研究报告
中国酿造
2011年第11期总第236期
樟芝真菌类物质提取研究及色谱指纹图谱的建立
孙金旭
（衡水学院生命科学系，河北衡水053000）
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摘要：利用不同方法对樟芝真菌菌丝体中的三类化合物进行提取，研究表明，乙醇微波提取法优于其它，最高提取量达到 26.28mg/g:通过对不同浓度的乙醇微波法提取三粘类化合物的研究发现，乙醇浓度对三类化合物的提取有一定的影响，95%vol的乙醇最好；对各乙醇浓度下提取物的HPLC谱图分析可知，在相对保留时间为0.66、0.75、1.00、1.30、2.10（即出峰时间大体在7.420min、 8.383min、11.172min、14.529min、23.411min），各浓度提取条件均有相对面积，即有峰出现，确定此5点为乙醇微波提取樟芝真菌菌丝体中三荫类化合物的指纹图谱。
关键词：樟芝：三薪：提取：指纹图谱
中图分类号：R284.2
文献标识码：A
文章编号：0254-5071(2011)11-0135-03
Extraction oftriterpene fromAntrodia camphorataand establishment of theHPLC fingerprint
SUNJinxu
(Department of Biology, Hengshui College, Hengshui 053000, China)
Abstract: The method of extracting triterpene from Antrodia camphorata and the HPLC fingerprint were established in this paper. The results showed that the optimal method was microwave-assisted extraction, and the extracting efficiency could reach 26.28 mg/g, The effect of ethanol concentration[edo eaadaaaeaaaeeneaooeaeoseaesaseaana concentration was 95%vol. HPLC fingerprint of extracts with different concentration ethanol showed that relative retention time were 0.66, 0.75, 1.00, 1.30, 2.10, which were corresponding to peak time 7.420min, 8.383min, 11.172min, 14.529min and 23.411min, respectively. Therefore, the
five-point was recognized as fingerprint for ethanol extraction of Antrodia camphorata triterpenes. Key words: Antrodia campborata; triterpenes; extraction; fingerprint
樟芝（Antrodiacamphorata）是我国待有的珍稀药用真菌，且专一寄生于牛樟树上，樟芝的化学成分非常复杂，现代分离技术证实，樟芝含有防癌、抗癌、提高免疫力的生理活性物质，主要成分为多糖体和三荫类化合物口。就目前研究来说，以樟芝多糖研究颇多，而涉及到的三苫类化合物的研究较少，大陆对樟芝中三菇类化合物的研究几乎为零，本研究在采用深层发酵技术培养樟芝真菌菌丝体的基础上，对樟芝真菌菌丝体中三菇类化合物的提取工艺及色谱指纹图谱的建立进行了研究，以期为樟芝真菌的深入
开发奠定基础。 1材料和方法 1.1菌株
樟芝真菌（Antrodiacamphorata)，本实验室保藏。 1.2樟芝真菌菌丝体
本实验室利用10L发酵罐发酵后得到的发酵液用已烘干并称重的滤纸过滤，用水冲洗至洗液不再带有发酵液颜色为止。80℃恒温烘至恒重，在干燥器中冷却至常温，称重。
1.3检测方法
1.3.1菌体胞内三范类化合物含量的测定
(1)三类化合物标准曲线的制备
准确称取三类化合物标准溶液0、0.02mL、0.04mL、
收稿日期：2011-07-07
0.06mL、0.08mL、0.1mL，用无水乙醇补至0.1mL，添加0.2mL 香草醛，0.5mL高氯酸，混匀后60℃水浴保温30min，取出后冷却处理15min，加入5mL冰乙酸，波长550nm处测定吸光度值，根据对应浓度确定出标准曲线。
(2)样品测定
樟芝真菌菌丝体烘干后，研磨成粉末，称取1g菌丝体加入有机溶剂，相应处理后，比色法测定胞内三类化合物的含量。
1.3.2樟芝胞内三荫类化合物提取方法
(1)不同溶剂提取
A：1g樟芝真菌菌丝体干样，加入50mL甲醇溶液静置 24h，过滤，取上清液10mL水浴蒸干：B：1g樟芝真菌菌丝体干样，加入50mL95%vol乙醇溶液静置24h，后处理同A；C： 1g樟芝真菌菌丝体干样，加入50mL甲醇溶液微波提取4h，后处理同A；D：1g樟芝真菌菌丝体干样，加入50mL95%vol 乙醇溶液微波提取4h，后处理同A：E：1g樟芝真菌菌丝体干样，加入50mL甲醇溶液超声提取4h，后处理同A：F：1g 樟芝真菌菌丝体干样，加入50mL95%vol乙醇溶液超声提取4h，后处理同A。
(2)不同浓度乙醇提取
1g樟芝真菌菌丝体干样，加入50mL不同浓度乙醇溶液微波提取4h，过滤，取上清液10mL水浴蒸于。
作者简介：孙金旭（1975-)，男，河北景县人，副教授，主要从事微生物、发酵工程、食品方面研究工作。