanol-—water 平衡状态下，化学物质在正辛醇与水相之间的浓度之比，无量纲。见式（6）：
C正辛业 (= K。w)
（6)
P.
C
式中： Pow,K.w -正辛醇-水分配系数； C正幸停
-
平衡时受试物在正辛醇中的浓度，单位为微克每克（ug/g）或微克每毫升（μg/mL）；
2 GB/T27860—2011
C水—一平衡时受试物在水相中的浓度，单位为微克每克（μg/g)或微克每毫升（μg/mL）。
4受试物信息
受试物信息包括： a）分子式和结构式； b）纯度； c) 电离常数； d) 水、有机溶剂中溶解度； e) 正辛醇-水分配系数； f) 水解性。
5方法概述
5.1方法说明
K.c可通过它与化学物质的水溶性和正辛醇-水分配系数的相关性估算[2~5.8~9,13]。本方法用高效液相色谱(HPLC)法估算化学物质在土壤和污泥中的吸附系数K。10)。与定量构效关系方法(QSAR)相比，本方法具有更高的可靠性。但作为一种估算方法，本方法不能完全代替批平衡试验方法 (GB/T21851)。 5.2方法原理
HPLC采用含亲脂和极性基团的商业化氰基硅胶分析柱，该固定相具有中等极性，其硅胶表面键合相如下：
-0-Si —CHz-CH2—CH， -CN
非极性区
极性区
硅胶
:
当化学物质随流动相进入色谱柱，在流动相和固定相之间进行分配而被保留。由于氰基硅胶分析柱的固定相同时含有极性和非极性两种基团，可相应地与化学物质的极性和非极性基团发生作用。这与化学物质在土壤和污泥上的吸附具有相似之处。由此，建立化学物质液相色谱保留时间与吸附系数之间的关系。
pH值对物质，尤其是极性物质的吸附行为有非常重要的影响。农业土壤和污水处理池的pH值一般在5.5~7.5之间。对于pH值为5.5～7.5时电离度不小于10%的离子化合物，要求通过适当的缓冲溶液体系，分别测试受试物处于离子状态与非离子状态下的K。
本标准仅利用化学物质在HPLC柱上的保留时间与吸附系数之间的关系来测定受试物的吸附系数，不涉及定量分析方法，只需测定受试物的保留时间。采用一系列合适的参比物，在标准试验条件下进行测定，因此，可以提供一种快速、有效的估算受试物吸附系数K。的方法。 5.3参比物
通过HPLC保留时间数据来测定受试物的吸附系数K。c，首先应建立lgK与lgk之间的拟合校准曲线。选择参比物时应注意校准曲线至少由6个点拟合而成，其中大于和小于受试物K。值的各至少一个。
同时，应注意试验结果的准确性与参比物的选择有重要关系，因此，尽量选择与受试物结构相似的
3 GB/T27860—2011
参比物。
若此类信息不足，可选择适当的校准物质。通常选择同系物进行校准。附录A中表A.1和表A，3 分别给出了一些物质在土壤和污泥中的K。，可以用来作为校准物质。如有正当理由，也可选择其他校准物质。 5.4方法的准确性和有效性说明
一般情况下，用本方法估算的吸附系数与用批平衡法测得的吸附系数差异在士0.51gK。（参见附录 A中的表A.1）。如果选择结构与受试物结构非常相似的参比物，可以获得更高的准确性，
对48种物质（大部分是农药）的研究验证，用本方法估算的吸附系数与用批平衡法测得的吸附系数的相关系数R=0.95C1,11。
11个实验室之间的比对，进一步验证了本方法的有效性（参见附录A中的表A.2)(12]。 已证实本方法对列人附录A的表A.1中的物质是有效的，本方法也适用于列人附录B的物质。
6试验准备
6.1仪器设备
高效液相色谱仪，应配有无脉冲泵、适当的检测器、带有定量环的进样阀、硅胶键合氰基色谱柱。 相同固定相的保护柱置于进样系统与分析柱之间。色谱柱的一般选择原则为采用甲醇：水为
55：45的流动相。对lgK。=3.0的物质，其在色谱柱上的容量因子1gk>0.0；对1gK。=2.0的物质其在色谱柱上的容量因子1gk>一0.4。 6.2流动相
推荐使用以下两种流动相：
甲醇/水（55：45，体积比） —-甲醇/0.01M柠檬酸盐缓冲溶液pH6.0(55：45，体积比）用HPLC级甲醇、二次蒸馏水（或超纯水)或柠檬酸盐缓冲溶液配制洗脱液，使用之前需脱气处理。
采用等度洗脱方法。如果甲醇/水混合体系流动相不合适，可尝试其他有机溶剂/水混合体系，如：乙醇/ 水，乙腈/水混合体系。
对于离子型物质，建议使用缓冲盐溶液获得稳定的pH。但使用有机溶剂/缓冲盐溶液混合体系时，应避免盐析和色谱柱柱效的降低。
离子对试剂会影响固定相的吸附性质，使固定相发生不可逆的改变，因此，禁止使用含该类添加剂的流动相。若确使用添加剂，建议使用单独的色谱柱进行试验。
7试验
7.1溶质
受试物和参比物都应用流动相配制。 7.2温度条件
测试过程中记录实验室温度，建议使用恒温箱以确保校准、估算和测试过程中温度恒定。
7.3确定死时间t。
有两种方法可以确定HPLC死时间to。
4 GB/T27860-2011
一种是通过同系物测定。见化学品分配系数（正辛醇-水）高效液相色谱法试验（GB/T21852）[7。 另一种是通过不被色谱柱保留的惰性物质（如甲酰胺、硫脲或硝酸钠）测定。测定时至少重复进样
两次。 7.4确定保留时间
