纸层析法分离鉴定氨基酸实验的改进
陈倩’刘晶’张璐
（1西北大学现代学院，陕西西安710130 2西安外事学院，陕西西安710077）
Improvement of Separation and
综合管理
Identification of AminoAcids by Paper
Chromatography Chen Qian,Liu Jing,Zhang Lu
(Modern College of Northwest University,Xi'an 710130, China
Xi'an International University,Xi'an 710077,China)
摘要：纸层析法分离鉴定氨基酸是制药工程专业本科必修实验课，文献实验方法存在实验时润过长、溶制毒性大等缺点。通过实验对展开剂进行选择，得出展开剂的最佳配比，并在此条件下对赖氨酸、苯丙氨酸、甘氢酸、亮氨酸和脯氨酸等进行了分离和鉴定，取得了较好的分离结果。该方法与文缺相比，简化操作步象，节约仪器试剂，节省实验时阔，使用毒性较小的溶剂，符合绿色化学的要求。
关键词：抵层析法；氯基酸；比移债；绿色实验
Abstract: The paper chromatography separation of amino ac-ids is a compulsory biological experiment for undergraduate major in pharmaceutical engineering.But some shortcomings, such as a long duration, toxicity of the solvent, exist in this experiment. This study conducted the influence factors, obtained the best ratio of the expansion agent. We isolated and identified lysine, phenylal-anine, glycine, leucine and proline under this condition. It showed a better separation effect. Compared with the method in literature, the improved paper chromatography has the advantage of more simple steps, less agent dose and instrument, shorter separate time, more obvious separate effect, less toxic solvents, which conforms to the green chemistry request
Keywords: Paper chromatography; Amino acid; Rf Value;
Green experiment 1仪器与试剂
仪器：定性滤纸，点样毛细管，电吹风，500mL烧杯，培养血，镊子。
试剂：各种试剂均为分析纯。万方数据
氨基酸标准溶液：称取氮基酸250mg溶于50mL0.01mol L"的HCI溶液中
氮基酸混合样品液：各量取2mL的赖氨酸溶液，苯丙氨酸溶液，甘氨酸溶液，脯氨酸溶液和亮氮酸溶液，于小烧杯中充分混合均勾。
扩展剂：95%乙醇：水=7:3(v:v），称取萌三酮200mg溶于 200mL按比例配置好的乙醇水落液中，
前三酮可溶于乙醇和水，因此直接将三酮溶解在展层剂中，扩展剂沿滤纸向上移动，前三酮也随之向上移动，层析结束后，溶剂前沿以下的部分均勾分布着扩展剂和三酮，氮基酸则因分配系数的不同而在纸上分离，加热后在氮基酸所在位置
即可显出色斑。 2实验步骤
(1)点样：取滤纸（定性滤纸裁成7.2×11cm)1张，距一端 2cm处用铅笔轻轻的划线，然后在线上分别用0.5%赖氨酸、 0.5%苯丙氨酸、0.5%甘氮酸、0.5%亮氨酸溶液，0.5%脯氨酸溶液及氮基酸混合样品溶液均勾点样，每点点2-3次，每次点样完成后用吹风机冷风吹干，每点在纸上扩散的直径最大不超过5 mm。
(2)展层：烧杯中加入配好的展层剂厚度约1.5cm(体积约 50mL），将点好样的滤纸竖直放人，点样端朝下，展层时间2h。
(3)烘干、显色：展层结束后，取出滤纸，用铅笔标记溶剂前沿，电吹风热风吹干约2-3min。待各斑点显色后，用铅笔轻轻描出斑点轮廓
(4)标记斑点中心，用直尺测量斑点中心至点样线间的距离及溶剂前沿至点样线间的距离。计算各点比移值。
2017年04月
化置理|25