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高效液相色谱法测定猴耳环消炎胶囊中没食子酸的含量
杨晓宇
（黑龙江成功药业有限公司，黑龙江哈尔滨150001）
摘要：本文采用高校液相测定了获耳环消突胶案中没食子酸的含量，图定相为：安捷伦Cl8(4.6mmx250mm,5um)，乙精-甲醇-水（10:1:89)（用磷酸调PH值为3.0）为流动相，检测波长为270mm，流速1.0mL*min,柱温：30℃。没食子酸在150-900μg*mL-范图内呈良好的线性关系。没食子酸的平均回收率为99.6%，RSD为0.66%(n=6);此方法简便、准确、重现性好，可用于获耳环消炎胶囊中没食子酸的含量测定
关键词：猴耳环消炎胶囊：没食子酸：含量
猴耳环消炎胶囊为猴耳环干浸音制成的胶囊，主要用于上呼吸道感染，急性咽喉炎，急性扁桃体炎，急性胃肠炎的治疗。“猴耳环” 是一种比较珍稀的中药材，主要分布在广东粤北山区，民间叫婆树、围涎树、鸡心树、三不正、尿桶公、洗头树、落地金钱等-。猴耳环是双子叶植物纲、含差草亚科植物，是多年生乔本植物，被医药学家李时珍收录在所著《本草纲目》中收载。猴耳环性味苦涩寒，具有清热解毒、收湿敛疮的功效，临床应用于咽喉肿痛，包括喉炎、急性扁桃体炎；肺热咳嗽、包括上呼吸道感染、肺炎；以及湿热泻，包括急性肠炎、输疾等-)。《广西药植名录》记载“翼耳环消肿：治风湿通，跌打，火烫伤。民间传统以猴耳环枝叶煮水洗疮及化脓性伤口、湿等.去腐生新功效独特。"没食子酸(英语：Gallieacid)亦称五倍子酸或梧酸，是一种有机酸，可见于五倍子、漆树、茶等植物中。本文采用高校液相测定了族耳环消荧胶囊中没食子酸的含量。
1仅器与试药
便携式pH计CP-401（深圳市朗诚实业有限公司);ELGA PURELABUltra实验室超纯水系统（天津市劳尔科技有限公司）； Cometro高效液相色谱仪（梯度系统）天津琛航科苑科技发展有限公司);HU数控系列超声波清洗器（天津市恒奥科技发展有限公司）；UV-5500型紫外可见分光光度计（上海元析仪器有限公司）： ULABO实验室温度控制器(优莱博技术(北京)有限公司)HH一601 超级恒温水浴（江苏金坛市亿通电子有限公司）。没食子酸对照品由
验表明，没食子酸对照品在150-900μg*mL-范围内线性关系良好
2.6精密度试验
依照2.4项下制备对照品溶波，精密吸取没食子酸对照品溶液 10μL重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的 RSD为0.62%。结果表明，本实验精密度良好。
2.7重现性试验
分别称取同批猴耳环消炎胶囊样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液测定含量，并计算样晶的RSD值，结果RSD为 0.53，结果表明，此含量测定方法的重现性良好。
2.8稳定性试验
依照2.3项下供试品制备方法制备供试品溶液，分别在 0，2，4，6小时精密吸取供试品落液注人液相色谱仪，进样测定，供试品没食子酸峰面积积分值的RSD为0.83%。结果表明没食子酸至少在6小时内稳定。
2.9回收率试验
采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，精密称定，分精密添加一定量的没食子酸对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶渡，测定含量(同时测定样品含量).计算回收率。6 次测定的平均回收率为99.6%，RSD为0.66%。
2.10样品含量测定
依照上述含量测定方法，测定猴耳环消炎胶囊三批样品中没食
中国药品生物制品检定所提供。冰醋酸（永华化学科技（江苏)有限
子酸的含量，含量为28μg/g、29μg/g.30μg/g
公司）、乙精（武汉市伟琪博星生物科技有限公司)、甲醇（武汉市伟
琪博星生物科技有限公司）、磷酸（上海天普分析仪器有限公司）、三乙胺(萨恩化学技术(上海)有限公司)、磷酸二氢铵（永华化学科技(江苏)有限公司)。
2含量测定 2.1色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下。色谱柱为安捷伦C8规格为(4.6mm×250mm.5um)：乙晴-甲醇-水（10：1： 89)(用磷酸调PH值为3.0)为流动相：检测波长为270nm。理论板数按没食子酸峰计算应不得低于2000
2.2供试品落液的制备
3讨论
分别考察乙腈-甲醇-水（10：1:89)（用磷酸调PH值为3.0)， 0.067mol-L-磷酸二氢铵溶液-乙腈-三乙胺(60：40:0.02)，甲醇-0.08%磷酸溶液（25:75），乙晴-甲醇水（10：1：89)用磷酸调PH 值为5.0），乙腈-0.08%磷酸溶液（20:80），乙睛-甲醇-水（10:5： 85)（用磷酸调PH值为3.0).水-甲醇-三乙胺(60：40：0.01).水乙晴-三乙胺(80：20：0.01)不同比例的流动相，结果以乙晴-甲醇-水（10：1：89)（用磷酸调PH值为3.0)为流动相.供试品各峰分离效果最好，故选用乙睛-甲醇-水(10：1：89)（用磷酸调PH值为 3.0)为流动相。此方法简便、准确、重现性好，可用于猴耳环消荧胶
取猴耳环消炎胶囊内容物，研细，精密称取，精密加人50%甲醇
囊中没食子酸的含量测定。族耳环消炎胶囊中没食子酸的含量不少于28μg/g
30mL，超声提取30分钟，放冷，过滤，滤液转移至50毫升容量瓶内
用50%甲醇定容，摇匀，即得。
2.3对照品溶液的制备
精密称取没食子酸对照品约5mg，用50%甲醇溶解并稀释成每 1ml中含300μg的溶液，作为对照溶液。
2.4阴性溶液的制备
依照处方取猴耳环消炎胶囊辅料，按样品制备工艺制成阴性对照样品，照供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在没食子酸出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表
明本方法专属性良好。
2.5准曲线的制备
参考文献
[1]美冀,罗显峰,于梧,徐扬,胡冲,刘庆博.猴耳环叶化学成分的分高与鉴定[].流阳药科大学学报,2014(4).
[2]李鏡友,罗巧红,张受,陈军,张志坚,黄桂芳.HPLC法测定不同采收期联耳环中没食子酸的含量.中药材，2009(6)
[3郭晓宇，王乃利.宝丽，李轶华徐强，姚新生.耳环的化学成分及其对T淋巴细胞增殖的影响(英文)[J]Joumal of Chinese Pharmaceuti-
cal Sciences,2007(3)
[4]李药兰,李克明,苏妙贤,梁锦堂,陈五式,张永文.获耳环抗病毒有效成分研究[J].中国中药杂志，2006(5)
制备浓度为150,300.450.600、750,900μg*mL-的对照品溶液，分别精密吸取10μL注人HPLC，记录色谱图。以峰面积积分值 A(μg)为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试
[5]苏妙贤,唐之岳,黄伟欢,李药兰,琴颗洲.获耳环化学成分研究[J]中药材，2009(5)