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以金纳米簇为荧光探针测定产品中微量硒李进张隆隆刘字华黄晓君周建湘（广东福寿仙生物科技有限公司，广东广州510470）
摘要：合成了鸡蛋白蛋白(CEA)保护的水溶性全纳米袭(CEA-AuNCs)，研究了循对全纳米族荧光释灭的影响，确定了最优分析条件。在最佳实验条件下，硒在0.5-10μg/g范围时，金纳米簇的荧光释灭程度与硒浓度呈线性关系，线性回归方程为：F0/F=0.05910C+1.0021，线性相关系数为0.9992。对5个样品进行了测定，5次测定值的相对标准偏差<4%，加标园收率在94%-106%范围内。
关键词：中草药；化妆品；硒；全纳米篆；荧光探针
硒是一种人体必需的准金属微量元素，但化物对皮肤有强烈的刺激性，造成红斑、水疮或溃疡。氧化硒会引起皮肤剧痛和麻木，经吸收会造成内脏中毒。因此，硒的定量检测具有重要意义。金纳米簇的优异荧光特性，引起分析化学的广泛关注。本文利用硒对金纳米簇荧光灭特性，建立了硒的分析新方法。
1实验部分 1.1仪器与试剂
F-4500型荧光分光光度计(日本日立公司)。鸡蛋白蛋白(国药集团化学试剂有限公司)氯金酸(湖南试剂厂)硒标准使用液[p(Se)=1.Oμg/ml:将硒标准储备溶液逐级稀释成硒标准使用溶液。其他辅助试剂均为分析纯。实验用水为二次去离子水。
1.2金纳米簇的制备
取10mL氯金酸溶液(10mmol/L37C)加人到10mL鸡蛋白蛋白溶液(50mg/mL,37℃)中搅拌混勾，2分钟之后，加人1mL 1mol/L的NaOH溶液，然后将混合液置于37℃C水浴中连续搅拌 20个小时。反应结束后，得到棕色溶液，所制备的金纳米筷置
于冰箱(4℃)避光储存备用。 1.3硒含量的测定
依次向5mL比色管中加人0.2mL金纳米簇，0.5mL硒稀释溶液和2mLpH5.9的磷酸二氢钾-磷酸氢二钠缓冲液(PBS)，用水定容混勾。在30℃水浴中反应15min,以520nm为激发波长，测定其荧光强度(F），按同样的方法测定试剂空白的
荧光强度(FO)。 2结果与讨论
2.1反应时间和反应温度的选择
向金纳米簇溶液中加人10μg/mL的溶液时，体系荧光强度迅速下降，5min后基本达到稳定,并在60min内不变。在后续实验中，反应时间定为10min。因此可以实现对硒的快速检
32方方数理2016年11月
测。研究了温度对反应体系的影响。实验表明，在30℃左右时反应迅速，重现性好。因此，后续实验均在30℃水浴中进行。 2.2缓冲体系pH值和浓度的选择
研究考察了不同pH值(4.5-8.0)的PBS缓冲溶液对反应体系相对荧光的影响，结果表明，在
PH5.0-6.5时，酒溶液对金纳米簇的荧光猝灭程度随p H的增大而增大当pH为6.5时，反应体系的荧光猝灭程度最大，并且稳定。当pH>6.5时，荧光猝灭程度随pH升高反而降
低。后续实验均在pH为6.5的体系中进行。 2.3分析特性
研究了硒浓度对金纳米簇荧光的灭情况，在0.5-10μg/g 范围时，体系荧光灭程度与酒浓度呈线性关系，其线性回归方程为Fs/F=0.05910C+1.0021，相关系数为0.9968,检测限为
0.1ugg，能满足化妆品中硒的测定要求。 2.4产品中微量的测定
称取中草药、化妆品试样1-2g置于消化管中，加人10mL硝酸由低温至高温加热消解，当消解液体积减少到2mL-3mL,移去热源，冷却。加人高氯酸继续加热消解，不时缓缓摇动使均勾.消解至冒白烟，取下。稍冷后加人盐酸4mL继续加热至产生白烟，立即取下，并用水定容，取得待测溶液。
按前面所述测定方法对硒含量及回收率测定，测定3种中草药和2种市售化妆品，并每个样平行测定5次，5次测定值的值的相对标准差小于4%，加标回收率在94%-106%范围内，表明该法的准确性和精密度均较高，可用于硒的定量分析。
表1样品中硒含量测定
样品中草药！中章药2 中章药3 化妆品！化妆品2 3结语
测得平均值(ug/g) 2.16 1.20 1.83 1.13 1.16
RSD/ 3.4 2.6 2.9 3.7
加标量(/L) 3.00 1.00 2.00
2.1
1.00 1.00
加标测定值(/g) 5.32 2.16 3.71 2.08 2.18
国收*/% 105.3 96.0 94.5 95.0 102.0
本文基于硒对金纳米簇荧光强度的猝灭，建立了微量硒测定的新方法。具有灵敏度高、检出限低、方法快速简便等优点，适于实际应用中测定中草药、化妆品的硒含量。
作者简介：李进（1987-），男，硕士学历，湖南益阳人，