只要确认每种参比物的保留时间不受其他参比物的影响，可直接混合物进样，测定各参比物的保留
时间。各参比物的保留时间每天至少应在一定的时间间隔内校准两次，确保色谱柱性能稳定，未发生改变。如，在受试物进样前后分别进参比物，确保前后的保留时间没有发生飘移。受试物应单独进样，记录保留时间；进样尽可能少，避免色谱柱过载。
8质量控制
至少平行测定2次，两次平行测定之间的差异不大于0.251gKc。
9数据与报告
9.1数据处理
根据式（5），由死时间t和保留时间很，分别计算各参比物和受试物的容量因子。 根据参比物的IgK。（用批平衡法测得）与lgk'（参见附录A中的表A.1），建立校准曲线，校准曲线至少由6个点拟合而成，其中大于和小于受试物K。值的各至少个。 通过该校准曲线，由受试物的lgk值计算受试物的lgK值。 方法的准确性与参比物的选择有重要的关系，因此，尽量选择与受试物结构相似的参比物。如果此
类数据信息不足，也可选择结构不同的物质进行校准。 9.2试验报告
报告应包括以下内容：
受试物和参比物的名称、纯度，如果相关，应给出pK。值；一描述实验仪器和操作条件，如：分析柱和保护柱类型和规格、检测方式、流动相（包括组成比例和pH值）、测试过程的温度范围；
死时间及其测定方法；一受试物和参比物的进样量；一用于校准的参比物的保留时间；
-lgk'与1gK。的拟合回归线和曲线图；受试物的平均保留时间和1gK的估算；
一
一色谱图。
e GB/T 27860—2011
附 #录A （资料性附录）
不同方法获得的相关化学物质的K。值
不同方法获得的土壤和污泥K。值的比较见表A.1。
A.1
表A.1 不同方法获得的土壤和污泥K。值的比较1>,2)
污 泥 IgKo
土 壤
CAS
物 质
IgKo
4 (批平衡法) IgKo 0. 48
IgKoc HPLC法 2. 20 2. 89 3, 40 2. 26 3. 52 2. 94 1. 25 1, 66 1. 69 1. 64 2. 58
4
（批平衡法） (HPLC法)
1912-24-9 1.66 330-55-2
2.14 2.96 3.58 2. 21 3. 72 3. 03 1. 00 1. 49 1.53 1. 47 2.59
1. 81 2. 59 3. 31 1. 99 4. 09 2. 87 1. 26 1, 93 1.26 2. 07 2. 55
阿特拉津利谷隆倍硫磷灭草隆菲苯甲酸苯酯苯甲酰胺 4-硝基苯甲酰胺乙酰苯胺
0. 39 0. 30 0. 09 0. 27 0. 57 0. 07 0. 01 0. 27 0. 08 0. 43 0. 03
2. 43 3.75 1. 46 4. 35 3. 26 1. 60 1. 52 1.52 1.74 2. 45
0. 53 0. 17 0. 75 0. 63 0. 23 0.60 0. 03 0. 01 0. 27 0.14
55-38-9 150-68-5 85-01-8 93-99-2 55-21-0 619-80-7 103-84-4 62-53-3 95-82-9
苯胺 2,5-二氯苯胺
A.2 HPLC方法11家实验室间的比对结果见表A.2。
表A.2 11家实验室采用HPLC方法的比对结果3)
Ko
IgKx
IgKx (批平衡法） 1. 81 1. 99 2. 37 2. 59 3. 31
CAS 1912-24-9 150-68-5 77608-88-3 330-55-2 55-38-9
物 质
（HPLC法）
阿特拉津灭草隆抑芽唑利谷隆倍硫磷
78 ± 16 100 ± 8 292 ± 58 465 ± 62 2 062± 648
1. 89 2. 00 2. 47 2. 67 3. 31
1) W.Kordel,D. Hennecke,M. Herrmann (1997).Application of the HPLC--screening method for the determina-
tion of the adsorption coefficient on sewage sludges.Chemosphere,35 (1/2),121-128. 2) W.Kordel,D. Hennecke,C.Franke (1997).Determination of the adsorption-coefficients of organic substances on
sewage sludges.Chemosphere,35(1/2),107-119. 3) W.Kordel,G.Kotthoff,J. Muller (1995).HPLC-screening method for the determination of the adsorption coef-
ficient on soil—Results of a ring test.Chemosphere,30 (7),1373-1384
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